蘋果(Malus×domestica Borkh.)屬于薔薇科(Rosaceae)蘋果屬(Malus Mill.),富含轉(zhuǎn)座子等促進(jìn)基因組進(jìn)化的轉(zhuǎn)座元件。前期研究表明“元帥”短枝變異品種“華帥1號”、“奧勒岡矮生”、“玫瑰紅”、“矮紅”、“居家店矮生”四號染色體上存在一特異的長度為2190 bp的solo-LTR(命名為Mdsolo-LTR1),進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)Mdsolo-LTR1插入在另一個solo-LTR(命名為Mdsolo-LTR2,長度為1536 bp)內(nèi);Mdsolo-LTR1在莖中特異表達(dá),具有雙向啟動功能;Mdsolo-LTR2正、反義鏈沒有明顯的啟動子活性。Blast比對結(jié)果發(fā)現(xiàn)梨基因組存在一長度約1000 bp與Mdsolo-LTR1的810 bp-1807 bp高度相似的序列,將其正、反義鏈分別命名為PEAR-1-正和PEAR-1-反。本研究在PlantCARE軟件分析Mdsolo-LTR1正、反義鏈基礎(chǔ)上,利用啟動子缺失突變的方法將Mdsolo-LTR1正、反義鏈分割成不同的片段,借助煙草瞬時表達(dá)和異源轉(zhuǎn)化方法分析Mdsolo-LTR1正、反義鏈不同缺失片段、Md...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1Mdsolo-LTR1及其缺失序列載體構(gòu)建示意圖

pBI121::GFP菌液受贈于安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科技樓256溫波老師實(shí)驗(yàn)室。Mdsolo-LTR1-EHA105菌液為韓夢雪師姐保存在-80℃冰箱。3.1.2試驗(yàn)方法3.1.2.1Mdsolo-LTR1調(diào)控元件分析將Mdsolo-LTR1的2190-bp提交....

圖3-2Mdsolo-LTR1正義鏈5’端及Mdsolo-LTR1反義鏈3’端缺失突變表達(dá)載體構(gòu)建示意圖

圖3-2Mdsolo-LTR1正義鏈5’端及Mdsolo-LTR1反義鏈3’端缺失突變表達(dá)載體構(gòu)建示意圖Fig.3-2Constructionofthedeletionmutantexpressionvectorforthe5'endof....

圖3-3Mdsolo-LTR1正義鏈5’端缺失突變（dF1-dF10）表達(dá)載體構(gòu)建示意圖

GFP加接頭-dF10CCGGGGATCCTCTAGATGATGTGGAAAATAAGTTAACACACAAAATTAAACatggtgagcaagggcdF1~dF10上游引物dF1GTCACATATTTGGAACCAAGGTdF2TCATCCTTGTCCCCTAAA....

圖3-4Mdsolo-LTR1和梨基因組比對示意圖

將擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物送南京擎科（TSINCKE）測序部測序，分析序列。3.2.2.4GUS基因表達(dá)活性定量檢測同3.1.2.7。3.3梨PEAR-1-正和PEAR-1-反表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)化3.3.1試驗(yàn)材料“碭山酥梨”葉片。擬南芥Columbia（“Col-0”....

本文編號：3956531