番茄灰霉病由灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)侵染引起,該病除侵染番茄,還為害多種植物,造成嚴(yán)重?fù)p失。目前生產(chǎn)上主要依賴化學(xué)防治,但化學(xué)藥劑的長期使用帶來殘留和抗藥性等問題。本文通過平板分離法從土壤中篩選到一株對番茄灰霉病菌有拮抗作用的生防菌株BH-8,并對BH-8的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,發(fā)酵濾液穩(wěn)定性進(jìn)行測定,室內(nèi)離體葉片和溫室盆栽試驗進(jìn)行研究,主要結(jié)果如下:1.16S rDNA序列比對分析,初步鑒定BH-8為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。2.對BH-8的發(fā)酵條件和發(fā)酵液體培養(yǎng)基組分進(jìn)行優(yōu)化,結(jié)果表明,BH-8最佳搖床發(fā)酵條件為:種子液接種量為3%、初始pH=7.0、搖瓶發(fā)酵裝液量為50-75 mL、搖床轉(zhuǎn)速180 r/min、發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時間5 d;最佳發(fā)酵液體培養(yǎng)基組分為:2%玉米粉、1.5%牛肉膏和0.15%KH2PO4。3.生防菌BH-8發(fā)酵濾液pH適應(yīng)范圍為3.0-10.0;此外,發(fā)酵濾液對紫外光和溫度較穩(wěn)定。4.離體葉片試驗結(jié)果表明,BH-8發(fā)酵濾液對番茄灰霉病的防效為81.01%;盆栽試驗結(jié)果表明,BH-8發(fā)酵原液對番茄灰...

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 番茄灰霉病的發(fā)生為害和病原物特征
        1.1.1 番茄灰霉病的發(fā)生情況概述
        1.1.2 番茄灰霉病為害特征、病菌的生物學(xué)特性與侵染循環(huán)
    1.2 番茄灰霉病防治現(xiàn)狀
        1.2.1 農(nóng)業(yè)防治
        1.2.2 化學(xué)防治
        1.2.3 生物防治
    1.3 枯草芽孢桿菌在植物病害防治中的應(yīng)用
        1.3.1 枯草芽孢桿菌對植物病害防治
        1.3.2 枯草芽孢桿菌對病原菌的防治機(jī)制
    1.4 研究目的和意義
第二章 材料和方法
    2.1 試驗試劑、材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗菌株
        2.1.2 主要培養(yǎng)基
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 實(shí)驗試劑
    2.2 實(shí)驗方法
        2.2.1 試驗流程圖
        2.2.2 生防菌的分離純化與篩選
        2.2.3 生防菌的鑒定
        2.2.4 生防菌BH-8 發(fā)酵條件優(yōu)化
        2.2.5 生防菌BH-8 培養(yǎng)基組分優(yōu)化
        2.2.6 生防菌對番茄灰霉病的防治效果測定
        2.2.7 發(fā)酵濾液穩(wěn)定性測定
        2.2.8 數(shù)據(jù)處理
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 生防菌的分離、純化與篩選
        3.1.1 生防菌的初篩和復(fù)篩
    3.2 生防菌鑒定
        3.2.1 生防菌 16S rDNA序列的PCR擴(kuò)增及測序
        3.2.2 拮抗菌 16S rDNA序列進(jìn)化樹建立
    3.3 生防菌BH-8 發(fā)酵條件優(yōu)化
        3.3.1 種子液不同接種量對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.3.2 搖床轉(zhuǎn)速對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.3.3 搖床溫度對BH-8 發(fā)酵濾液活性影響
        3.3.4 不同裝液量對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.3.5 發(fā)酵初始pH對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.3.6 發(fā)酵時間對BH-8 發(fā)酵濾液活性的影響
    3.4 生防菌BH-8 培養(yǎng)基組分優(yōu)化
        3.4.1 碳源物質(zhì)對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.4.2 氮源物質(zhì)對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性影響
        3.4.3 無機(jī)鹽對BH-8 發(fā)酵濾液抑菌活性的影響
        3.4.4 正交優(yōu)化結(jié)果
    3.5 生防菌發(fā)酵濾液對灰霉病的防治效果
        3.5.1 生防菌BH-8 發(fā)酵濾液對離體葉片番茄灰霉病的防治效果
        3.5.2 生防菌BH-8 發(fā)酵原液、發(fā)酵濾液和菌懸液對盆栽灰霉病的防治效果
    3.6 生防菌發(fā)酵濾液對酸堿、紫外光和溫度的穩(wěn)定性
        3.6.1 生防菌發(fā)酵濾液對紫外光的穩(wěn)定性測定
        3.6.2 生防菌發(fā)酵濾液對溫度的穩(wěn)定性測定
        3.6.3 生防菌發(fā)酵濾液對酸堿穩(wěn)定性
第四章 結(jié)論
第五章 討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡介



本文編號：3861953