體細(xì)胞胚發(fā)生途徑是實(shí)現(xiàn)葡萄遺傳轉(zhuǎn)化進(jìn)行性狀改良的基礎(chǔ)。然而,胚性細(xì)胞誘導(dǎo)效率低、保持與擴(kuò)繁能力差、畸形胚發(fā)生頻率高等問(wèn)題嚴(yán)重影響體細(xì)胞胚發(fā)生技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展。特別是,大量畸形胚的發(fā)生嚴(yán)重制約體細(xì)胞胚的正常成苗。因此,解析畸形胚的發(fā)生機(jī)理或?qū)闻哐h(huán)利用是葡萄體細(xì)胞胚再生體系中的核心問(wèn)題之一。本研究以白色釀酒葡萄品種‘霞多麗’葡萄為試材,通過(guò)調(diào)節(jié)植物激素濃度與配比優(yōu)化,建立高效穩(wěn)定的釀酒葡萄‘霞多麗’體胚再生體系,以再生途徑中產(chǎn)生的四種不同形態(tài)胚(正常胚、胚軸伸長(zhǎng)胚、玻璃化胚、子葉融合胚)為材料進(jìn)行畸形胚的循環(huán)利用研究,并從組織學(xué)鑒定、內(nèi)源激素水平以及miRNAs調(diào)控層面解析了畸形胚發(fā)生的內(nèi)在機(jī)理。主要結(jié)果如下:1.建立了‘霞多麗’體細(xì)胞胚再生體系。以未開(kāi)放的小花蕾為試材,采用NaClO二次消毒進(jìn)行花蕾接種時(shí)污染率與采樣保存時(shí)間呈明顯的正相關(guān)。在六種不同的胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,MC(NN69+0.55 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 NOA+1.24 mg·L-1 4-CPPU+30 g·L-1 Sucrose+3 g·L-1 Phytagel)、PIV(NN69+...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１本研究的技術(shù)路線(xiàn)??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｒｅｓｅａｒｃｈ??

寧夏大學(xué)碩士學(xué)位論文?第一章引言??１．５．３研究技術(shù)路線(xiàn)??以歐洲葡萄‘霞多麗，（ＫｙｉＨｔｙｅｒａｃｖ．Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ）為試材???±???ｉ???ｉ???花序采集、消毒、接種?｜體胚循環(huán)誘導(dǎo)愈傷組織?｜畸形胚形態(tài)學(xué)、解剖學(xué)觀察??Ｉ?Ｖ?＋??胚性愈傷＞織誘｜不同種‘....

圖２－５?４?ｐＭ?ＡＢＡ對(duì)原胚團(tuán)誘導(dǎo)的影響（標(biāo)尺＝０．５?ｃｍ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?４?（ｉＭ?ＡＢＡ?ｏｎ?ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ?ｍａｓｓｅｓ?（ＰＥＭ）?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?０．５?ｃｍ）??

寧夏大學(xué)碩士學(xué)位論文?第二章歐洲葡萄‘霞多麗’體細(xì)胞胚再生體系的建立??中胚性材料的高效誘導(dǎo)、保持與擴(kuò)繁進(jìn)而為遺傳轉(zhuǎn)化及體胚萌發(fā)再生提供大量的材料，以葡萄花??蕾誘導(dǎo)形成的胚性愈傷組織為材料，將其置于ＭＰＭ培養(yǎng)基進(jìn)行原胚團(tuán)的誘導(dǎo)與保持，分別于３０??ｄ、６０?ｄ、９０?ｄ、１２０....

圖３－４玻璃化胚的體胚再生??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｓｏｍａｔｉｃ?ｅｍｂｒｙｏｓ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｖｉｔｒｉｆｉｅｄ?ｅｍｂｒｙｏｉｄｓ??

寧夏大學(xué)碩士學(xué)位論文?第三章‘霞多麗’體細(xì)胞胚的循環(huán)誘導(dǎo)體系的建立??３４，?Ａ－Ｂ），不利于體胚再誘導(dǎo)，將其置于Ｘ６培養(yǎng)基繼續(xù)觀察其形態(tài)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干枯褐化的組??織上直接形成原胚團(tuán)或二次體胚，形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，呈白色（圖３４，?Ｃ－Ｄ）。??接種??誘導(dǎo)（５?ｍｏｎｔｈｓ）???５....

圖３－３?‘霞多麗’葡萄子葉胚誘導(dǎo)愈傷組織??Ｆｉｇｕｒｅ?３－３?Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ?ｅｍｂｒｙｏ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ｃａｌｌｕｓ?ｏｆ?Ｖｉｔｉｓ?ｖｉｎｉｆｅｒａ?ｃｖ．?＇Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ＇??

寧夏大學(xué)碩士學(xué)位論文?第三章‘霞多麗’體細(xì)胞胚的循環(huán)誘導(dǎo)體系的建立??３４，?Ａ－Ｂ），不利于體胚再誘導(dǎo)，將其置于Ｘ６培養(yǎng)基繼續(xù)觀察其形態(tài)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干枯褐化的組??織上直接形成原胚團(tuán)或二次體胚，形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，呈白色（圖３４，?Ｃ－Ｄ）。??接種??誘導(dǎo)（５?ｍｏｎｔｈｓ）???５....

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