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草莓五倍體及其染色體加倍后的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-03-05 10:00
  草莓是多倍體植物,不同倍性(2x、4x、6x、8x、10x)的種質(zhì)資源在自然界中廣泛存在。野生草莓作為栽培草莓抗病、抗逆、改良性狀的重要基因庫(kù),育種實(shí)踐中常常將栽培草莓與野生種草莓雜交來(lái)創(chuàng)造新種質(zhì)。本研究采用兩種不同的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法,即雙向電泳技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)以及同位素相對(duì)標(biāo)記和絕對(duì)定量(iTRAQ)技術(shù),以草莓種間雜交種及其加倍種為材料,研究草莓染色體加倍前后葉片差異表達(dá)蛋白質(zhì),以期獲得在加倍過(guò)程中對(duì)草莓重要性狀進(jìn)行調(diào)控的關(guān)鍵基因。本研究主要從兩個(gè)方面進(jìn)行并取得以下結(jié)果:1.以二倍體綠色草莓(Fragaria viridis Duch.)與八倍體栽培草莓’房香’(F×ananassa‘Fusanoka’)雜交所得的草莓五倍體(代號(hào):FxLs-11-37)及其染色體加倍而成的十倍體(代號(hào):A3,2n=10x=70)為試材,測(cè)定其農(nóng)藝性狀、SPAD值以及凈光合速率,利用雙向凝膠電泳技術(shù)對(duì)草莓染色體加倍過(guò)程中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行分析。結(jié)果表明:與FxLs-11-37相比,A3表現(xiàn)出明顯的株型矮化、植株冠莖變大,葉長(zhǎng)葉寬增大、葉片增厚以及葉色濃綠等農(nóng)藝性狀特征,并且A3葉片的SPAD值與凈...

【文章頁(yè)數(shù)】:86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 植物多倍化概述
        1.1 植物多倍化及其意義
        1.2 多倍化植物的分子研究
    2 草莓倍性育種的重要性
        2.1 草莓雜交育種
        2.2 草莓染色體加倍研究
    3 蛋白質(zhì)組學(xué)概述
        3.1 蛋白質(zhì)組學(xué)的概念及研究?jī)?nèi)容
        3.2 蛋白質(zhì)分離技術(shù)-雙向凝膠電泳和iTRAQ技術(shù)
        3.3 植物蛋白質(zhì)組的研究進(jìn)展
        3.4 蛋白質(zhì)組學(xué)在草莓中的研究應(yīng)用
    4 蛋白質(zhì)組學(xué)在植物倍性中的研究應(yīng)用
    5 研究的目的與意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 草莓五倍體及其染色體加倍后的雙向電泳差異蛋白質(zhì)分析
    1 材料與方法
        1.1 材料與染色體加倍
        1.2 試劑和設(shè)備
        1.3 農(nóng)藝性狀測(cè)定
        1.4 SPAD值和凈光合速率測(cè)定
        1.5 蛋白質(zhì)提取
        1.6 雙向凝膠電泳
        1.7 凝膠掃描及質(zhì)譜分析
        1.8 差異蛋白質(zhì)相關(guān)基因的qRT-PCR分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 染色體加倍后農(nóng)藝性狀、SPAD值和凈光合速率的變化
        2.2 FxLs-11-37與A3草莓嫩葉差異蛋白相關(guān)分析
        2.3 差異蛋白質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)分析
    3 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 草莓五倍體及其染色體加倍后的iTRAQ蛋白質(zhì)組學(xué)分析
    1 材料與方法
        1.1 材料與染色體加倍
        1.2 試劑和設(shè)備
        1.3 蛋白質(zhì)提取
        1.4 多肽的iTRAQ標(biāo)記
        1.5 強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱(SCX)分離
        1.6 基于Triple TOF 5600的液相串聯(lián)質(zhì)譜分析
        1.7 蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)生物信息分析
        1.8 差異蛋白質(zhì)相關(guān)基因的qRT-PCR分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 SDS-PAGE及樣品總蛋白質(zhì)量檢測(cè)
        2.2 肽段質(zhì)量誤差分布
        2.3 重復(fù)相關(guān)性分析
        2.4 蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果與分析
        2.5 差異蛋白篩選
        2.6 差異表達(dá)蛋白的GO分析
        2.7 差異蛋白質(zhì)的KEGG注釋
        2.8 差異蛋白質(zhì)的KOG注釋
        2.9 差異蛋白質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 與葉綠素代謝相關(guān)蛋白質(zhì)
        3.2 與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)
        3.3 與應(yīng)激和防御相關(guān)蛋白質(zhì)
        3.4 與代謝相關(guān)蛋白質(zhì)
        3.5 其它蛋白質(zhì)
        3.6 染色體加倍過(guò)程中差異表達(dá)蛋白質(zhì)與其差異表達(dá)基因的比較
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)
攻讀碩士期間發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào):3755986

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