MicroRNA （miRNA）是一類長約22個(gè)核苷酸的內(nèi)源性單鏈RNA分子,其本身并不具有開放閱讀框（Open Reading Frame, ORF）。研究發(fā)現(xiàn)miRNA廣泛存在于動(dòng)物、植物以及微生物等生物體基因組中,在進(jìn)化上具有保守性。miRNA具有調(diào)控生物體新陳代謝、生長發(fā)育、疾病發(fā)生、細(xì)胞程序性死亡等多方面的功能,是生物體內(nèi)一類重要的小分子RNA。 miR165/166作為一類保守的植物miRNA,在擬南芥中主要通過與其靶基因HD-ZIPIII轉(zhuǎn)錄因子共同作用,調(diào)控分生組織的維持和發(fā)育、莖和葉片極性建成、果實(shí)形成等過程。已有研究報(bào)道HD-ZIPI基因家族參與植物逆境脅迫的響應(yīng)過程,但有關(guān)HD-ZIPIII基因家族在植物逆境脅迫過程中的作用卻少有報(bào)道。因此,本文以番茄為材料,探究miR165/166在番茄形態(tài)建成中的功能;以擬南芥作為材料,探究miR165/166對(duì)逆境脅迫的響應(yīng)。主要研究結(jié)果如下：1、番茄miR165/166組織特異性表達(dá)分析表明,miR165/166在花芽中表達(dá)量最多,然后依次是紅果、綠果、轉(zhuǎn)紅果、根、葉和莖,在花器官中表達(dá)量最少。2、通過葉盤轉(zhuǎn)化法獲得穩(wěn)定遺... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
第一章 前言
    1. MicroRNA簡介
        1.1 miRNA的生物合成
        1.2 植物miRNA的調(diào)控機(jī)制
    2. 植物miRNA的功能多樣性
        2.1 miRNA參與植物生長發(fā)育
        2.2 miRNA參與信號(hào)傳導(dǎo)過程
        2.3 miRNA參與植物疾病過程
        2.4 miRNA參與植物逆境脅迫的響應(yīng)
    3. miR165/166及其靶基因HD-ZIPⅢ的研究進(jìn)展
    4. miRNA減低表達(dá)新方法—STTM技術(shù)
    5. 研究目的和意義
第二章 試驗(yàn)材料與方法
    1. 試驗(yàn)材料、儀器及試劑
        1.1 材料及培養(yǎng)條件
        1.2 試驗(yàn)儀器及試劑
        1.3 主要溶液及試劑的配制
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 STTM165/166轉(zhuǎn)基因番茄的篩選及PCR鑒定
        2.2 番茄不同組織中miR165/166及其靶基因表達(dá)的qRT-PCR檢測(cè)
        2.3 番茄幼莖石蠟切片
        2.4 擬南芥干旱脅迫
        2.5 擬南芥鹽脅迫
第三章 結(jié)果與分析
    1. 番茄miR165/166組織特異性表達(dá)分析
    2. STTM165/166轉(zhuǎn)基因番茄的PCR鑒定
    3. 轉(zhuǎn)基因番茄中STTM165/166、miR165/166及其靶基因的表達(dá)分析
    4. STTM165/166轉(zhuǎn)基因番茄的表型
        4.1 STTM165/166對(duì)番茄植株生長發(fā)育的影響
        4.2 STTM165/166對(duì)番茄維管組織極性的影響
    5. STTM165/166轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)逆境脅迫的響應(yīng)
        5.1. miR165/166及其靶基因啟動(dòng)子區(qū)逆境脅迫相關(guān)順式作用元件
        5.2 PEG脅迫對(duì)miR165/166及其靶基因表達(dá)的影響
        5.3 PEG脅迫對(duì)POD酶活性及MDA含量的影響
        5.5 土壤干旱脅迫對(duì)擬南芥表型及葉綠素含量的影響
        5.6 鹽脅迫對(duì)擬南芥表型的影響
第四章 討論
    1 miR165/166在番茄種的表達(dá)特性
    2 miR165/166及其靶基因?qū)χ参镄螒B(tài)建成的調(diào)控
    3 miR165/166在植物逆境脅迫響應(yīng)中的作用
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
Abstract
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MicroRNA828負(fù)調(diào)控缺磷脅迫誘導(dǎo)的番茄花青素生物合成[J]. 賈小云,劉慧,沈潔,李芳,丁娜,孫巖,高昌勇,李潤植.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(15)
[2]植物HD-Zip轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能[J]. 王宏,李剛波,張大勇,藺經(jīng),盛寶龍,韓金龍,常有宏.  遺傳. 2013(10)
[3]Short Tandem Target Mimic:A Long Journey to the Engineered Molecular Landmine for Selective Destruction/Blockage of MicroRNAs in Plants and Animals[J]. Guiliang Tang,Xiaoqing Tang.  Journal of Genetics and Genomics. 2013(06)
[4]Effects of Water Stress on the Protective Enzyme Activities and Lipid Peroxidation in Roots and Leaves of Summer Maize[J]. GE Ti-da1, SUI Fang-gong1, BAI Li-ping2, LU Yin-yan1 and ZHOU Guang-sheng2 1 Department of Agronomy, Laiyang Agricultural College, Laiyang 265200, P.R.China 2 Laboratory of Quantitative Vegetation Ecology, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093, P.R.China.  Agricultural Sciences in China. 2006(04)
[5]Identification and characterization of new plant microRNAs using EST analysis[J]. George P.COBB1,Todd A.ANDERSON.  Cell Research. 2005(05)
[6]植物葉綠素含量測(cè)定——丙酮乙醇混合液法[J]. 張憲政.  遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué). 1986(03)

碩士論文
[1]鹽脅迫條件下青楊和旱柳miRNA表達(dá)變化研究[D]. 周婧.中國林業(yè)科學(xué)研究院 2010



本文編號(hào)：3627840