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矮牽?购嚓P(guān)基因克隆與遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時間:2023-02-09 08:30
  矮牽牛(Petunia hybrida)被譽為“世界花壇花卉之王”,是一種觀賞性極強(qiáng)的園林植物,應(yīng)用范圍非常廣泛。但不耐霜凍,特別是幼苗期的植株,在全國大部分地區(qū)都無法露地越冬,即使順利越冬,其開花數(shù)量及質(zhì)量也會受到嚴(yán)重影響。因此,培育抗寒矮牽牛新品種,具有重要的應(yīng)用價值。課題組前期通過基因芯片技術(shù),初步篩選出矮牽?购晗礖的冷響應(yīng)候選基因。本課題挑選4個候選基因(依次命名為8-cn9604、10-C16、ZPT2-9和ZPT2-13)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下:1.基因8-cn9604、10-C16、ZPT2-9和ZPT2-13的克隆、序列分析與誘導(dǎo)表達(dá)分析:分析4個基因的CDS序列,設(shè)計引物進(jìn)行擴(kuò)增。利用軟件對目的基因的序列進(jìn)行分析,結(jié)果表明,8-cn9604和10-C16是ERF類轉(zhuǎn)錄因子;ZPT2-9和ZPT2-13是C2H2型鋅指蛋白。利用實時熒光定量qRT-PCR來檢測這4個基因在低溫、高鹽、高滲、ABA和JA脅迫處理下的誘導(dǎo)表達(dá)情況,結(jié)果顯示,在以上脅迫處理下,這4個基因的表達(dá)量表現(xiàn)出不同程度的上調(diào),初步推測這4個基因與矮牽牛應(yīng)答低溫等非生物脅迫相關(guān)。2.基因8...

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 低溫對植物生理指標(biāo)的影響
    1.2 參與植物低溫應(yīng)答的轉(zhuǎn)錄因子
        1.2.1 AP2/ERF轉(zhuǎn)錄因子
        1.2.2 ZFP轉(zhuǎn)錄因子
    1.3 矮牽牛耐低溫研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的意義
第二章 目的基因序列分析與逆境表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 目的基因的序列分析
        2.2.2 目的基因的逆境表達(dá)分析
    2.3 討論
        2.3.1 8-cn9604和10-C16都是ERF類轉(zhuǎn)錄因子
        2.3.2 ZPT2-9和ZPT2-13都是C2H2型鋅指蛋白基因
        2.3.3 目的基因參與非生物脅迫途徑的響應(yīng)
第三章 目的基因載體構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 超量表達(dá)載體構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化結(jié)果分析
        3.2.2 干涉載體構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化結(jié)果分析
    3.3 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號:3738568

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