蘋果綿蚜的抗藥性監(jiān)測及機(jī)理初探
發(fā)布時間:2023-04-02 09:42
蘋果綿蚜屬同翅目、癭綿蚜科,是蘋果屬果樹的重要害蟲,也是世界檢疫性對象。蘋果綿蚜目前在我國分布廣泛,對蘋果等果業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅;瘜W(xué)防治一直以來是控制蘋果綿蚜的重要手段,隨著殺蟲劑的大量使用,不可避免地會引起蘋果綿蚜抗性的產(chǎn)生。然而,目前有關(guān)蘋果綿蚜抗性監(jiān)測的研究鮮有報道。本文通過對三種生測方法進(jìn)行比較,選擇浸葉法為最適合蘋果綿蚜的室內(nèi)生測方法,并利用此法測定了不同種群對常用藥劑的抗性水平,同時測定比較了解毒代謝酶活力,克隆獲得了吡蟲啉的作用靶標(biāo)--煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR)兩個亞基cDNA的全長序列,并分析了不同抗性水平的蘋果綿蚜種群中這兩個基因氨基酸序列的差異,以期為蘋果綿蚜的抗性監(jiān)測與治理提供理論依據(jù)。研究結(jié)果對于指導(dǎo)各地蘋果綿蚜的有效治理,明確其抗性風(fēng)險及抗性機(jī)理具有重要的理論和實際意義。1.蘋果綿蚜生測方法比較及抗藥性監(jiān)測為了明確我國蘋果綿蚜的抗性現(xiàn)狀和分布,通過比較確定蘋果綿蚜合適的生測方法并對山東濟(jì)南、江蘇豐縣、新疆察布查爾蘋果綿蚜進(jìn)行抗性監(jiān)測。采用浸葉法、點滴法、藥膜法等生測方法測定山東濟(jì)南蘋果綿蚜對毒死蜱、吡蟲淋、高效氯氟氰菊酯三種藥劑的敏感性,并對三種生測方...
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蘋果綿蚜的研究概況
1.1 蘋果綿蚜的分布及危害
1.2 蘋果綿蚜的綜合防治
2 毒死蜱、高效氯氟氰菊酯及吡蟲啉抗性研究概況
2.1 毒死蜱研究概況
2.2 高效氯氟氰菊酯研究概況
2.3 吡蟲啉研究概況
3 昆蟲煙堿乙酰膽堿受體
3.1 煙堿型乙酰膽堿受體簡介
3.2 新煙堿類殺蟲劑的作用機(jī)理及靶標(biāo)抗性機(jī)理
4 本研究目的及意義
第二章 蘋果綿蚜生測方法比較及抗性監(jiān)測
1 材料與方法
1.1 供試蟲源
1.2 供試藥劑
1.3 生物測定方法
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
2 結(jié)果與分析
2.1 蘋果綿蚜三種毒力測定方法的比較
2.2 不同地區(qū)蘋果綿蚜對三種常規(guī)藥劑的抗性監(jiān)測
3 討論
第三章 不同蘋果綿蚜種群解毒代謝酶活力測定
1 材料與方法
1.1 供試蚜蟲
1.2 供試藥劑
1.3 酶液制備
1.4 酶活力測定
1.5 總蛋白含量測定
1.6 統(tǒng)計分析方法
2 結(jié)果與分析
2.1 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線測定
2.2 不同地區(qū)蘋果綿蚜全酯酶的活力
2.3 不同地區(qū)蘋果綿蚜谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶酶活力
2.4 抗性水平與酶活力的相關(guān)性分析
3. 討論
第四章 蘋果綿蚜煙堿型乙酰膽堿受體基因的克隆及點突變分析
1 材料與方法
1.1 供試蚜蟲
1.2 主要試劑和儀器
1.3 總RNA提取及cDNA合成
1.4 引物設(shè)計
1.5 PCR擴(kuò)增和RACE
1.6 PCR產(chǎn)物回收純化
1.7 質(zhì)粒載體的鏈接反應(yīng)與轉(zhuǎn)化
1.8 序列分析
1.9 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
1.10 蘋果綿蚜nAChR與其他同翅目昆蟲的同源性
1.11 蘋果綿蚜不同地區(qū)煙堿型乙酰膽堿受體兩個α型亞基的點突變分析
2 結(jié)果與分析
2.1 蘋果綿蚜煙堿型乙酰膽堿受體基因的克隆
2.2 蘋果綿蚜兩個nAChR亞基的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
2.3 蘋果綿蚜nAChR與其他同翅目昆蟲的同源性
2.4 不同地區(qū)蘋果綿蚜的Elα2和Elα5氨基酸多態(tài)性位點
3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
論文發(fā)表情況
致謝
本文編號:3779000
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 蘋果綿蚜的研究概況
1.1 蘋果綿蚜的分布及危害
1.2 蘋果綿蚜的綜合防治
2 毒死蜱、高效氯氟氰菊酯及吡蟲啉抗性研究概況
2.1 毒死蜱研究概況
2.2 高效氯氟氰菊酯研究概況
2.3 吡蟲啉研究概況
3 昆蟲煙堿乙酰膽堿受體
3.1 煙堿型乙酰膽堿受體簡介
3.2 新煙堿類殺蟲劑的作用機(jī)理及靶標(biāo)抗性機(jī)理
4 本研究目的及意義
第二章 蘋果綿蚜生測方法比較及抗性監(jiān)測
1 材料與方法
1.1 供試蟲源
1.2 供試藥劑
1.3 生物測定方法
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
2 結(jié)果與分析
2.1 蘋果綿蚜三種毒力測定方法的比較
2.2 不同地區(qū)蘋果綿蚜對三種常規(guī)藥劑的抗性監(jiān)測
3 討論
第三章 不同蘋果綿蚜種群解毒代謝酶活力測定
1 材料與方法
1.1 供試蚜蟲
1.2 供試藥劑
1.3 酶液制備
1.4 酶活力測定
1.5 總蛋白含量測定
1.6 統(tǒng)計分析方法
2 結(jié)果與分析
2.1 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線測定
2.2 不同地區(qū)蘋果綿蚜全酯酶的活力
2.3 不同地區(qū)蘋果綿蚜谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶酶活力
2.4 抗性水平與酶活力的相關(guān)性分析
3. 討論
第四章 蘋果綿蚜煙堿型乙酰膽堿受體基因的克隆及點突變分析
1 材料與方法
1.1 供試蚜蟲
1.2 主要試劑和儀器
1.3 總RNA提取及cDNA合成
1.4 引物設(shè)計
1.5 PCR擴(kuò)增和RACE
1.6 PCR產(chǎn)物回收純化
1.7 質(zhì)粒載體的鏈接反應(yīng)與轉(zhuǎn)化
1.8 序列分析
1.9 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
1.10 蘋果綿蚜nAChR與其他同翅目昆蟲的同源性
1.11 蘋果綿蚜不同地區(qū)煙堿型乙酰膽堿受體兩個α型亞基的點突變分析
2 結(jié)果與分析
2.1 蘋果綿蚜煙堿型乙酰膽堿受體基因的克隆
2.2 蘋果綿蚜兩個nAChR亞基的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
2.3 蘋果綿蚜nAChR與其他同翅目昆蟲的同源性
2.4 不同地區(qū)蘋果綿蚜的Elα2和Elα5氨基酸多態(tài)性位點
3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
論文發(fā)表情況
致謝
本文編號:3779000
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