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蘋(píng)果矮化砧木T337中BR相關(guān)基因CBB1、miR492及其靶基因BAK1的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-04-28 23:16
  T337是目前應(yīng)用最廣泛的矮化蘋(píng)果砧木之一,但是其自身株高的調(diào)控機(jī)制尚未被完全揭示。前人研究證明傳統(tǒng)的五大類(lèi)植物激素與蘋(píng)果砧木的高矮存在密切的聯(lián)系。模式植物擬南芥和水稻的研究表明,第六大植物激素油菜素內(nèi)酯(BR)及其相關(guān)基因與植株高度有著密切聯(lián)系。然而,在木本植物尤其是蘋(píng)果矮化砧木上,關(guān)于BR株高調(diào)控機(jī)理的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在揭示BR及其相關(guān)基因?qū)337株高調(diào)控的功能,闡釋BR參與T337株高調(diào)控的分子機(jī)制。本試驗(yàn)以T337盆栽苗為試材,選取了BR合成的關(guān)鍵基因CBB1作為研究對(duì)象,同時(shí)根據(jù)降解組和mi RNA組測(cè)序結(jié)果,篩選了BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蘋(píng)果新mi R492及其靶基因BAK1作為研究對(duì)象,研究了MdCBB1、miR492及MdBAK1在T337株高調(diào)控中的作用機(jī)制。獲得以下結(jié)果:1.以T337的cDNA為模板,克隆了MdCBB1.1、MdCBB1.2和MdBAK1.1、MdBAK1.2基因,獲得的cDNA長(zhǎng)度分別為1781bp、1878bp和2090 bp、2058 bp,ORF(開(kāi)放閱讀框)分別為1707bp、1707bp和1851bp、1848bp,分別編碼568、... 

【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究背景
        1.1.1 蘋(píng)果主要矮化砧木
        1.1.2 蘋(píng)果矮化砧木生長(zhǎng)特性與致矮機(jī)理的研究進(jìn)展
        1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因關(guān)于株高調(diào)控的研究進(jìn)展
        1.1.4 miRNAs參與株高調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.2 本研究的目的意義
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆與表達(dá)分析
    2.1 材料與試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 處理與取樣
        2.2.2 總RNA的提取與檢測(cè)
        2.2.3 MdCBB1基因克隆與生物信息學(xué)分析
        2.2.4 MdCBB1基因的表達(dá)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 外源BR對(duì)T337株高的影響
        2.3.2 基因克隆與生物信息學(xué)分析
        2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表達(dá)分析
    2.4 討論
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆與表達(dá)分析
    3.1 材料與試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 植物材料小分子RNA與DNA的提取
        3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆與生物信息學(xué)分析
        3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
        3.2.4 miR492的表達(dá)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 基因克隆與序列分析
        3.3.2 成熟miR492與mi R492基因及啟動(dòng)子的克隆與生物信息學(xué)分析
        3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
        3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表達(dá)分析
    3.4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
[1]蘋(píng)果砧木M9作自根砧或中間砧的致矮機(jī)理研究[D]. 張鶴.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]蘋(píng)果矮化基因Md連鎖標(biāo)記的篩選及染色體定位[D]. 石麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào):3649729

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