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野生型蘋果樹腐爛病菌03-8發(fā)酵液中活性物質(zhì)的分離純化

發(fā)布時間:2022-12-18 15:50
  蘋果樹腐爛。ˋpple canker)是由黑腐皮殼屬真菌(Valsa mali)引起的一種枝干腐爛病害,稱為蘋果樹―癌癥‖。目前針對該病害還沒有有效的防治措施,主要是因為對其致病活性物質(zhì)還不甚了解。為了揭示該病菌的致病活性物質(zhì),本研究對野生型蘋果樹腐爛病菌03-8進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)并分離其活性物質(zhì)。取得的研究結(jié)果如下:1.利用大孔樹脂XAD-2分離03-8發(fā)酵濾液,以不同比例(v/v)的甲醇水為洗脫劑,洗脫獲得五個餾分段,用煙葉進(jìn)行生物測定發(fā)現(xiàn),餾分段Ⅳ(75%的甲醇水洗脫液)導(dǎo)致煙葉的壞死活性最好。2.以餾分段Ⅳ為試樣,分別以莧菜、萵苣、蘿卜種子,煙草葉片和蘋果葉片為生測對象進(jìn)行生物活性測定,比較確定生物活性測定的敏感材料。結(jié)果表明,莧菜、萵苣、蘿卜種子的幼根和芽的伸長對餾分段Ⅳ不敏感,煙草葉片和蘋果葉片均表現(xiàn)出活性,但因煙草葉片比蘋果葉片容易得到,因此本實(shí)驗均采用煙草葉片為活性追蹤的生測材料。3.以煙葉為測試材料,采用注射接種法檢測多種溶劑對其致死活性。結(jié)果表明,20%的丙酮、10%的甲醇和乙醇不會引起煙草葉片壞死,因此本實(shí)驗采用20%的丙酮、10%的甲醇和乙醇作為活性測定的溶劑。4.... 

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 蘋果腐爛病研究概況
        1.1.1 蘋果樹腐爛病的癥狀
        1.1.2 蘋果樹腐爛病發(fā)生與危害
        1.1.3 病害循環(huán)
        1.1.4 病原學(xué)研究
        1.1.5 病菌的侵染方式及致病機(jī)理研究
        1.1.6 蘋果種質(zhì)資源對腐爛病的抗病性
        1.1.7 蘋果樹腐爛病的防治方法
    1.2 生物堿
    1.3 植物病原真菌次生代謝產(chǎn)物的研究
    1.4 蘋果腐爛病菌次生代謝物的相關(guān)研究
        1.4.1 酶類物質(zhì)
        1.4.2 根皮苷降解產(chǎn)物
        1.4.3 異香豆素類物質(zhì)
        1.4.4 有機(jī)酸類
    1.5 本研究的目的意義
第二章 活性測定方法及溶劑的篩選
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 活性餾分段的確定
        2.2.2 活性測定方法的比較
        2.2.3 活性測定溶劑的篩選結(jié)果
    2.3 小結(jié)
第三章 03-8 在MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)條件的優(yōu)化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 碳源優(yōu)化結(jié)果
        3.2.2 pH優(yōu)化結(jié)果
    3.3 討論
第四章 野生型蘋果樹腐爛病菌 03-8 活性物質(zhì)的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 活性物質(zhì)的分離純化
        4.2.2 純度檢驗
        4.2.3 結(jié)構(gòu)鑒定
        4.2.4 D-2 對煙草葉片和蘋果葉片的致死活性
        4.2.5 D-2 抑菌活性
    4.3 討論
第五章 野生型蘋果樹腐爛病菌 03-8 代謝產(chǎn)物中生物堿的探索
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 沉淀反應(yīng)
        5.2.2 顯色反應(yīng)
    5.3 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]黃瓜內(nèi)生放線菌Hhs.015發(fā)酵液抑菌活性成分的研究[J]. 蘭鑫,顏霞,甄偉,王惠,黃麗麗.  河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2015(06)
[3]我國蘋果產(chǎn)業(yè)的格局和發(fā)展建議[J]. 楊杰.  中國果菜. 2015(06)
[4]生物藥劑和化學(xué)藥劑對蘋果樹腐爛病菌的抑制效應(yīng)[J]. 楊阿麗,陳佰鴻,毛娟,張彪,任靜.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2015(16)
[5]2013/2014年全球蘋果貿(mào)易簡況[J]. 周莎莎.  中國果業(yè)信息. 2015(03)
[6]蘋果腐爛病的發(fā)生規(guī)律及其防治[J]. 高淋淋,孔祥娟.  落葉果樹. 2015(02)
[7]蘋果腐爛病的診斷與防治[J]. 趙曉英.  農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備. 2015(01)
[8]蘋果腐爛病發(fā)生原因及綜合防治對策[J]. 袁麗紅.  農(nóng)業(yè)科技與信息. 2015(01)
[9]近50年我國蘋果樹腐爛病發(fā)生情況分析[J]. 趙緒生,齊永志,王亞南,甄文超,曹克強(qiáng).  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(11)
[10]植物內(nèi)生真菌生物堿活性成分的研究進(jìn)展[J]. 丁建海,張俊芳,丁鳳嬌.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(30)

博士論文
[1]黑腐皮殼侵染蘋果的組織細(xì)胞學(xué)及轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D]. 柯希望.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]中國蘋果樹腐爛病菌的種群組成、分子檢測及其ISSR遺傳分析[D]. 臧睿.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[3]中國蘋果樹腐爛病菌的種類:rDNA-ITS序列和表型比較研究[D]. 王旭麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007

碩士論文
[1]植物內(nèi)生放線菌Hhs.015活性代謝產(chǎn)物研究[D]. 蘭鑫.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]蘋果樹腐爛病菌(Valsa mali)AGO1和Dicer-like蛋白基因功能的初步研究[D]. 董茹青.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[3]枯草芽孢桿菌E1R-j抗蘋果樹腐爛病菌活性蛋白的分離純化及初步鑒定[D]. 牛煥杰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[4]蘋果樹腐爛病菌4個多聚半乳糖醛酸酶基因功能的初步研究[D]. 宋娜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[5]蘋果樹腐爛病菌2個己糖激酶基因功能的初步研究[D]. 戴青青.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[6]蘋果樹腐爛病菌生長發(fā)育相關(guān)突變體篩選及側(cè)翼序列分析[D]. 程明明.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[7]蘋果樹腐爛病菌果膠裂解酶基因功能的初步研究[D]. 朱艷天.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[8]楊凌糖絲菌Hhs.015對蘋果樹腐爛病的生物防治研究[D]. 李正鵬.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[9]蘋果樹腐爛病菌致病物質(zhì)的初步研究[D]. 王建華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[10]蘋果樹腐爛病菌分生孢子的萌發(fā)、存活和侵染條件的研究[D]. 劉如香.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號:3722327

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