蘋(píng)果矮化砧木T337中BR相關(guān)基因CBB1、miR492及其靶基因BAK1的克隆與表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2022-04-28 23:16
T337是目前應(yīng)用最廣泛的矮化蘋(píng)果砧木之一,但是其自身株高的調(diào)控機(jī)制尚未被完全揭示。前人研究證明傳統(tǒng)的五大類(lèi)植物激素與蘋(píng)果砧木的高矮存在密切的聯(lián)系。模式植物擬南芥和水稻的研究表明,第六大植物激素油菜素內(nèi)酯(BR)及其相關(guān)基因與植株高度有著密切聯(lián)系。然而,在木本植物尤其是蘋(píng)果矮化砧木上,關(guān)于BR株高調(diào)控機(jī)理的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在揭示BR及其相關(guān)基因?qū)337株高調(diào)控的功能,闡釋BR參與T337株高調(diào)控的分子機(jī)制。本試驗(yàn)以T337盆栽苗為試材,選取了BR合成的關(guān)鍵基因CBB1作為研究對(duì)象,同時(shí)根據(jù)降解組和mi RNA組測(cè)序結(jié)果,篩選了BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蘋(píng)果新mi R492及其靶基因BAK1作為研究對(duì)象,研究了MdCBB1、miR492及MdBAK1在T337株高調(diào)控中的作用機(jī)制。獲得以下結(jié)果:1.以T337的cDNA為模板,克隆了MdCBB1.1、MdCBB1.2和MdBAK1.1、MdBAK1.2基因,獲得的cDNA長(zhǎng)度分別為1781bp、1878bp和2090 bp、2058 bp,ORF(開(kāi)放閱讀框)分別為1707bp、1707bp和1851bp、1848bp,分別編碼568、...
【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.1.1 蘋(píng)果主要矮化砧木
1.1.2 蘋(píng)果矮化砧木生長(zhǎng)特性與致矮機(jī)理的研究進(jìn)展
1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因關(guān)于株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1.4 miRNAs參與株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.2 本研究的目的意義
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆與表達(dá)分析
2.1 材料與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 處理與取樣
2.2.2 總RNA的提取與檢測(cè)
2.2.3 MdCBB1基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.2.4 MdCBB1基因的表達(dá)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 外源BR對(duì)T337株高的影響
2.3.2 基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表達(dá)分析
2.4 討論
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆與表達(dá)分析
3.1 材料與試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 植物材料小分子RNA與DNA的提取
3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆與生物信息學(xué)分析
3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.2.4 miR492的表達(dá)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 基因克隆與序列分析
3.3.2 成熟miR492與mi R492基因及啟動(dòng)子的克隆與生物信息學(xué)分析
3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表達(dá)分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油菜素內(nèi)酯處理對(duì)谷子農(nóng)藝性狀和生理特性的影響[J]. 鐘妍婷,原向陽(yáng),劉哲,徐家燕,溫芳英,張美濤,黃蕾,溫銀元,董淑琦,張麗光,郭平毅. 作物雜志. 2015(02)
[2]植物中miRNA及其靶基因mRNA剪切位點(diǎn)的常用檢測(cè)方法[J]. 金安娜,李建雄,田志宏. 長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版). 2014(11)
[3]矮化中間砧對(duì)華紅蘋(píng)果致矮機(jī)理初探[J]. 李海燕,趙德英,袁繼存,程存剛,徐鍇,張彥昌. 中國(guó)果樹(shù). 2013(03)
[4]果樹(shù)矮化機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 劉彥紅,張志華. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(S1)
[5]高等植物油菜素內(nèi)酯的生物合成及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 劉華英,蕭浪濤,藺萬(wàn)煌. 生命科學(xué)研究. 2002(S2)
[6]油菜素內(nèi)酯(BR)促進(jìn)植物生長(zhǎng)機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 侯雷平,李梅蘭. 植物學(xué)通報(bào). 2001(05)
[7]蘋(píng)果屬(Malus)顯性矮化主基因Dw的RAPD分子標(biāo)記[J]. 張開(kāi)春,畢曉穎,李榮旗,景士西,吳祿平,尹淑萍. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 1999(02)
[8]國(guó)內(nèi)外蘋(píng)果矮化砧木選育與使用概況[J]. 林淑芳. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 1997(01)
[9]蘋(píng)果葉片中吲哚乙酸氧化酶與過(guò)氧化物酶活性的相關(guān)性[J]. 劉魁英,趙宗蕓,王同坤. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 1993(S1)
[10]矮砧蘋(píng)果的發(fā)展前景[J]. 楊進(jìn). 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 1983(06)
博士論文
[1]蘋(píng)果砧木M9作自根砧或中間砧的致矮機(jī)理研究[D]. 張鶴.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]蘋(píng)果矮化基因Md連鎖標(biāo)記的篩選及染色體定位[D]. 石麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號(hào):3649729
【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.1.1 蘋(píng)果主要矮化砧木
1.1.2 蘋(píng)果矮化砧木生長(zhǎng)特性與致矮機(jī)理的研究進(jìn)展
1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因關(guān)于株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1.4 miRNAs參與株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.2 本研究的目的意義
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆與表達(dá)分析
2.1 材料與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 處理與取樣
2.2.2 總RNA的提取與檢測(cè)
2.2.3 MdCBB1基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.2.4 MdCBB1基因的表達(dá)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 外源BR對(duì)T337株高的影響
2.3.2 基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表達(dá)分析
2.4 討論
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆與表達(dá)分析
3.1 材料與試劑
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 植物材料小分子RNA與DNA的提取
3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆與生物信息學(xué)分析
3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.2.4 miR492的表達(dá)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 基因克隆與序列分析
3.3.2 成熟miR492與mi R492基因及啟動(dòng)子的克隆與生物信息學(xué)分析
3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表達(dá)分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油菜素內(nèi)酯處理對(duì)谷子農(nóng)藝性狀和生理特性的影響[J]. 鐘妍婷,原向陽(yáng),劉哲,徐家燕,溫芳英,張美濤,黃蕾,溫銀元,董淑琦,張麗光,郭平毅. 作物雜志. 2015(02)
[2]植物中miRNA及其靶基因mRNA剪切位點(diǎn)的常用檢測(cè)方法[J]. 金安娜,李建雄,田志宏. 長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版). 2014(11)
[3]矮化中間砧對(duì)華紅蘋(píng)果致矮機(jī)理初探[J]. 李海燕,趙德英,袁繼存,程存剛,徐鍇,張彥昌. 中國(guó)果樹(shù). 2013(03)
[4]果樹(shù)矮化機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 劉彥紅,張志華. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(S1)
[5]高等植物油菜素內(nèi)酯的生物合成及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 劉華英,蕭浪濤,藺萬(wàn)煌. 生命科學(xué)研究. 2002(S2)
[6]油菜素內(nèi)酯(BR)促進(jìn)植物生長(zhǎng)機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 侯雷平,李梅蘭. 植物學(xué)通報(bào). 2001(05)
[7]蘋(píng)果屬(Malus)顯性矮化主基因Dw的RAPD分子標(biāo)記[J]. 張開(kāi)春,畢曉穎,李榮旗,景士西,吳祿平,尹淑萍. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 1999(02)
[8]國(guó)內(nèi)外蘋(píng)果矮化砧木選育與使用概況[J]. 林淑芳. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 1997(01)
[9]蘋(píng)果葉片中吲哚乙酸氧化酶與過(guò)氧化物酶活性的相關(guān)性[J]. 劉魁英,趙宗蕓,王同坤. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 1993(S1)
[10]矮砧蘋(píng)果的發(fā)展前景[J]. 楊進(jìn). 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 1983(06)
博士論文
[1]蘋(píng)果砧木M9作自根砧或中間砧的致矮機(jī)理研究[D]. 張鶴.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]蘋(píng)果矮化基因Md連鎖標(biāo)記的篩選及染色體定位[D]. 石麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號(hào):3649729
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