【目的】獲得雙孢蘑菇凝集素基因,了解雙孢蘑菇凝集素家族蛋白的功能�！痉椒ā扛鶕�(jù)已報(bào)道的雙孢蘑菇凝集素基因序列設(shè)計(jì)引物,以總DNA為模板擴(kuò)增雙孢蘑菇凝集素基因。將長(zhǎng)432 bp的基因亞型克隆后連接至攜帶His標(biāo)簽的原核表達(dá)載體pET-28a,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)親和層析純化后,進(jìn)行Western blot印跡分析。【結(jié)果】擴(kuò)增的凝集素基因大小為432 bp,重組表達(dá)質(zhì)粒pET-Lectin構(gòu)建正確,重組凝集素蛋白在大腸桿菌BL21(DE3)中的表達(dá)產(chǎn)物約為18 kDa,重組蛋白純化后純度達(dá)95%以上�！窘Y(jié)論】本研究首次擴(kuò)增雙孢蘑菇凝集素基因,并獲得純度較高的雙孢蘑菇凝集素蛋白,可利用凝集試驗(yàn)檢測(cè)其生物學(xué)活性,為目的基因的深入研究提供參考依據(jù)。

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本文編號(hào)：3971320