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辣椒耐熱性鑒定及耐熱轉(zhuǎn)錄因子CaMBF1c表達(dá)分析

發(fā)布時間:2022-10-20 13:00
  高溫脅迫是辣椒(Capsicum annum L.)夏季栽培的主要限制因子,本實驗旨在篩選耐熱品種,以A(685)、B(691)、C(681m)、D(699)、E(59)、F(612)、G(614)、H(615)、I(671)、J(682)10個辣椒品系為實驗材料,進(jìn)行田間鑒定和室內(nèi)鑒定。室內(nèi)鑒定從熱害指數(shù)、電解質(zhì)滲透率(REC)、葉綠素、丙二醛(MDA)、脯氨酸(PRO)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD),等8個指標(biāo)綜合評價10個辣椒品系的耐熱性。本實驗得出如下結(jié)論:1.在田間自然高溫下,評價A、B、C、D、E、F、G、H、I、J10個辣椒品系遭受高溫脅迫后的外觀形態(tài)表現(xiàn)出的多種生理癥狀,鑒定出10個品系耐熱能力從強(qiáng)到弱依次為B>D>F>A>C>I>E>G>J>H。2.通過對A、B、C、D、E、F、G、H、I、J10個辣椒品系的耐熱性進(jìn)行綜合評價,鑒定出10個品系耐熱能力從強(qiáng)到弱依次C>B>A>D>J>H>G>E>I>F。3.REC、MDA可以作為辣椒耐熱性鑒定快速而簡單的方法。4.綜合田間鑒定和室內(nèi)鑒定的結(jié)果,最耐熱的為B,A、C、D耐熱性較好。... 

【文章頁數(shù)】:47 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究意義
    1.2 高溫脅迫
    1.3 耐熱鑒定方法
        1.3.1 田間自然鑒定法
        1.3.2 生理生化指標(biāo)鑒定法
            1.3.2.1 膜熱穩(wěn)定性
            1.3.2.2 熱害指數(shù)
            1.3.2.3 葉綠素
            1.3.2.4 丙二醛和脯氨酸
            1.3.2.5 抗氧化酶(POD、CAT、SOD)
            1.3.2.6 隸屬函數(shù)綜合評價法
    1.4 多蛋白橋梁因子
        1.4.1 MBF1的結(jié)構(gòu)與功能
        1.4.2 MBF1C
    1.5 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 辣椒耐熱性鑒定材料與方法
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 室外鑒定耐熱性
        2.1.3 室內(nèi)鑒定耐熱性
            2.1.3.1 電解質(zhì)滲透率
            2.1.3.2 酶活性
            2.1.3.3 脯氨酸(PRO)含量
            2.1.3.4 丙二醛(MDA)含量
            2.1.3.5 熱害指數(shù)和葉綠素含量
        2.1.4 綜合評價法
    2.2 CAMBF1C調(diào)控耐熱性的分子生物學(xué)基礎(chǔ)
        2.2.1 實驗材料
            2.2.1.1 植物材料
            2.2.1.2 主要儀器設(shè)備
            2.2.1.3 菌株
            2.2.1.4 載體
            2.2.1.5 細(xì)菌培養(yǎng)基配制
        2.2.2 實驗方法
            2.2.2.1 辣椒DNA的提。–TAB法)
            2.2.2.2 CAMBF1C目的基因擴(kuò)增
            2.2.2.3 大腸桿菌的制備及連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
            2.2.2.4 VIGS的載體構(gòu)建
            2.2.2.5 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備及轉(zhuǎn)化
            2.2.2.6 農(nóng)桿菌侵染辣椒幼苗
            2.2.2.7 熒光定量
3 結(jié)果與分析
    3.1 室外鑒定
    3.2 室內(nèi)鑒定
        3.2.1 電解質(zhì)滲透率
        3.2.2 酶活性
            3.2.2.1 SOD酶活性
            3.2.2.2 POD酶活性
            3.2.2.3 CAT酶活性
        3.2.3 脯氨酸含量
        3.2.4 丙二醛含量
        3.2.5 熱害指數(shù)和葉綠素含量
            3.2.5.1 熱害指數(shù)
            3.2.5.2 葉綠素含量
        3.2.6 隸屬函數(shù)綜合評價法
    3.3 CAMBF1C調(diào)控辣椒耐熱性
        3.3.1 辣椒DNA提取
        3.3.2 PTRV2-CAMBF1C基因沉默載體的構(gòu)建
        3.3.3 PTRV2-CAMBF1C轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101
        3.3.4 CAMBF1C沉默植株耐熱性鑒定
        3.3.5 CAMBF1C熒光表達(dá)量
            3.3.5.1 高溫對CAMBF1C基因表達(dá)量的影響
            3.3.5.2 不同時長高溫對CAMBF1C表達(dá)量的影響
4 討論
    4.1 辣椒耐熱性與田間鑒定
    4.2 辣椒耐熱性與室內(nèi)鑒定
    4.3 辣椒耐熱性與CAMBF1C
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]砂梨對高溫脅迫的響應(yīng)及耐熱機(jī)理研究[D]. 劉冬峰.浙江大學(xué) 2014
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碩士論文
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[9]豇豆耐熱性研究[D]. 李衍素.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
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本文編號:3694558

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