菠蘿蜜果實(shí)糖代謝相關(guān)酶活性及其基因表達(dá)分析
發(fā)布時間:2025-04-15 00:30
決定果實(shí)品質(zhì)重要因素之一是果實(shí)中糖分含量以及組成種類,而影響果實(shí)糖分的代謝過程極其復(fù)雜,受多種酶共同調(diào)節(jié)。為了解菠蘿蜜果實(shí)糖代謝過程的主要作用酶和基因,本研究分別以4份干苞種質(zhì)(12E、13D、13K、148-4)和份濕苞種質(zhì)(12As、12Cs、13Bs、13Ls)為實(shí)驗(yàn)材料,分析了菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中的糖分含量變化、糖代謝相關(guān)酶活性變化,并對相應(yīng)的酶基因進(jìn)行了表達(dá)分析,主要研究結(jié)果如下:1.可溶性糖含量。干、濕苞菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中,蔗糖是最主要的可溶性糖,其次是果糖和葡萄糖,不同種質(zhì)間可溶性糖和蔗糖含量存在差異,除干苞種質(zhì)13K和濕苞種質(zhì)13Bs在果實(shí)成熟第IV階段略微下降外,4種糖的含量在菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中均呈逐漸上升的趨勢;果實(shí)未成熟時果糖與葡萄糖比值較低,完全成熟后該比值接近1:1。2.酸性轉(zhuǎn)化酶。菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中的酸性轉(zhuǎn)化酶活性變化在干、濕苞種質(zhì)中有明顯差異,干苞種質(zhì)果實(shí)中的酸性轉(zhuǎn)化酶活性相對穩(wěn)定,且維持較低水平,濕苞種質(zhì)果實(shí)中的酸性轉(zhuǎn)化酶活性在果實(shí)成熟過程中顯著上升,其中濕苞種質(zhì)12Cs和13Bs果實(shí)中的酸性轉(zhuǎn)化酶活性與果實(shí)中的果糖和葡萄糖含量間存在顯著正相關(guān);對1...
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 不同果實(shí)的糖分組成
1.2 果實(shí)糖分積累類型
1.3 果實(shí)中糖代謝相關(guān)的酶
1.3.1 轉(zhuǎn)化酶
1.3.2 蔗糖合成酶
1.3.3 蔗糖磷酸合成酶
1.3.4 淀粉酶
1.4 實(shí)時熒光定量PCR
1.5 菠蘿蜜糖分組成及含量研究進(jìn)展
2 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖分含量與相關(guān)酶活性分析
2.1 試驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 試驗(yàn)方法
2.3.1 可溶性總糖與單糖的提取
2.3.2 可溶性總糖測定
2.3.3 果糖、葡萄糖和蔗糖含量的測定
2.3.4 酶液的提取
2.3.5 糖代謝相關(guān)酶活性的測定
2.4 數(shù)據(jù)處理
2.5 結(jié)果與分析
2.5.1 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中的可溶性總糖含量變化
2.5.2 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中果糖含量變化
2.5.3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中葡萄糖含量變化
2.5.4 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖含量的變化
2.5.5 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)活性變化
2.5.6 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中鐘祥轉(zhuǎn)化酶(NI)活性的變化
2.5.7 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖合成酶(SS)活性的變化
2.5.8 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的變化
2.5.9 菠蘿蜜果實(shí)中糖含量與糖代謝相關(guān)酶活性相關(guān)性分析
2.6 討論
2.7 結(jié)論
3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖代謝相關(guān)酶基因的表達(dá)分析
3.1 試驗(yàn)材料
3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 試驗(yàn)方法
3.3.1 RNA的提取
3.3.2 cDNA第一鏈合成
3.3.3 PCR引物設(shè)計(jì)和擴(kuò)增產(chǎn)物檢測
3.3.4 熒光定量PCR分析
3.3.5 數(shù)據(jù)分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 總RNA的提取
3.4.2 目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物特異性分析
3.4.3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中ɑ-淀粉酶基因的表達(dá)變化
3.4.4 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中 β-淀粉酶基因的表達(dá)變化
3.4.5 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中酸性轉(zhuǎn)化酶基因的表達(dá)
3.4.6 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中中性轉(zhuǎn)化酶基因的表達(dá)
3.4.7 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖合成酶基因的表達(dá)
3.4.8 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖磷酸合成酶基因的表達(dá)
3.5 討論
3.5.1 淀粉酶基因在菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝中的作用
3.5.2 酸性轉(zhuǎn)化酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.3 中性轉(zhuǎn)化酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.4 蔗糖合成酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.5 蔗糖磷酸合成酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介
本文編號:4039788
【文章頁數(shù)】:61 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
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引言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 不同果實(shí)的糖分組成
1.2 果實(shí)糖分積累類型
1.3 果實(shí)中糖代謝相關(guān)的酶
1.3.1 轉(zhuǎn)化酶
1.3.2 蔗糖合成酶
1.3.3 蔗糖磷酸合成酶
1.3.4 淀粉酶
1.4 實(shí)時熒光定量PCR
1.5 菠蘿蜜糖分組成及含量研究進(jìn)展
2 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖分含量與相關(guān)酶活性分析
2.1 試驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.3 試驗(yàn)方法
2.3.1 可溶性總糖與單糖的提取
2.3.2 可溶性總糖測定
2.3.3 果糖、葡萄糖和蔗糖含量的測定
2.3.4 酶液的提取
2.3.5 糖代謝相關(guān)酶活性的測定
2.4 數(shù)據(jù)處理
2.5 結(jié)果與分析
2.5.1 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中的可溶性總糖含量變化
2.5.2 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中果糖含量變化
2.5.3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中葡萄糖含量變化
2.5.4 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖含量的變化
2.5.5 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)活性變化
2.5.6 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中鐘祥轉(zhuǎn)化酶(NI)活性的變化
2.5.7 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖合成酶(SS)活性的變化
2.5.8 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的變化
2.5.9 菠蘿蜜果實(shí)中糖含量與糖代謝相關(guān)酶活性相關(guān)性分析
2.6 討論
2.7 結(jié)論
3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖代謝相關(guān)酶基因的表達(dá)分析
3.1 試驗(yàn)材料
3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.3 試驗(yàn)方法
3.3.1 RNA的提取
3.3.2 cDNA第一鏈合成
3.3.3 PCR引物設(shè)計(jì)和擴(kuò)增產(chǎn)物檢測
3.3.4 熒光定量PCR分析
3.3.5 數(shù)據(jù)分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 總RNA的提取
3.4.2 目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物特異性分析
3.4.3 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中ɑ-淀粉酶基因的表達(dá)變化
3.4.4 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中 β-淀粉酶基因的表達(dá)變化
3.4.5 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中酸性轉(zhuǎn)化酶基因的表達(dá)
3.4.6 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中中性轉(zhuǎn)化酶基因的表達(dá)
3.4.7 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖合成酶基因的表達(dá)
3.4.8 菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中蔗糖磷酸合成酶基因的表達(dá)
3.5 討論
3.5.1 淀粉酶基因在菠蘿蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝中的作用
3.5.2 酸性轉(zhuǎn)化酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.3 中性轉(zhuǎn)化酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.4 蔗糖合成酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.5.5 蔗糖磷酸合成酶基因?qū)Σぬ}蜜果實(shí)成熟過程中糖分代謝的作用
3.6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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導(dǎo)師簡介
本文編號:4039788
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