玉蕈與金針菇原生質(zhì)體融合研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-21 23:45
玉蕈(Hypsizigus marmoreus (Peck) Bigelw)又名斑玉蕈。因其具有螃蟹的味道,又叫做蟹味菇,是一種木質(zhì)腐生真菌。玉蕈自然分布在歐洲、北美、日本和西伯利亞等地區(qū)。玉蕈含有氨基酸、維生素、礦物質(zhì)元素、多糖等豐富的營養(yǎng)物質(zhì),品質(zhì)優(yōu)良,味道鮮美,口感極佳,是一種高蛋白、低脂肪、低熱量的保健食品。金針菇(Flammulina velutiper(Fr.)Sing.)學(xué)名毛柄金錢菌。金針菇分布較廣是一種木質(zhì)腐生真菌。金針菇對(duì)兒童智力發(fā)育有良好的促進(jìn)作用,因此也稱為“增智菇”、“聰明菇”。它還具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降低膽固醇、保護(hù)肝細(xì)胞等功效,是一種富含維生素、礦物質(zhì)元素、高蛋白、低脂肪、低熱量的日常蔬菜和保健食品。作者的試驗(yàn)研究旨在獲得兼具兩親本優(yōu)良性狀優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的融合株。為今后進(jìn)入液體發(fā)酵、活性物質(zhì)的提取、融合菌株的育種研究,進(jìn)行人工栽培獲得具有商品價(jià)值的子實(shí)體研究奠定基礎(chǔ)。試驗(yàn)通過使用單因素法、正交設(shè)計(jì)法等篩選方式研究探討了玉蕈和金針菇液體培養(yǎng)基的篩選、原生質(zhì)體制備與再生、滅活標(biāo)記、融合條件優(yōu)化和融合株鑒定,得到如下結(jié)論:玉蕈最佳液體培養(yǎng)基:麥芽糖3.00%,蔗糖3...
【文章來源】:天津師范大學(xué)天津市
【文章頁數(shù)】:98 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 原生質(zhì)體融合技術(shù)
1.1.1 原生質(zhì)體
1.1.2 原生質(zhì)體融合技術(shù)
1.1.3 原生質(zhì)體融合發(fā)展現(xiàn)狀
1.2 原生質(zhì)體融合方法
1.2.1 原生質(zhì)體的制備和再生
1.2.2 親本菌株的標(biāo)記
1.2.3 原生質(zhì)體融合
1.2.4 融合子的鑒定
1.3 親本菌株概述
1.3.1 玉蕈概述
1.3.2 金針菇概述
1.3.3 食用菌發(fā)展現(xiàn)狀
1.3.4 研究目的與意義
1.4 玉蕈與金針菇原生質(zhì)體融合技術(shù)路線
第二章 雙親本菌株液體培養(yǎng)基篩選
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 供試菌種
2.1.2 試劑
2.1.3 試驗(yàn)儀器
2.1.4 培養(yǎng)基(W/V)
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 菌種活化及提純復(fù)壯
2.2.2 親本頡頏試驗(yàn)
2.2.3 菌絲體液體培養(yǎng)
2.2.4 測(cè)量菌絲體干重
2.2.5 玉蕈液體培養(yǎng)基篩選
2.2.6 金針菇液體培養(yǎng)基篩選
2.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
2.3.1 菌種活化及提純復(fù)壯
2.3.2 雙親本頡頏試驗(yàn)
2.3.3 玉蕈液體培養(yǎng)基篩選
2.3.4 金針菇液體培養(yǎng)基篩選
2.4 結(jié)論
第三章 雙親本菌株原生質(zhì)體制備與再生
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 供試菌種
3.1.2 試劑
3.1.3 試驗(yàn)儀器
3.1.4 培養(yǎng)基
3.1.5 滲透壓穩(wěn)定劑(簡(jiǎn)稱滲穩(wěn)劑)
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 菌絲體培養(yǎng)
3.2.2 酶液配置
3.2.3 原生質(zhì)體制備
3.2.4 原生質(zhì)體分離、純化與計(jì)數(shù)
3.2.5 原生質(zhì)體再生
3.2.6 雙親本原生質(zhì)體制備與再生正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.2.7 再生培養(yǎng)基對(duì)再生的影響
3.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 雙親本原生質(zhì)體釋放方式
3.3.2 雙親本原生質(zhì)體最佳制備條件
3.3.3 雙親本原生質(zhì)體最佳再生條件
3.3.4 再生培養(yǎng)基的影響
3.3.5 雙親本原生質(zhì)體再生過程
3.3.6 再生菌株與親本菌株頡頏試驗(yàn)
3.4 討論
3.5 結(jié)論
第四章 原生質(zhì)體滅活標(biāo)記及融合
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 雙親本原生質(zhì)體
4.1.2 試劑
4.1.3 試驗(yàn)儀器
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 玉蕈原生質(zhì)體紫外滅活標(biāo)記
4.2.2 金針菇原生質(zhì)體熱滅活標(biāo)記
4.2.3 原生質(zhì)體融合
4.2.4 融合子檢出
4.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 玉蕈原生質(zhì)體紫外滅活結(jié)果
4.3.2 金針菇原生質(zhì)體熱滅活結(jié)果
4.3.3 原生質(zhì)體融合
4.3.4 融合子檢出
4.4 討論
4.5 結(jié)論
第五章 融合株的鑒定
5.1 試驗(yàn)材料
5.1.1 供試菌種
5.1.2 試劑
5.1.3 試驗(yàn)儀器
5.1.4 培養(yǎng)基
5.1.5 RAPD-PCR反應(yīng)隨機(jī)引物
5.1.6 ERIC-PCR反應(yīng)引物
5.2 試驗(yàn)方法
5.2.1 頡頏試驗(yàn)
5.2.2 菌落特征比較
5.2.3 菌絲體生長速度比較
5.2.4 菌絲形態(tài)比較
5.2.5 RAPD與ERIC分子標(biāo)記方法鑒定
5.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
5.3.1 頡頏試驗(yàn)結(jié)果
5.3.2 菌落特征比較
5.3.3 菌絲體生長速度比較
5.3.4 菌絲形態(tài)比較
5.3.5 DNA純度檢測(cè)
5.3.6 遺傳相似性分析
5.4 結(jié)論
第六章 總結(jié)
6.1 雙親本液體培養(yǎng)基篩選
6.2 雙親本原生質(zhì)體制備與再生
6.3 雙親本原生質(zhì)體滅活標(biāo)記
6.4 原生質(zhì)體融合
6.5 融合株鑒定
6.6 試驗(yàn)需改進(jìn)的地方
6.7 創(chuàng)新之處
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3510494
【文章來源】:天津師范大學(xué)天津市
【文章頁數(shù)】:98 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 原生質(zhì)體融合技術(shù)
1.1.1 原生質(zhì)體
1.1.2 原生質(zhì)體融合技術(shù)
1.1.3 原生質(zhì)體融合發(fā)展現(xiàn)狀
1.2 原生質(zhì)體融合方法
1.2.1 原生質(zhì)體的制備和再生
1.2.2 親本菌株的標(biāo)記
1.2.3 原生質(zhì)體融合
1.2.4 融合子的鑒定
1.3 親本菌株概述
1.3.1 玉蕈概述
1.3.2 金針菇概述
1.3.3 食用菌發(fā)展現(xiàn)狀
1.3.4 研究目的與意義
1.4 玉蕈與金針菇原生質(zhì)體融合技術(shù)路線
第二章 雙親本菌株液體培養(yǎng)基篩選
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 供試菌種
2.1.2 試劑
2.1.3 試驗(yàn)儀器
2.1.4 培養(yǎng)基(W/V)
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 菌種活化及提純復(fù)壯
2.2.2 親本頡頏試驗(yàn)
2.2.3 菌絲體液體培養(yǎng)
2.2.4 測(cè)量菌絲體干重
2.2.5 玉蕈液體培養(yǎng)基篩選
2.2.6 金針菇液體培養(yǎng)基篩選
2.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
2.3.1 菌種活化及提純復(fù)壯
2.3.2 雙親本頡頏試驗(yàn)
2.3.3 玉蕈液體培養(yǎng)基篩選
2.3.4 金針菇液體培養(yǎng)基篩選
2.4 結(jié)論
第三章 雙親本菌株原生質(zhì)體制備與再生
3.1 試驗(yàn)材料
3.1.1 供試菌種
3.1.2 試劑
3.1.3 試驗(yàn)儀器
3.1.4 培養(yǎng)基
3.1.5 滲透壓穩(wěn)定劑(簡(jiǎn)稱滲穩(wěn)劑)
3.2 試驗(yàn)方法
3.2.1 菌絲體培養(yǎng)
3.2.2 酶液配置
3.2.3 原生質(zhì)體制備
3.2.4 原生質(zhì)體分離、純化與計(jì)數(shù)
3.2.5 原生質(zhì)體再生
3.2.6 雙親本原生質(zhì)體制備與再生正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.2.7 再生培養(yǎng)基對(duì)再生的影響
3.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 雙親本原生質(zhì)體釋放方式
3.3.2 雙親本原生質(zhì)體最佳制備條件
3.3.3 雙親本原生質(zhì)體最佳再生條件
3.3.4 再生培養(yǎng)基的影響
3.3.5 雙親本原生質(zhì)體再生過程
3.3.6 再生菌株與親本菌株頡頏試驗(yàn)
3.4 討論
3.5 結(jié)論
第四章 原生質(zhì)體滅活標(biāo)記及融合
4.1 試驗(yàn)材料
4.1.1 雙親本原生質(zhì)體
4.1.2 試劑
4.1.3 試驗(yàn)儀器
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 試驗(yàn)方法
4.2.1 玉蕈原生質(zhì)體紫外滅活標(biāo)記
4.2.2 金針菇原生質(zhì)體熱滅活標(biāo)記
4.2.3 原生質(zhì)體融合
4.2.4 融合子檢出
4.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 玉蕈原生質(zhì)體紫外滅活結(jié)果
4.3.2 金針菇原生質(zhì)體熱滅活結(jié)果
4.3.3 原生質(zhì)體融合
4.3.4 融合子檢出
4.4 討論
4.5 結(jié)論
第五章 融合株的鑒定
5.1 試驗(yàn)材料
5.1.1 供試菌種
5.1.2 試劑
5.1.3 試驗(yàn)儀器
5.1.4 培養(yǎng)基
5.1.5 RAPD-PCR反應(yīng)隨機(jī)引物
5.1.6 ERIC-PCR反應(yīng)引物
5.2 試驗(yàn)方法
5.2.1 頡頏試驗(yàn)
5.2.2 菌落特征比較
5.2.3 菌絲體生長速度比較
5.2.4 菌絲形態(tài)比較
5.2.5 RAPD與ERIC分子標(biāo)記方法鑒定
5.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
5.3.1 頡頏試驗(yàn)結(jié)果
5.3.2 菌落特征比較
5.3.3 菌絲體生長速度比較
5.3.4 菌絲形態(tài)比較
5.3.5 DNA純度檢測(cè)
5.3.6 遺傳相似性分析
5.4 結(jié)論
第六章 總結(jié)
6.1 雙親本液體培養(yǎng)基篩選
6.2 雙親本原生質(zhì)體制備與再生
6.3 雙親本原生質(zhì)體滅活標(biāo)記
6.4 原生質(zhì)體融合
6.5 融合株鑒定
6.6 試驗(yàn)需改進(jìn)的地方
6.7 創(chuàng)新之處
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3510494
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