HY5是bZIP類的轉(zhuǎn)錄因子,在光信號(hào)和低溫信號(hào)通路中都具有重要的作用。自從擬南芥中分離鑒定出HY5蛋白以來,該蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及其分子機(jī)制逐漸得到闡明。目前對(duì)HY5蛋白的研究主要集中在光信號(hào)傳導(dǎo)中,對(duì)其在低溫脅迫中的作用及調(diào)控機(jī)制還不太明了�；诖�,本研究主要探究番茄HY5基因（SlHY5）在低溫脅迫中的作用,以期為將來利用該基因進(jìn)行蔬菜耐低溫育種奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,番茄HY5蛋白為核定位蛋白。熒光實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明,SlHY5基因在番茄根、莖、葉、花和成熟果實(shí)中組成型表達(dá)。SlHY5基因在低溫、NaCl和ABA處理中表達(dá)量上調(diào)。番茄SlHY5過表達(dá)植株低溫耐受性得到提高,并且SlHY5基因表達(dá)水平與轉(zhuǎn)基因株系的低溫耐受性成良好的正相關(guān)。這表明SlHY5可能在低溫等非生物脅迫中具有重要作用。在低溫脅迫下,與野生型番茄相比,SlHY5過表達(dá)株系中SOD和POX的基因表達(dá)量顯著升高,番茄體內(nèi)積累了較少的ROS,相對(duì)電解質(zhì)滲漏率和MDA含量也明顯降低。結(jié)果表明,SlHY5基因過表達(dá)能提高抗氧化酶基因表達(dá)量來降低ROS含量、緩解氧化損傷和膜脂過氧化程度,從而增... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 低溫對(duì)植物的影響
    1.2 低溫對(duì)番茄生產(chǎn)的影響
    1.3 bZIP轉(zhuǎn)錄因子的作用
    1.4 HY5蛋白的作用
    1.5 低溫脅迫下的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
    1.6 本研究的目的、意義和主要研究?jī)?nèi)容
        1.6.1 研究目的和意義
        1.6.2 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 植物材料的處理
        2.1.3 菌株和載體
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 番茄SlHY5蛋白序列同源比較和系統(tǒng)發(fā)生分析
        2.2.2 不同脅迫處理后番茄SlHY5基因表達(dá)量的變化
        2.2.3 野生型番茄SlHY5基因組織特異性分析
        2.2.4 番茄SlHY5蛋白亞細(xì)胞定位
        2.2.5 SlHY5基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.6 SlHY5基因沉默載體的構(gòu)建
        2.2.7 葉盤法轉(zhuǎn)基因
        2.2.8 膜脂過氧化程度的測(cè)定及相關(guān)抗氧化酶基因的表達(dá)
        2.2.9 花青素含量的測(cè)定及其合成相關(guān)基因的表達(dá)
        2.2.10 SlHY5誘導(dǎo)的相關(guān)低溫誘導(dǎo)基因的表達(dá)
        2.2.11 數(shù)據(jù)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 番茄SlHY5蛋白序列同源比較和系統(tǒng)發(fā)生分析
    3.2 番茄SlHY5基因組織特異性分析
    3.3 不同脅迫處理后番茄SlHY5基因表達(dá)量的變化分析
    3.4 番茄SlHY5蛋白亞細(xì)胞定位
        3.4.1 SlHY5蛋白亞細(xì)胞定位載體構(gòu)建
        3.4.2 SlHY5蛋白亞細(xì)胞定位
    3.5 SlHY5基因過表達(dá)載體和基因沉默載體的構(gòu)建
        3.5.1 基因過表達(dá)載體構(gòu)建
        3.5.2 基因沉默載體構(gòu)建
    3.6 遺傳轉(zhuǎn)化結(jié)果
    3.7 轉(zhuǎn)基因植株低溫抗性初步鑒定
    3.8 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄膜脂過氧化程度的測(cè)定及相關(guān)抗氧化酶基因的表達(dá)
        3.8.1 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄相對(duì)電解質(zhì)滲漏率和丙二醛含量
        3.8.2 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄過氧化氫和超氧陰離子含量
        3.8.3 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄抗氧化酶基因的表達(dá)
    3.9 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄花青素含量及其合成相關(guān)基因的表達(dá)
    3.10 低溫脅迫下轉(zhuǎn)基因番茄中SlHY5誘導(dǎo)的相關(guān)低溫誘導(dǎo)基因的表達(dá)
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 討論
        4.1.1 SlHY5基因?qū)Ψ巧锩{迫的響應(yīng)
        4.1.2 SlHY5基因?qū)Φ蜏孛{迫下抗氧化防御系統(tǒng)的影響
        4.1.3 SlHY5基因?qū)ㄇ嗨睾铣傻挠绊?br>        4.1.4 SlHY5基因?qū)ο嚓P(guān)低溫誘導(dǎo)基因表達(dá)的影響
    4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]低溫脅迫對(duì)葡萄幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗氧化酶活性的影響[J]. 王旺田,劉文瑜,姜寒玉,孫萍,蘇萬和,張金林.  中國(guó)果樹. 2015(01)
[2]水稻病程相關(guān)蛋白質(zhì)在逆境脅迫下的表達(dá)研究[J]. 高慶華,曾祥然,賈霖,牛東東,李雪姣,關(guān)明俐,賈盟,蘭金蘋,竇世娟,李莉云,劉麗娟,劉國(guó)振.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2013(11)
[3]乙酰水楊酸對(duì)夜間亞低溫番茄幼苗抗寒性的影響[J]. 張陽,姜晶.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2012(25)
[4]低溫脅迫對(duì)番茄光合特性及抗氧化酶活性的影響[J]. 楊再?gòu)?qiáng),張波,張繼波,彭曉丹,張婷華,張靜.  自然災(zāi)害學(xué)報(bào). 2012(04)
[5]蓮霧不同種的低溫半致死溫度及抗冷適應(yīng)性[J]. 張綠萍,蔡永強(qiáng),金吉林,陳守一,鐘杰.  果樹學(xué)報(bào). 2012(02)
[6]煙草NtLS基因RNA干擾表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 王衛(wèi)鋒,太帥帥,王魯,劉貫山,李鳳霞,高曉明,孫玉合.  中國(guó)煙草科學(xué). 2011(04)
[7]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能[J]. 張計(jì)育,渠慎春,郭忠仁,杜小麗,都貝貝,章鎮(zhèn).  西北植物學(xué)報(bào). 2011(05)
[8]植物HY5蛋白結(jié)構(gòu)與功能的研究進(jìn)展[J]. 張荔,周波,李玉花.  植物生理學(xué)通訊. 2010(10)
[9]植物應(yīng)答低溫脅迫機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 計(jì)淑霞,戴紹軍,劉煒.  生命科學(xué). 2010(10)
[10]苗期夜間亞低溫對(duì)番茄生長(zhǎng)發(fā)育的影響及耐低溫材料的篩選[J]. 姜晶,張陽,唐廣浩.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(01)

博士論文
[1]火龍果對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及離體誘變篩選抗寒突變體研究[D]. 鄧仁菊.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]外源硅對(duì)番茄幼苗水分脅迫傷害的緩解效應(yīng)及機(jī)理研究[D]. 石玉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[3]硅對(duì)水分脅迫下水稻生理生化特性、亞顯微結(jié)構(gòu)及相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制研究[D]. 明東風(fēng).浙江大學(xué) 2012

碩士論文
[1]高溫脅迫下番茄Solexa轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及LeCOR413-TM1基因的克隆和功能分析[D]. 尹波.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]亞低溫脅迫下氮素形態(tài)對(duì)番茄幼苗生理特性和根系形態(tài)的影響[D]. 劉國(guó)英.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014



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