韌皮部卸載對(duì)光合產(chǎn)物的分配及糖的積累具有重要的調(diào)控作用。果實(shí)發(fā)育過程中糖卸載代謝積累機(jī)制的研究對(duì)果樹庫源關(guān)系的調(diào)控和品質(zhì)改良具有重要意義。為探明獼猴桃果實(shí)中碳水化合物的卸載機(jī)制,本論文從生理、生化、細(xì)胞及分子層面研究了美味獼猴桃‘秦美’果實(shí)中碳水化合物的卸載途徑及其可能的調(diào)控基因,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將蘋果果實(shí)中參與質(zhì)外體卸載的己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)行美味獼猴桃轉(zhuǎn)化試驗(yàn),主要結(jié)果如下:1、通過韌皮部卸載液鑒定、果實(shí)維管束胞間連絲觀察、熒光示蹤劑等技術(shù)對(duì)獼猴桃的糖卸載途徑分析發(fā)現(xiàn),在美味獼猴桃‘秦美’的葉柄和果柄韌皮部卸載液中主導(dǎo)的碳水化合物是蔗糖,不存在山梨醇、水蘇糖等其他可進(jìn)行長距離運(yùn)輸?shù)幕衔铩＿@說明蔗糖是獼猴桃中長距離運(yùn)輸?shù)奶妓衔�。通過果實(shí)維管束超薄切片技術(shù),經(jīng)電子顯微鏡結(jié)構(gòu)分析表明在獼猴桃果實(shí)發(fā)育過程中,果實(shí)的篩管伴胞細(xì)胞復(fù)合體與周圍的薄壁細(xì)胞間未發(fā)現(xiàn)胞間連絲的存在;果實(shí)薄壁細(xì)胞與果肉細(xì)胞之間存在豐富的胞間連絲。以通過共質(zhì)體自由擴(kuò)散的羧基熒光素作為熒光示蹤劑研究發(fā)現(xiàn),在果實(shí)發(fā)育過程中經(jīng)果柄運(yùn)輸?shù)臒晒庑盘?hào)均被限制在維管束中,而沒有擴(kuò)散到周圍的薄壁細(xì)胞中。這些結(jié)果表明,在美味獼猴桃中,蔗...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物體內(nèi)蔗糖合成代謝途徑
        1.1.1 蔗糖的合成途徑
        1.1.2 海藻糖的合成途徑
        1.1.3 蔗糖降解途徑
    1.2 果實(shí)韌皮部卸載途徑
    1.3 維C之王：獼猴桃
    1.4 本文的研究目的和意義
第二章 獼猴桃果實(shí)糖卸載模式的建立
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 韌皮部汁液的鑒定
        2.1.3 熒光染料示蹤試驗(yàn)
        2.1.4 獼猴桃果實(shí)維管束超薄切片的制作
    2.2 結(jié)果分析
        2.2.1 韌皮部汁液的鑒定
        2.2.2 果實(shí)SE/CC細(xì)胞與PCs間并無胞間連絲的聯(lián)系
        2.2.3 CF一直被限制在果實(shí)維管束中
    2.3 討論
        2.3.1 獼猴桃長距離運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)是蔗糖
        2.3.2 獼猴桃果實(shí)中韌皮部卸載模式是質(zhì)外體途徑
第三章 獼猴桃糖轉(zhuǎn)運(yùn)及糖代謝機(jī)理
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 可溶性糖的測定
        3.1.3 酶活分析
        3.1.4 候選基因的鑒定
        3.1.5 mRNA表達(dá)分析
    3.2 結(jié)果分析
        3.2.1 獼猴桃果實(shí)中糖積累模式
        3.2.2 源庫中蔗糖代謝酶的酶活
        3.2.3 源庫中糖轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝相關(guān)基因的表達(dá)
        3.2.4 果實(shí)不同部位糖轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝相關(guān)基因的表達(dá)
    3.3 討論
        3.3.1 獼猴桃果實(shí)中糖積累模式
        3.3.2 獼猴桃果實(shí)中糖卸載及代謝模式
第四章 MdHT2.2 的克隆及獼猴桃轉(zhuǎn)基因
    4.1 材料和方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌株和質(zhì)粒
        4.1.3 核酸的提取
        4.1.4 培養(yǎng)基配制
        4.1.5 引物合成及測序
        4.1.6 克隆用cDNA的合成
        4.1.7 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物回收
        4.1.8 PCR回收產(chǎn)物連接T19載體
        4.1.9 鏈接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌
        4.1.10 構(gòu)建植物表達(dá)載體
        4.1.11 轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        4.1.12 轉(zhuǎn)化獼猴桃
        4.1.13 轉(zhuǎn)化株系的鑒定
        4.1.14 葉片可溶性糖的測定
    4.2 結(jié)果分析
        4.2.1 表達(dá)載體的構(gòu)建
        4.2.2 轉(zhuǎn)基因獼猴桃的獲得
        4.2.3 轉(zhuǎn)基因獼猴桃RT-PCR鑒定
        4.2.4 轉(zhuǎn)基因獼猴桃葉片中可溶性糖含量的測定
        4.2.5 轉(zhuǎn)基因獼猴桃生根過程中對(duì)激素敏感性探究
    4.3 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介



本文編號(hào)：3940805