發(fā)布時(shí)間：2023-12-09 10:28

　　山葡萄的漿果可用于釀造葡萄酒,是葡萄酒工業(yè)的主要原料。影響葡萄酒質(zhì)量的關(guān)鍵因素是葡萄果皮的顏色,而葡萄果皮顏色又取決于花色苷的組成與含量,在花色苷生物合成過(guò)程中,F3H基因是黃烷酮與花青素代謝途徑的關(guān)鍵基因。本研究是以山葡萄‘雙豐’品種為材料,成功克隆了F3H基因的cDNA序列,并對(duì)其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析、采用熒光定量PCR技術(shù)分析了在山葡萄果實(shí)成熟過(guò)程中7個(gè)不同時(shí)期的F3H基因的表達(dá)量,同時(shí)克隆了該基因啟動(dòng)子,并預(yù)測(cè)了它的順式作用元件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：1. VamF3H基因全長(zhǎng)1398 bp, ORF為1092 bp,能編碼363個(gè)氨基酸。分子量為40.81 KDa,等電點(diǎn)(PI)值為5.37。不具有信號(hào)肽,不含有跨膜結(jié)構(gòu)域,屬于不穩(wěn)定親水蛋白。氨基酸序列同歐亞種葡萄(FQ389950)、圓葉葡萄(KF040970)和美國(guó)蔓藤(JX087441)等的F3H類基因的同源性較高。2.實(shí)時(shí)熒光定量結(jié)果表明,F3H基因在山葡萄果皮成熟過(guò)程中各時(shí)期的表達(dá)水平不同,F3H在轉(zhuǎn)色前期不表達(dá),后期F3H的表達(dá)量隨果實(shí)成熟度增加而逐漸增加,完熟期又明顯降低。3.F3H基因啟動(dòng)子序列中具有典型的CAAT ...

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 山葡萄花色苷概述
        1.1.1 山葡萄的簡(jiǎn)介
        1.1.2 花色苷的種類
        1.1.3 花色苷的結(jié)構(gòu)
        1.1.4 花色苷類色素的主要生理功能
        1.1.5 花色苷的生物合成途徑
    1.2 黃烷酮3-羥化酶
    1.3 植物啟動(dòng)子的研究進(jìn)展
        1.3.1 植物基因啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 植物啟動(dòng)子的類型
        1.3.3 植物基因啟動(dòng)子的克隆方法
    1.4 本研究的目的及意義
第二章 山葡萄F3H基因的克隆與表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 山葡萄F3H基因cDNA全長(zhǎng)的克隆及序列分析
        2.2.2 山葡萄F3H基因序列的生物信息學(xué)分析
        2.2.3 山葡萄VamF3H基因的實(shí)時(shí)熒光定量表達(dá)分析
    2.3 討論
        2.3.1 F3H基因克隆
        2.3.2 F3H基因表達(dá)
第三章 山葡萄總DNA的提取及VamF3H啟動(dòng)子的克隆
    3.1 山葡萄總DNA提取方法的比較
        3.1.1 材料與方法
        3.1.2 結(jié)果與分析
    3.2 山葡萄VamF3H基因啟動(dòng)子區(qū)域獲得及分析
        3.2.1 材料與方法
        3.2.2 結(jié)果與分析
        3.2.3 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝辭



本文編號(hào)：3871388