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以糖蜜為底物發(fā)酵生產(chǎn)韋蘭膠的條件優(yōu)化及其特性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-12 06:35
【摘要】:韋蘭膠(Welan Gum)是鞘氨醇單胞菌(Sphingomomassp.)發(fā)酵產(chǎn)生的一種酸性陰離子胞外多糖,具有優(yōu)良的流變性、穩(wěn)定性、增稠性和懸浮性,這使得它在食品、水泥和石油工業(yè)中備受青睞。然而,目前韋蘭膠發(fā)酵生產(chǎn)還存在著傳氧困難、成本高的問(wèn)題。甘蔗糖蜜作為廣西特色生物質(zhì)資源,不僅價(jià)格低廉、營(yíng)養(yǎng)豐富而且已在發(fā)酵工業(yè)的實(shí)際生產(chǎn)中得到了應(yīng)用。因此,若能夠利用甘蔗糖蜜發(fā)酵生產(chǎn)韋蘭膠,實(shí)現(xiàn)生物質(zhì)資源的高值化利用,將為韋蘭膠的高效低成本生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。本文以Sphingomonas paucimobili FM01為出發(fā)菌株,以高效生產(chǎn)韋蘭膠為目標(biāo),開(kāi)展糖蜜預(yù)處理、培養(yǎng)條件優(yōu)化、結(jié)構(gòu)表征、流變性質(zhì)等相關(guān)研究。主要研究結(jié)果如下:1.分別考察了六種糖蜜預(yù)處理方法對(duì)韋蘭膠發(fā)酵的影響。其中,對(duì)糖蜜膠體、灰分、重金屬元素清除效果最好的為磷酸加絮凝劑助清法,其次為活性炭結(jié)合硅藻土法。利用磷酸加絮凝劑助清法處理糖蜜發(fā)酵生產(chǎn)韋蘭膠相較未處理糖蜜產(chǎn)量提高了38%。2.考察了培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件對(duì)韋蘭膠發(fā)酵的影響:(1)單因素優(yōu)化后得到最佳營(yíng)養(yǎng)條件:糖蜜糖濃度60 g·L~(-1),牛肉膏6g·L~(-1),磷酸二氫鉀3 g·L~(-1)、硫酸鎂0.5 g·L~(-1),氯化鈉1 g·L~(-1)。(2)單因素實(shí)驗(yàn)得到最佳培養(yǎng)條件:搖床250r/min;裝液量75mL/500mL;培養(yǎng)溫度30℃。以此上述發(fā)酵條件進(jìn)行72 h發(fā)酵驗(yàn)證,得到韋蘭膠產(chǎn)量為26.31 g·L~(-1),比優(yōu)化前提高了64%。3.(1)考察了四種氧載體以及H_2O_2對(duì)糖蜜韋蘭膠發(fā)酵的影響,當(dāng)H_2O_2濃度為15mmol/L,添加時(shí)間為48h時(shí)獲得最大韋蘭膠產(chǎn)量31.22g·L~(-1)。(2)考察了煙酸、檸檬酸、尿嘧啶對(duì)糖蜜韋蘭膠發(fā)酵的影響,當(dāng)煙酸添加量為4 mg· L~(-1)時(shí),相比對(duì)照組提高了4.47%,達(dá)到了33.93 g·L~(-1);而尿嘧啶和檸檬酸均對(duì)韋蘭膠合成有抑制作用。在最優(yōu)條件進(jìn)行72 h發(fā)酵驗(yàn)證,得到韋蘭膠產(chǎn)量為37.65 g·L~(-1)。4.(1)對(duì)糖蜜韋蘭膠和蔗糖韋蘭膠進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,結(jié)果表明:兩種韋蘭膠分子鍵型一致;蔗糖韋蘭膠四種單糖摩爾比為甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖=1:33.65:3.24:21.09;糖蜜韋蘭膠七種單糖摩爾比為甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:木糖:阿拉伯糖=1:11.17:2.83:6.88:2.17:1.04:2.27;掃描電鏡顯示蔗糖韋蘭膠與糖蜜韋蘭膠由粗長(zhǎng)片狀尾部撕裂成若干個(gè)細(xì)絲狀,形成細(xì)長(zhǎng)絲狀、緊密聚集的空間結(jié)構(gòu)。(2)對(duì)兩種韋蘭膠溶液進(jìn)行流變性質(zhì)研究。通過(guò)振幅掃描確定應(yīng)變?yōu)?0%;在15 Hz內(nèi)兩種韋蘭膠溶液的存儲(chǔ)模量大于損耗模量,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定;在升溫過(guò)程中兩種韋蘭膠溶液存儲(chǔ)模量和損耗模量降低;在2%-10%氯化鈉、氯化鉀的條件下兩種韋蘭膠溶液流變性質(zhì)穩(wěn)定;pH 6-9范圍內(nèi)對(duì)兩種韋蘭膠溶液的剪切黏度影響不大,但在強(qiáng)酸強(qiáng)堿環(huán)境下,兩種韋蘭膠溶液的剪切黏度略有下降。
【圖文】:

產(chǎn)糖量,糖料蔗,廣西,糖業(yè)


因此,開(kāi)發(fā)一種利用廉價(jià)碳源合成韋蘭膠的生物策略是非常迫切的。逡逑蜜作為發(fā)酵底物的優(yōu)勢(shì)逡逑1)廣西產(chǎn)量多、價(jià)格低廉。廣西壯族自治區(qū)是我國(guó)的糖業(yè)生產(chǎn)基地、集散地和交逡逑,其產(chǎn)糖量占全國(guó)產(chǎn)量的60%以上,據(jù)廣西糖業(yè)發(fā)展辦公室統(tǒng)計(jì)2017-2018年廣逡逑種植面積為1140萬(wàn)畝,產(chǎn)糖量560-600萬(wàn)噸,種植面積同比增長(zhǎng)了邋5%,,產(chǎn)糖量逡逑長(zhǎng)6%-9%,甘蔗漲勢(shì)喜人。不僅如此,廣西還建設(shè)了邋“雙高”(高產(chǎn)高糖)糖料逡逑建設(shè),使得基地中每噸甘蔗可以節(jié)約60元成本,若按《糖料蔗主產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)發(fā)展逡逑進(jìn)行,在2020年廣西糖料蔗種植成本將會(huì)節(jié)約150元/噸。糖蜜作為糖業(yè)的副產(chǎn)逡逑在廣西的產(chǎn)量每年也能達(dá)到1.8X106噸以上,但價(jià)格只有300-400元/噸[4()]。糖業(yè)逡逑經(jīng)濟(jì)的支柱產(chǎn)業(yè),若將糖蜜直接應(yīng)用,其附加價(jià)值低,收益。郏矗保荩欢蒙锇l(fā)逡逑蜜轉(zhuǎn)化為高價(jià)值產(chǎn)品,不僅可以解決廣西制糖產(chǎn)業(yè)副產(chǎn)物利用的問(wèn)題,還可以提逡逑的附加價(jià)值,從環(huán)保和長(zhǎng)遠(yuǎn)的角度出發(fā),都具有可持續(xù)性。逡逑

標(biāo)準(zhǔn)曲線,果糖,蔗糖,葡萄糖


糖母液用超純水定容至50mL,得到的混糖濃度分別為:5、10、20、40rng/mL的混糖逡逑標(biāo)準(zhǔn)溶液,。冲澹恚谈鳚舛葮(biāo)準(zhǔn)液加7mL乙醇,針孔式0.22邋pm水膜過(guò)濾,于液相樣品逡逑瓶中。以峰面積為橫坐標(biāo),以糖濃度為縱坐標(biāo),果糖、葡萄糖、蔗糖標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2-1逡逑所示。逡逑液相色譜條件:檢測(cè)器為示差檢測(cè)器;色譜柱:ZORBAXNFb柱(4.6x250mm,逡逑5嘩);柱溫30°C;流動(dòng)相為80%乙腈和20%超純水,流速為l.OmL'min-1,進(jìn)樣量20逡逑|xL0逡逑15逡逑
【學(xué)位授予單位】:廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TQ281;TQ920.6

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1 周Z

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