發(fā)布時間：2021-11-13 11:55

　　為了解危害核桃果實青皮的兩種食性迥異害蟲核桃舉肢蛾（Atrijuglans hetaohei Yang）和桃蛀螟（Dichocrocis punctiferalis Guenee）幼蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)與多樣性。本研究采用基于16S rRNA基因的變性梯度凝膠電泳（PCR-DGGE）、末端限制性片段長度多樣性（T-RFLP）技術(shù)以及高通量測序方法綜合分析兩種幼蟲腸道細(xì)菌群落特征。研究結(jié)果表明:（1）PCR-DGGE分析顯示核桃舉肢蛾幼蟲腸道細(xì)菌主要有沃爾巴克氏體屬（Wolbachia）、腸球菌屬（Enterococcus）、腸桿菌屬（Enterobacter）、根瘤菌屬（Rhizobium）和假單胞菌屬（Pseudomonas）,其中沃爾巴克氏體屬（Wolbachia）是優(yōu)勢菌屬,占測得序列的40.0%;桃蛀螟幼蟲腸道細(xì)菌主要有沃爾巴克氏體屬（Wolbachia）、腸球菌屬（Enterococcus）、根瘤菌屬（Rhizobium）和假單胞菌屬（Pseudomonas）,其中腸球菌屬（Enterococcus）是優(yōu)勢菌屬,占測得序列的62.9%。（2）DGGE條帶的系統(tǒng)發(fā)育分析顯示,核桃... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 核桃舉肢蛾、桃蛀螟研究概況
    1.2 昆蟲腸道微生物研究進(jìn)展
        1.2.1 昆蟲腸道微生物國內(nèi)外研究進(jìn)展
        1.2.2 昆蟲腸道微生物功能研究
    1.3 腸道微生物的研究方法
        1.3.1 微生物分離培養(yǎng)法在腸道微生物研究中的應(yīng)用
        1.3.2 分子生物學(xué)方法在腸道微生物研究中的應(yīng)用
    1.4 本研究的目的和意義
第二章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 核桃舉肢蛾和桃蛀螟幼蟲的采集
        2.1.2 主要試劑及引物
        2.1.3 培養(yǎng)基及溶液的配制
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗樣品的制備
        2.2.2 樣品基因組DNA的提取
        2.2.3 腸道細(xì)菌群落多樣性的PCR-DGGE分析
        2.2.4 腸道細(xì)菌群落多樣性的T-RFLP分析
        2.2.5 腸道細(xì)菌群落多樣性的高通量分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及其多樣性的PCR-DGGE分析
        3.1.1 腸道細(xì)菌基因組總DNA的提取及檢測結(jié)果
        3.1.2 腸道細(xì)菌 16S rRNA基因V3區(qū)PCR擴增結(jié)果及分析
        3.1.3 細(xì)菌群落多樣性分析
        3.1.4 系統(tǒng)發(fā)育分析和優(yōu)勢菌屬
    3.2 兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及其多樣性的T-RFLP分析
        3.2.1 熒光標(biāo)記 16S rRNA基因全長擴增結(jié)果
        3.2.2 腸道細(xì)菌T-RFLP圖譜分析
        3.2.3 多樣性指數(shù)分析和優(yōu)勢菌群
        3.2.4 聚類分析和主成分分析
    3.3 兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及其多樣性的高通量分析
        3.3.1 兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落多樣性分析
        3.3.2 兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析
        3.3.3 聚類分析和主成分分析
    3.4 三種研究方法鑒定兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及其多樣性的相關(guān)比較
        3.4.1 高通量測序腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)與DGGE的相關(guān)比較
        3.4.2 高通量測序和DGGE以及T-RFLP比較分析兩種昆蟲腸道細(xì)菌群落多樣性
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 討論
    4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]昆蟲腸道微生物功能及家蠶腸道微生物研究進(jìn)展[J]. 周洪英,孫波,吳洪麗,胡興明,郝瑜,葉建美.  北方蠶業(yè). 2015(04)
[2]不同立地條件下“核桃黑”的發(fā)生情況調(diào)查[J]. 趙凱旋,張文超,馮紀(jì)年.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2015(10)
[3]高通量測序和DGGE分析土壤微生物群落的技術(shù)評價[J]. 夏圍圍,賈仲君.  微生物學(xué)報. 2014(12)
[4]生物炭對農(nóng)田土壤細(xì)菌群落多樣性影響的PCR-DGGE分析[J]. 何莉莉,楊慧敏,鐘哲科,公丕濤,劉玉學(xué),呂豪豪,楊生茂.  生態(tài)學(xué)報. 2014(15)
[5]從“高鐵上的孩子們”看新生活的魅力[J]. 李木馬.  綠色中國. 2013(02)
[6]商洛市核桃舉肢蛾發(fā)生規(guī)律與防治[J]. 王祥明.  北方果樹. 2013(01)
[7]SPASS主成分分析法在速凍水餃皮質(zhì)構(gòu)品質(zhì)評價中的應(yīng)用[J]. 李雪琴,張芳芳,黨獻(xiàn)民,張雪梅.  農(nóng)業(yè)機械. 2012(36)
[8]我國木本糧油產(chǎn)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略研究[J]. 譚曉風(fēng),馬履一,李芳東,姚小華,裴東,蘇淑釵,毛永民,李建安,袁德義.  經(jīng)濟林研究. 2012(01)
[9]高通量測序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才.  中國生物工程雜志. 2012(01)
[10]山陽縣核桃產(chǎn)業(yè)存在問題及對策[J]. 熊瑛,楊莉.  河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(09)

博士論文
[1]應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化[D]. 趙勇.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]暗黑鰓金龜腸道共生菌分子多態(tài)性研究[D]. 黃勝威.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]應(yīng)用T-RFLP技術(shù)分析人腸道中柔嫩梭菌類群組成的研究[D]. 柳欣源.上海交通大學(xué) 2009
[3]蝗蟲腸道菌群結(jié)構(gòu)的分子生態(tài)學(xué)研究[D]. 龍文敏.山西大學(xué) 2009
[4]入侵植物加拿大一枝黃花對根際土壤微生物群落多樣性的影響研究[D]. 李國慶.福建農(nóng)林大學(xué) 2009



本文編號：3492973