南瓜屬植物是我國廣泛種植的重要作物之一,它具有良好的營養(yǎng)與觀賞價值,抗逆性強且可作為砧木應(yīng)用于瓜類植物的嫁接。目前南瓜屬作物的產(chǎn)量和質(zhì)量受病害等因素影響較為嚴重,通過基因工程的技術(shù)手段創(chuàng)造新品種是解決其病害等問題的有效方法,也是實現(xiàn)品種改良的重要途徑,但以往對于中國南瓜離體再生及遺傳轉(zhuǎn)化的研究相對較少。本研究以中國南瓜為試驗材料,其近下胚軸的1/2子葉為外植體,探究其離體培養(yǎng)過程中植物激素、硝酸銀濃度及配比對其不定芽誘導(dǎo)過程的影響,以建立中國南瓜植株高效再生體系;以此體系為基礎(chǔ),探究農(nóng)桿菌介導(dǎo)的中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化,并以擬南芥CYCD3;1為目的基因構(gòu)建GFP融合過表達載體,探究預(yù)培養(yǎng)時間、侵染時間、共培養(yǎng)時間對中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化過程中抗性芽產(chǎn)生的影響。試驗的主要研究結(jié)果如下:(1)不同植物激素濃度及配比對中國南瓜不定芽誘導(dǎo)過程有顯著影響。在中國南瓜的離體培養(yǎng)過程中,以其子葉為外植體,進行了35組不同激素濃度的不定芽誘導(dǎo)研究。試驗結(jié)果表明,中國南瓜再生受培養(yǎng)基中激素濃度的影響,適宜濃度6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)能有效促進不定芽形成;單獨使用脫落酸(ABA)誘發(fā)中國南瓜子葉發(fā)黃,但與6-BA...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 中國南瓜離體培養(yǎng)及主要影響因素
        1.1.1 植物離體再生途徑
        1.1.2 中國南瓜離體再生途徑
        1.1.3 影響中國南瓜再生的內(nèi)部因素
        1.1.4 影響中國南瓜再生的外部因素
    1.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化方法
        1.2.2 影響中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化的主要因素
        1.2.3 轉(zhuǎn)基因植物的標記基因
    1.3 研究內(nèi)容與方法
        1.3.1 主要研究內(nèi)容
        1.3.2 擬解決的關(guān)鍵問題
        1.3.3 技術(shù)路線
第二章 中國南瓜再生體系的優(yōu)化
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗設(shè)計
        2.1.3 統(tǒng)計指標
        2.1.4 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 6-BA對中國南瓜不定芽誘導(dǎo)的影響
        2.2.2 ABA對中國南瓜不定芽誘導(dǎo)的影響
        2.2.3 6-BA與 ABA組合對中國南瓜不定芽誘導(dǎo)的影響
        2.2.4 中國南瓜植株再生體系的優(yōu)化
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
第三章 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 目的基因CYCD3；1
        3.1.3 融合表達載體及農(nóng)桿菌菌株
        3.1.4 試驗設(shè)計
        3.1.5 統(tǒng)計指標
        3.1.6 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 酶切瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果分析
        3.2.2 目的基因CYCD3；1 的檢測結(jié)果分析
        3.2.3 預(yù)培養(yǎng)時間對中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        3.2.4 侵染時間對中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        3.2.5 共培養(yǎng)時間對中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        3.2.6 中國南瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系的初步建立
    3.3 討論
    3.4 結(jié)論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷



本文編號：3826191