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白菜裂葉基因BrcLL1的克隆與功能初步分析

發(fā)布時間:2024-03-22 02:24
  白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)原產中國,是一種重要的葉菜類蔬菜。葉形多樣性在很大程度上是由葉緣形狀變化形成的,其中葉片裂刻性狀是一種很重要的經濟或者標記性狀,研究其基因調控機制對豐富葉形育種和改良商品性都具有一定的應用及理論意義。在課題組前期研究基礎上,本實驗對控制該性狀的基因進行了精細的區(qū)間定位,篩選出控制裂葉的候選基因,命名為BrcLL1(B.rapa.ssp.chinensis lobed-leaf 1),對其進行了克隆和時空表達分析,并通過轉基因對其進行了初步功能驗證。主要獲得了以下研究結果:1.候選基因BrcLL1分析盡管前期研究將BrcLL1基因定位在Bra9511和Bra9512標記之間,但在該區(qū)間內沒有預測到編碼基因。本研究利用F2大群體中的隱形個體,對近鄰2個標記3KBra9510和Bra9510-4H重新驗證,結果發(fā)現(xiàn)候選基因與這2個標記共分離,標記3KBra9510和Bra9510-4H分別來源于其中一個編碼基因Bra009510的啟動子和基因內部,進一步轉錄組測序結果表明,該基因在裂葉中的表達明顯下調,因此Bra009510可能為...

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1多態(tài)性標記的群體分析

圖2-1多態(tài)性標記的群體分析

p3.0軟件計算標記和裂葉基因之間的遺傳距離并作圖。析子標記的鑒定中,本實驗室將候選基因定位于標記Bra9511和Bra951測到編碼基因。在此基礎上,本研究擴大分離群體中的個377株隱形個體,檢測已開發(fā)的分子標記(3KBra9510和2-1),3KBra9510....


圖2-2分離群體中BrcLL1基因的遺傳圖譜和物理圖譜

圖2-2分離群體中BrcLL1基因的遺傳圖譜和物理圖譜

其縮小到標記Bra009511和Bra009512之間,物理距離5.7kb,但是該區(qū)間并沒有注基因(富春元2014)。本研究通過重新定位,標記3KBr9510和Bra9510-4H對群體的隱性純合單株基因型鑒定結果與表型結果完全吻合,說明已成功圖位克隆到候選....


圖3-1BrcLL1基因gDNA擴增結果

圖3-1BrcLL1基因gDNA擴增結果

組數(shù)據與大白菜基因組數(shù)據庫中同源基因Bra009510信息,葉和裂葉材料BrcLL1基因(圖3-1),結果顯示從3個裂葉1800bp和1600bp的擴增條帶,3個圓葉材料僅能擴增出的片段。該條帶回收后,與pGEM-TEasyVector載體連接....


圖-M:DNA5000markerladder;1-2、3-4、5-6、7-8、9-10、11-12分別為引物在14xs33H、14xs31H、1-20H、14xs39B、14xs32B、1-2B模板上BcLL1基因的gDNA擴增結果

圖-M:DNA5000markerladder;1-2、3-4、5-6、7-8、9-10、11-12分別為引物在14xs33H、14xs31H、1-20H、14xs39B、14xs32B、1-2B模板上BcLL1基因的gDNA擴增結果

組數(shù)據與大白菜基因組數(shù)據庫中同源基因Bra009510信息,葉和裂葉材料BrcLL1基因(圖3-1),結果顯示從3個裂葉1800bp和1600bp的擴增條帶,3個圓葉材料僅能擴增出的片段。該條帶回收后,與pGEM-TEasyVector載體連接....



本文編號:3934490

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