葡萄風(fēng)信子花色合成途徑中關(guān)鍵基因及啟動(dòng)子克隆與分析
發(fā)布時(shí)間:2023-10-16 20:01
葡萄風(fēng)信子是風(fēng)信子科葡萄風(fēng)信子屬春季球根花卉,以明亮的藍(lán)色著稱(chēng),具有很重要的美觀、生態(tài)與科研價(jià)值,是研究單子葉植物著色機(jī)理的理想模式植物。本研究以藍(lán)色花的葡萄風(fēng)信子亞美尼亞(Muscari‘Armeniacum’)和白色花的葡萄風(fēng)信子白麗人(Muscari‘White beauty’)為研究材料,結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果及本團(tuán)隊(duì)已發(fā)表論文,成功克隆到葡萄風(fēng)信子兩個(gè)品種中查爾酮合成酶(CHS)、查爾酮異構(gòu)酶(CHI)、黃烷酮一經(jīng)化酶(F3H)、類(lèi)黃酮3’5’-羥化酶(F3’5’H)、二氫黃酮醇還原酶(DFR)、花青素合成酶(ANS/LDOX)、黃酮醇合酶(FLS)七種蛋白的基因序列及啟動(dòng)子序列,對(duì)各基因及啟動(dòng)子序列進(jìn)行藍(lán)白品種中的對(duì)比分析,確定差異顯著性基因。主要結(jié)果如下:1.以葡萄風(fēng)信子亞美尼亞和白麗人葉片為材料,對(duì)花青素通路調(diào)控基因CHS、CHI、F3H、F3’5’H、DFR、FLS、ANS的DNA和啟動(dòng)子序列進(jìn)行克隆,克隆到上述7個(gè)基因的保守域完整的DNA序列和啟動(dòng)子序列。2.對(duì)各個(gè)基因及蛋白序列在藍(lán)白兩品種中對(duì)比分析發(fā)現(xiàn),CHS基因差異性最大(相似性最小),CHS的DNA相似性為88....
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 葡萄風(fēng)信子概述
1.2 花青素的研究進(jìn)展
1.2.1 花青素結(jié)構(gòu)與種類(lèi)
1.2.2 花青素物理性質(zhì)
1.2.3 花青素生物合成途徑
1.3 花色合成途徑中的關(guān)鍵功能基因研究進(jìn)展
1.3.1 查耳酮合酶(CHS)
1.3.2 查爾酮異構(gòu)酶(CHI)
1.3.3 黃烷酮一羥化酶(F3H)
1.3.4 類(lèi)黃酮 3' 5'-羥化酶( F3'5'H)和類(lèi)黃酮 3'-羥化酶( F3'H)
1.3.5 二氫黃酮醇還原酶( DFR )
1.3.6 花青素合成酶( ANS/LDOX)
1.3.7 黃酮醇合酶(FLS)
1.4 啟動(dòng)子研究進(jìn)展
1.5 花色合成途徑中轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.6 研究基礎(chǔ)
1.7 本研究目的意義及技術(shù)路線
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株及質(zhì)粒
2.2 酶及化學(xué)試劑
2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.4 引物
2.5 方法
2.5.1 RNA的提取及檢測(cè)
2.5.2 DNA的提取及檢測(cè)
2.5.3 First-Strand cDNA合成
2.5.4 引物設(shè)計(jì)
2.5.5 cDNA、DNA及啟動(dòng)子序列擴(kuò)增程序及體系
2.5.6 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物回收與連接
2.5.7 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化
2.5.8 菌液PCR鑒定
2.5.9 質(zhì)粒提取
2.5.10 生物學(xué)在線分析
2.5.11 MaANS基因的表達(dá)模式分析
第三章 結(jié)果與分析
3.1 葡萄風(fēng)信子花色合成途徑中關(guān)鍵功能基因克隆及生物信息學(xué)分析
3.1.1 關(guān)鍵功能基因克隆
3.1.2 關(guān)鍵功能基因及蛋白生物信息學(xué)分析
3.2 葡萄風(fēng)信子花色合成途徑中關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子克隆及生物信息學(xué)分析
3.2.1 關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子克隆
3.2.2 關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子生物信息學(xué)分析
第四章 討論與結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3854557
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 葡萄風(fēng)信子概述
1.2 花青素的研究進(jìn)展
1.2.1 花青素結(jié)構(gòu)與種類(lèi)
1.2.2 花青素物理性質(zhì)
1.2.3 花青素生物合成途徑
1.3 花色合成途徑中的關(guān)鍵功能基因研究進(jìn)展
1.3.1 查耳酮合酶(CHS)
1.3.2 查爾酮異構(gòu)酶(CHI)
1.3.3 黃烷酮一羥化酶(F3H)
1.3.4 類(lèi)黃酮 3' 5'-羥化酶( F3'5'H)和類(lèi)黃酮 3'-羥化酶( F3'H)
1.3.5 二氫黃酮醇還原酶( DFR )
1.3.6 花青素合成酶( ANS/LDOX)
1.3.7 黃酮醇合酶(FLS)
1.4 啟動(dòng)子研究進(jìn)展
1.5 花色合成途徑中轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.6 研究基礎(chǔ)
1.7 本研究目的意義及技術(shù)路線
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株及質(zhì)粒
2.2 酶及化學(xué)試劑
2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.4 引物
2.5 方法
2.5.1 RNA的提取及檢測(cè)
2.5.2 DNA的提取及檢測(cè)
2.5.3 First-Strand cDNA合成
2.5.4 引物設(shè)計(jì)
2.5.5 cDNA、DNA及啟動(dòng)子序列擴(kuò)增程序及體系
2.5.6 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物回收與連接
2.5.7 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化
2.5.8 菌液PCR鑒定
2.5.9 質(zhì)粒提取
2.5.10 生物學(xué)在線分析
2.5.11 MaANS基因的表達(dá)模式分析
第三章 結(jié)果與分析
3.1 葡萄風(fēng)信子花色合成途徑中關(guān)鍵功能基因克隆及生物信息學(xué)分析
3.1.1 關(guān)鍵功能基因克隆
3.1.2 關(guān)鍵功能基因及蛋白生物信息學(xué)分析
3.2 葡萄風(fēng)信子花色合成途徑中關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子克隆及生物信息學(xué)分析
3.2.1 關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子克隆
3.2.2 關(guān)鍵功能基因啟動(dòng)子生物信息學(xué)分析
第四章 討論與結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3854557
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