番茄因其富含各種微量元素、易種植、適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)量高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)被全世界大多數(shù)人所喜愛,成為我們?nèi)粘Ｉ钪胁豢扇鄙俚氖卟酥�。同時,中國是生產(chǎn)番茄的大國,其種植面積約占整個蔬菜栽培的40%,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)作物中具有重要地位。而低溫氣候是影響我國番茄生產(chǎn)重要因素之一,尤其在北方寒冷季節(jié)較長的地區(qū),怎樣克服氣候?qū)κ卟水a(chǎn)量的影響成為關(guān)系到農(nóng)民生產(chǎn)生活的重要問題。相同的溫室大棚栽培技術(shù)擁有耐低溫的番茄種質(zhì)資源更為重要,有些番茄在寒冷季節(jié)產(chǎn)量過低,即影響市場供應(yīng),又影響農(nóng)民收入。所以,根據(jù)市場需求,選育抗低溫的番茄品種十分迫切。番茄耐低溫性狀屬于數(shù)量性狀,受到多種基因體系控制,遺傳規(guī)律非常復(fù)雜。本研究為了探明外源ABA對番茄低溫脅迫的緩解作用,以高代自交系“東農(nóng)11537”番茄幼苗為試驗(yàn)材料,通過葉面噴施不同濃度的ABA后對番茄幼苗抗低溫的生理變化及差異基因表達(dá)的研究,試驗(yàn)結(jié)果如下:（1）通過對長勢相同的幾組番茄幼苗進(jìn)行葉片噴施不同濃度的ABA,低溫脅迫3天后調(diào)查3種抗寒相關(guān)生理指標(biāo),經(jīng)差異顯著性分析得到外源噴施ABA最適濃度為200ul/L.（2）在得到適宜濃度的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討了外源噴施A... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 試驗(yàn)研究目的與意義
    1.2 國內(nèi)外番茄抗冷研究動態(tài)
        1.2.1 低溫冷害
        1.2.2 低溫冷害對生物膜系統(tǒng)的影響
        1.2.3 低溫冷害對有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響
        1.2.4 提高植物抗冷性的措施
        1.2.5 ABA簡介
        1.2.6 ABA與植物抗冷性
        1.2.7 外源ABA對抗冷基因表達(dá)的影響
        1.2.8 抗寒基因的研究
        1.2.9 cDNA-AFLP的研究進(jìn)展
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 試驗(yàn)試劑
    2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和取材時期
    2.3 試驗(yàn)方法
        2.3.1 植物抗冷生理指標(biāo)測定
        2.3.2 生理測定數(shù)據(jù)處理
        2.3.3 樣品總RNA的提取與純化
        2.3.4 雙鏈cDNA的制備
        2.3.5 AFLP接頭和引物的合成
        2.3.6 cDNA的酶切與接頭連接
        2.3.7 預(yù)擴(kuò)增反應(yīng)
        2.3.8 選擇性擴(kuò)增反應(yīng)
        2.3.9 聚丙烯酰胺凝膠電泳與銀染
        2.3.10 差異片段的回收與二次擴(kuò)增
        2.3.11 差異片段測序及生物信息學(xué)分析
        2.3.12 差異表達(dá)基因的Real-time PCR驗(yàn)證
3 結(jié)果分析
    3.1 不同濃度外源ABA對番茄幼苗抗冷生理的影響
    3.2 外源ABA對番茄幼苗抗冷性的影響
        3.2.1 ABA對番茄幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響
        3.2.2 ABA對番茄幼苗抗氧化酶活性的影響
        3.2.3 ABA對低溫脅迫下MDA和葉綠素含量的影響
    3.3 總RNA的提取結(jié)果
    3.4 雙鏈CDNA合成結(jié)果
    3.5 CDNA酶切和預(yù)擴(kuò)增
    3.6 差異表達(dá)基因篩選
        3.6.1 差異片段的二次擴(kuò)增
        3.6.2 差異表達(dá)基因的同源性和功能分析
    3.7 差異表達(dá)基因REAL-TIMEPCR反應(yīng)
4 討論
    4.1 ABA對番茄幼苗抗冷性的誘導(dǎo)
    4.2 ABA對番茄幼苗抗冷性的生理影響
    4.3 ABA誘導(dǎo)番茄抗冷差異基因分析
    4.4 實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)分析
    4.5 CDNA-AFLP技術(shù)討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]番茄Sly-MIR167的抗冷性研究[J]. 郭鵬,張萬筠,馬紅玉,姜健.  西北植物學(xué)報(bào). 2014(07)
[3]過表達(dá)Mdip1基因提高番茄抗低溫誘導(dǎo)的氧化脅迫能力[J]. 晉文娟,張少杰,陳雙臣,林曉民,賀超興.  植物生理學(xué)報(bào). 2013(05)
[4]提高植物抗寒性的機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 徐呈祥.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(24)
[5]脫落酸預(yù)處理對低溫脅迫下蘿卜幼苗的緩解效應(yīng)[J]. 初敏,王秀峰,王淑芬,楊鳳娟,魏珉,史慶華.  河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[6]棗樹設(shè)施栽培研究現(xiàn)狀及建議[J]. 馮斌.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2011(21)
[7]水楊酸和脫落酸對低溫脅迫下茉莉幼苗生理特性的影響[J]. 何麗斯,夏冰,孟祥靜,譚國華,賀佳,彭峰,汪仁.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(05)
[8]苗期夜間低溫處理對西紅柿葉片蔗糖代謝的影響[J]. 王麗娟,李天來,范文靜.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(14)
[9]漸降低溫脅迫對黃瓜幼苗耐冷性及保護(hù)酶活性的影響[J]. 于錫宏,鄭姍姍,蔣欣梅,于廣建,孫彩虹,李丹.  中國蔬菜. 2011(12)
[10]外源物質(zhì)對番茄幼苗抗冷效果的影響[J]. 阮淑潔,朱世東,單國雷,潘璠,李進(jìn)城.  安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)(上半月刊). 2011(11)

博士論文
[1]辣椒對低溫脅迫的響應(yīng)與其低溫抗性相關(guān)基因的克隆和功能分析[D]. 郭衛(wèi)麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]低溫下ABA調(diào)控冬小麥糖代謝及抗寒基因表達(dá)的研究[D]. 劉麗杰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]擬南芥AtSUC2和AtSUC4對理化逆境及外源ABA的響應(yīng)[D]. 弓雪.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]外源物質(zhì)對辣椒幼苗抗冷性的影響[D]. 張帆.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]利用cDNA-AFLP技術(shù)分析棉花耐旱相關(guān)基因的表達(dá)[D]. 鄧曉艷.石河子大學(xué) 2010
[3]cDNA-AFLP分析辣椒抗寒性及CaAQP基因克隆與表達(dá)研究[D]. 朱文超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[4]外源脫落酸對扁穗牛鞭草抗寒性的影響及新品系區(qū)域適應(yīng)性研究[D]. 李芳.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]柑橘不同品種抗寒力比較研究[D]. 宿文斌.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]外源物質(zhì)對低溫脅迫番茄幼苗生理指標(biāo)及膜傷害的研究[D]. 刁艷.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[7]不同處理誘導(dǎo)黃瓜、番茄幼苗抗冷性的研究[D]. 王明明.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]香蕉幼苗的低溫生理及抗冷性研究[D]. 孫淑貞.華南師范大學(xué) 2003
[9]低溫對黃瓜保護(hù)酶體系及相關(guān)生理指標(biāo)的影響[D]. 李淑艷.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002



本文編號：3712109