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東北地區(qū)富含PUFAs茶藨子的篩選及相關(guān)基因的克隆和表達

發(fā)布時間:2023-05-10 18:18
  茶鑣子(RibesL.)屬于虎耳草科,又名醋栗,燈籠果。茶鑣子的果實產(chǎn)品口感極佳,含有豐富的糖類、維生素Vc等營養(yǎng)成份,可加工成果醬、果汁,釀酒,具有很高的經(jīng)濟和藥用價值。茶藨子的果實種子中的不飽和脂肪酸具有增強人體免疫力、降血脂、改善動脈硬化等作用。本研究以解析茶藨子中不飽和脂肪酸合成的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及研究脂肪酸成分之間的最佳比例為目標(biāo),主要側(cè)重于我國東北地區(qū)8個品種茶藨子中富含多不飽和脂肪酸品種的篩選,以及茶藨子中RmD6E、RmD8B、RmFAD3、RrAB13、RrNFYB以及RrNFYC2基因的功能關(guān)系、時空表達模式的分析,完善和發(fā)展茶藨子中不飽和脂肪酸合成網(wǎng)絡(luò)的分子機理打下堅實的基礎(chǔ)。獲得結(jié)果如下:1.東北地區(qū)8種茶藨子不飽和脂肪酸的測定運用索氏提取法和氣相色譜法對八個品種茶藨子中粗脂肪含量和脂肪酸含量進行測定。在這八個品種中紅醋栗的粗脂肪的百分比最高,為21.19%。而黑風(fēng)粗脂肪的百分比最低,只有13.94%。在8種茶藨子中紅醋栗的脂肪酸和不飽和脂肪酸含量高于其他品種,而黑醋栗的兩項含量均最低。2.茶藨子PUFAs相關(guān)基因的全長cDNA克隆運用RACE克隆技術(shù),對茶藨子PU...

【文章頁數(shù)】:95 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 多不飽和脂肪酸簡介
    1.2 PUFA的生物合成
        1.2.1 D6-去飽和酶基因的研究進展
        1.2.2 FAD基因的研究進展
    1.3 PUFA的調(diào)控基因
        1.3.1 ABI3基因的研究進展
        1.3.2 NF-YB/C基因家族
    1.4 茶藨子的簡介
    1.5 研究內(nèi)容與意義
2 東北地區(qū)富含PUFA茶藨子的篩選
    2.1 東北地區(qū)茶藨子粗脂肪提取
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗試劑與儀器
        2.1.3 試驗方法
        2.1.4 結(jié)果與分析
    2.2 東北地區(qū)茶藨子脂肪酸提取
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗試劑
        2.2.3 試驗方法
        2.2.4 結(jié)果與分析
    2.3 討論
    2.4 本章小結(jié)
3 PUEA相關(guān)基因的克隆
    3.1 PUFA相關(guān)基因3'RACE片段克隆
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗試劑
        3.1.3 試驗方法
        3.1.4 結(jié)果與分析
    3.2 PUFA相關(guān)基因5'RACE片段克隆
        3.2.1 試驗材料
        3.2.2 試驗試劑
        3.2.3 試驗方法
        3.2.4 結(jié)果與分析
    3.3 討論
    3.4 本章小結(jié)
4 PUFA相關(guān)基因特征及系統(tǒng)進化分析
    4.1 RmD6E、RmD8B基因的特征及系統(tǒng)進化分析
        4.1.1 RmD6E、RmD8B基因結(jié)構(gòu)分析及預(yù)測
        4.1.2 RmD6E、RmD8B基因序列同源性與系統(tǒng)進化分析
    4.2 RmFAD3基因的特征及系統(tǒng)進化分析
        4.2.1 RmFAD3基因結(jié)構(gòu)分析及預(yù)測
        4.2.2 RmFAD3基因序列同源性與系統(tǒng)進化分析
    4.3 RrABI3基因的特征及系統(tǒng)進化分析
        4.3.1 RrABI3基因結(jié)構(gòu)分析及預(yù)測
        4.3.2 RrABI3基因序列同源性與系統(tǒng)進化分析
    4.4 RrNF-YB基因的特征及系統(tǒng)進化分析
        4.4.1 RrNF-YB基因結(jié)構(gòu)分析及預(yù)測
        4.4.2 RrNFYB基因序列同源性與系統(tǒng)進化分析
    4.5 RrNF-YC2基因的特征及系統(tǒng)進化分析
        4.5.1 RrNF-YC2基因結(jié)構(gòu)分析及預(yù)測
        4.5.2 RrNFYC2基因序列同源性與系統(tǒng)進化分析
    4.6 討論
    4.7 本章小結(jié)
5 茶藨子PUFA相關(guān)基因的表達分析
    5.1 試驗材料
    5.2 試劑與儀器
    5.3 試驗方法
        5.3.1 各個樣品不同大小總RNA的提取
        5.3.2 Realtime PCR模板cDNA的合成
        5.3.3 Realtime PCR引物的設(shè)計
        5.3.4 PUFA相關(guān)基因的Realtime PCR檢測
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 RmD6E的Realtime PCR結(jié)果分析
        5.4.2 RmD8B基因的Realtime PCR結(jié)果分析
        5.4.3 RmFAD3基因的Realtime PCR結(jié)果分析
        5.4.4 RmABI3基因的Realtime PCR結(jié)果分析
        5.4.5 RmNFYB基因的Realtime PCR結(jié)果分析
        5.4.6 RmNFYC2基因的Realtime PCR結(jié)果分析
    5.5 討論
    5.6 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
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致謝



本文編號:3813266

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