為了探究日本結(jié)縷草（Zoysiajaponica）修剪后防御與組織再生過程的分子機制,分析植物激素茉莉酸（JA）、脫落酸（ABA）、生長素（IAA）以及細(xì)胞分裂素（CTK）對這一過程的影響。本研究對修剪后0h、2 h、6 h、24 h的日本結(jié)縷草品種’Zenith’進行創(chuàng)傷葉片過氧化氫水平和細(xì)胞膜透性的檢測,分析其創(chuàng)傷葉片傷口的恢復(fù)情況;對植株再生過程進行拍照和顯微觀察,分析其形態(tài)與莖尖分生組織顯微結(jié)構(gòu)變化;通過對轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行篩選,分析這一過程中差異表達(dá)基因的代謝途徑分布情況;利用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）和實時熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)來探究JA、ABA、IAA、CTK及其相關(guān)基因的響應(yīng)模式。通過研究,得到試驗結(jié)果如下:1.日本結(jié)縷草中可能存在ROS爆發(fā)所誘導(dǎo)的ABA的生物合成過程,導(dǎo)致修剪后2 h的ABA水平要高于修剪后6 h。并且合成的ABA可能參與日本結(jié)縷草修剪后葉片傷口愈合以及ROS的消除機制。2.修剪后日本結(jié)縷草中的JA可能參與植物整體的創(chuàng)傷防御響應(yīng),同時JA的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑可能會與乙烯的信號途徑協(xié)同作用,抵御由于創(chuàng)傷傷口所導(dǎo)致的病原菌的侵害。3.修剪后的日... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1. 引言
    1.1. 機械損傷對草坪草的影響
        1.1.1. 機械損傷的定義
        1.1.2. 機械損傷對草坪草生長發(fā)育的影響
    1.2. 植物對機械損傷的響應(yīng)
        1.2.1. 植物在機械損傷后的防御響應(yīng)
        1.2.2. 植物在機械損傷后的再生響應(yīng)
    1.3. 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的研究進展和應(yīng)用
        1.3.1. 轉(zhuǎn)錄組測序的發(fā)展
        1.3.2. 轉(zhuǎn)錄組測序在植物逆境脅迫上的應(yīng)用
    1.4. 研究目的內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.4.1. 選題背景
        1.4.2. 研究目的
        1.4.3. 研究內(nèi)容
        1.4.4. 技術(shù)路線
2. 試驗材料與方法
    2.1. 試驗材料
        2.1.1. 植物材料
        2.1.2. 生化試劑
        2.1.3. 儀器及設(shè)備
    2.2. 試驗方法
        2.2.1. 機械損傷脅迫的處理
        2.2.2. 莖尖分生組織的生物組織切片
        2.2.3. 過氧化氫與細(xì)胞膜透性的測定
        2.2.4. 植物激素的測定
        2.2.5. 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的分析
        2.2.6. 樣品總RNA提取以及cDNA的轉(zhuǎn)化
        2.2.7. 實時熒光定量驗證
3. 結(jié)果與分析
    3.1. 日本結(jié)縷草防御響應(yīng)的結(jié)果與分析
        3.1.1. 日本結(jié)縷草修剪后過氧化氫含量和細(xì)胞膜透性的測定
        3.1.2. 日本結(jié)縷草修剪后植物激素JA和ABA含量的測定
        3.1.3. 日本結(jié)縷草修剪后防御響應(yīng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
        3.1.4. 日本結(jié)縷草修剪后防御相關(guān)基因表達(dá)量的分析
        3.1.5. 日本結(jié)縷草修剪后防御響應(yīng)的小結(jié)
    3.2. 日本結(jié)縷草組織再生響應(yīng)的結(jié)果與分析
        3.2.1. 日本結(jié)縷草修剪后組織再生的表觀表現(xiàn)以及莖尖分生組織的生物組織切片
        3.2.2. 日本結(jié)縷草修剪后植物激素IAA和CTK含量的測定
        3.2.3. 日本結(jié)縷草修剪后組織再生響應(yīng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
        3.2.4. 日本結(jié)縷草修剪后組織再生相關(guān)基因的表達(dá)量
        3.2.5. 日本結(jié)縷草修剪后組織再生響應(yīng)的小結(jié)
4. 總結(jié)與展望
    4.1. 總結(jié)
    4.2. 展望
參考文獻
個人簡介
導(dǎo)師簡介
獲得成果目錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)錄組學(xué)在植物應(yīng)答逆境脅迫中的研究進展[J]. 張純,唐承晨,王吉永,郭龍妹,王莉莉,黎萬奎.  生物學(xué)雜志. 2017(02)
[2]大豆再生相關(guān)基因GmARF的生物信息學(xué)及表達(dá)分析[J]. 李思楠,蘇安玉,于以成,張超,馬彥龍,王玲爽,金楊媚,李文濱,武小霞.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2015(10)
[3]日本結(jié)縷草（Zoysia japonica）磷脂酶D基因部分保守序列的克隆及其對機械損傷的響應(yīng)[J]. 李亞超,王玉玲,朱晨,鐘天秀,謝琦,曾會明.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(24)
[4]轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進展及應(yīng)用[J]. 田英芳,張曉政,周錦龍.  中學(xué)生物教學(xué). 2013(12)
[5]轉(zhuǎn)錄組研究新技術(shù):RNA-Seq及其應(yīng)用[J]. 祁云霞,劉永斌,榮威恒.  遺傳. 2011(11)
[6]蘭引3號結(jié)縷草組織培養(yǎng)研究[J]. 宋俊芳,金芳,孫吉雄,郭奇梅,于永明.  草原與草坪. 2007(05)
[7]生物芯片研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景[J]. 吳明煜,郭曉紅,王萬賢,柯文山,楊毅,吳燕.  科學(xué)技術(shù)與工程. 2005(07)
[8]結(jié)縷草研究進展[J]. 王艷.  中國草地. 2003(02)
[9]采后果蔬受機械傷害的生理生化反應(yīng)[J]. 潘永貴,施瑞城.  植物生理學(xué)通訊. 2000(06)



本文編號：3729076