菊花CmBBX7基因克隆及功能分析
發(fā)布時(shí)間:2021-11-01 03:34
菊花(Chrysanthemum morflorium)原產(chǎn)于中國(guó),多為短日照植物,以秋季開(kāi)花者居多,其觀賞價(jià)值很高,因此受人們廣泛喜愛(ài)。作為世界四大鮮切花之一,菊花鮮切花的栽培生產(chǎn)目前已遍布世界各地,且對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的研究也得到了人們的普遍重視。夏菊’優(yōu)香’自然花期在6-9月,因其花型好看、花色純正、莖干挺直并且有很好的耐運(yùn)輸性及抗性,所以受到國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者的喜愛(ài)。另外,BBXs家族基因?qū)儆谝环N功能非常多樣的基因,該家族成員一方面能夠?qū)囟、激素的變化產(chǎn)生響應(yīng),另一方面也會(huì)受到光信號(hào)的調(diào)節(jié);外界環(huán)境的變化也會(huì)使該家族基因的表達(dá)量發(fā)生不同程度的變化。本研究以菊花’優(yōu)香’為材料,克隆了’優(yōu)香’BBXs家族中的同源基因CmBBX7,利用轉(zhuǎn)基因、表達(dá)定量分析等技術(shù)分析了其基因功能,并利用酵母雙雜交、雙分子熒光互補(bǔ)等驗(yàn)證蛋白功能的相關(guān)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探究其作用機(jī)制。研究結(jié)果如下:1、為了對(duì)夏菊’優(yōu)香’的花芽分化時(shí)期的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行分析,在對(duì)花芽取樣過(guò)程中,歸納總結(jié)了一套節(jié)省人力、物力及制作時(shí)間的石蠟切片制作方法;通過(guò)對(duì)夏菊’優(yōu)香’轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析(SRP029991),克隆得到CL7046.Contig5
【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:96 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1擬南芥開(kāi)花控制相關(guān)路徑示意圖(Fomaraetal.2010a)??Fig.??
量表達(dá)并抑制轉(zhuǎn)錄,若經(jīng)過(guò)春化處理,則這種抑制作用會(huì)被的誘導(dǎo)表達(dá)??而逐漸減弱至消除,而在這一過(guò)程中增加的VRN3蛋白會(huì)與FDZ2(?Flowering?locus-like??2)蛋白發(fā)生互作,進(jìn)而刺激_/的大量表達(dá),誘導(dǎo)植物的開(kāi)花(如圖1-2)?(Yanet??al.?2004;?Shitsukawaetal.?2007;?Jung?et.al?2009;?Yanetal.?2006)。綜上所述,研究人??員認(rèn)為,雖然單子葉植物與雙子葉植物的春化過(guò)程中的某些蛋白在結(jié)構(gòu)上有一定的相??似性,但這兩類(lèi)植物的春化途徑實(shí)際并不相同,兩者有極大的可能性是獨(dú)立進(jìn)化而來(lái)。??—.....了??—^^^(API?homloge)??I??^?(Fr?homloge)?Light?condition??A?Low?temperature??—I?Nagative?regulation??—?—?rcg—丨加??圖1-2小麥春化路徑示意圖(Shitsukawaetal.?2007)??Fig.?1-2?Diagram?of?Wheat?vernalization?path?(Shitsukawa?et?al.?2007?)??1.1.3赤霉素路徑??赤霉素是一種植物激素,其在植物生長(zhǎng)發(fā)育的許多階段及植物新陳代謝的許多方??面都發(fā)揮著重要的作用。在開(kāi)花調(diào)控方面,赤霉素路徑作為一種單獨(dú)的開(kāi)花調(diào)控方式,??參與花芽分化及花器官的形成。關(guān)于擬南芥的研究發(fā)現(xiàn),在短日照條件下,赤霉素是??其開(kāi)花的必要條件之一,在赤霉素處理之后,可以使擬南芥在短日條件下提前早花??(Wilson?and?Heckman?1992)。目前
一個(gè)CCT結(jié)構(gòu)域;第IV類(lèi)BBXs轉(zhuǎn)錄因子含有B-boxl和B-box2兩個(gè)B-box結(jié)構(gòu)域,??但不含CCT結(jié)構(gòu)域,這一類(lèi)包括A5SA7S-25八個(gè)家族成員;第V類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子只含有??一個(gè)B-box結(jié)構(gòu)域,該類(lèi)成員有A55X26-32?(如圖1-3?)。??B-boxl?戀?B-box2?_?CCT?^?VP?motif??AT5G15840?8BX1?373?!?AT2G21320?肪X18?172?JV??AT5G15850?BBX2?I?|?i?H?III?■_?35S?I?AT4G38560?B8X19?226?IV??AT3G02380?B8X3?—?347?I?AT4G39070?B8X20???2??fV??AT262?790?BBX4?-??8?BHHR-?294?I?AT1G7S540?B8X21????331?IV??AT5G24930?BBXS?一 ̄?'Cl?MW?406?I?AT1G78600?BSX22???3i9?jy??AT5657660?B8X6?-3SS?I?AT4610240?BSX23???162?IV??AT3G07650?BBX7?372?B?AT1G0604D?BSX24?■?24S?IV??ATS64S250?B似?8??Otf?375?R?AT2G31380?B8X25??癌?238?fV??AT4G1S250?BBX9?丨……i?n?.1?—?330?E!?AT1G602S0?肪X26?251?V??AT3G21880?BBX10?r ̄ ̄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]光皮樺BBX類(lèi)基因BlCOL13的克隆與表達(dá)分析[J]. 竇錦青,程龍軍,徐鳳華,張俊紅,童再康. 園藝學(xué)報(bào). 2015(07)
[2]植物開(kāi)花調(diào)控途徑[J]. 劉永平,楊靜,楊明峰. 生物工程學(xué)報(bào). 2015(11)
[3]亞精胺參與菊花花芽分化的調(diào)控研究[J]. 郭俊娥,李田,孫憲芝,孫霞,鄭成淑. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]低毒高效的植物石蠟切片方法[J]. 李鳳英,馬姜明,梁士楚,唐紹清,薛躍規(guī). 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[5]菊花毛刺的形態(tài)及顯微結(jié)構(gòu)[J]. 張婷,房偉民,蔣甲福,陳素梅,管志勇,廖園,陳發(fā)棣. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(01)
[6]水稻幼嫩根尖常規(guī)石蠟切片制作技術(shù)改良[J]. 張新梅,董曉英,沈仁芳. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(12)
[7]菊花花發(fā)育基因CmCO和CmFT的克隆與表達(dá)分析[J]. 田素波,林桂玉,鄭成淑,孫霞,任洪艷,溫立柱. 園藝學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]杏花芽石蠟切片方法的改良[J]. 帥煥麗,楊途熙,魏安智,王佳,李曉,張瑩. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2011(03)
[9]粳稻穎果石蠟切片中染色時(shí)間的摸索及其解剖結(jié)構(gòu)的觀察[J]. 于曉剛,張文忠,韓亞?wèn)|,李婧,徐海,趙明輝,高東昌,徐正進(jìn),陳溫福. 作物雜志. 2010(05)
[10]植物Dof轉(zhuǎn)錄因子[J]. 楊靜,沈世華. 植物生理學(xué)通訊. 2010(03)
碩士論文
[1]不同品種薹用大蒜花芽分化過(guò)程的形態(tài)解剖及部分生理生化特性研究[D]. 郭菊葉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3469445
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【文章頁(yè)數(shù)】:96 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1擬南芥開(kāi)花控制相關(guān)路徑示意圖(Fomaraetal.2010a)??Fig.??
量表達(dá)并抑制轉(zhuǎn)錄,若經(jīng)過(guò)春化處理,則這種抑制作用會(huì)被的誘導(dǎo)表達(dá)??而逐漸減弱至消除,而在這一過(guò)程中增加的VRN3蛋白會(huì)與FDZ2(?Flowering?locus-like??2)蛋白發(fā)生互作,進(jìn)而刺激_/的大量表達(dá),誘導(dǎo)植物的開(kāi)花(如圖1-2)?(Yanet??al.?2004;?Shitsukawaetal.?2007;?Jung?et.al?2009;?Yanetal.?2006)。綜上所述,研究人??員認(rèn)為,雖然單子葉植物與雙子葉植物的春化過(guò)程中的某些蛋白在結(jié)構(gòu)上有一定的相??似性,但這兩類(lèi)植物的春化途徑實(shí)際并不相同,兩者有極大的可能性是獨(dú)立進(jìn)化而來(lái)。??—.....了??—^^^(API?homloge)??I??^?(Fr?homloge)?Light?condition??A?Low?temperature??—I?Nagative?regulation??—?—?rcg—丨加??圖1-2小麥春化路徑示意圖(Shitsukawaetal.?2007)??Fig.?1-2?Diagram?of?Wheat?vernalization?path?(Shitsukawa?et?al.?2007?)??1.1.3赤霉素路徑??赤霉素是一種植物激素,其在植物生長(zhǎng)發(fā)育的許多階段及植物新陳代謝的許多方??面都發(fā)揮著重要的作用。在開(kāi)花調(diào)控方面,赤霉素路徑作為一種單獨(dú)的開(kāi)花調(diào)控方式,??參與花芽分化及花器官的形成。關(guān)于擬南芥的研究發(fā)現(xiàn),在短日照條件下,赤霉素是??其開(kāi)花的必要條件之一,在赤霉素處理之后,可以使擬南芥在短日條件下提前早花??(Wilson?and?Heckman?1992)。目前
一個(gè)CCT結(jié)構(gòu)域;第IV類(lèi)BBXs轉(zhuǎn)錄因子含有B-boxl和B-box2兩個(gè)B-box結(jié)構(gòu)域,??但不含CCT結(jié)構(gòu)域,這一類(lèi)包括A5SA7S-25八個(gè)家族成員;第V類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子只含有??一個(gè)B-box結(jié)構(gòu)域,該類(lèi)成員有A55X26-32?(如圖1-3?)。??B-boxl?戀?B-box2?_?CCT?^?VP?motif??AT5G15840?8BX1?373?!?AT2G21320?肪X18?172?JV??AT5G15850?BBX2?I?|?i?H?III?■_?35S?I?AT4G38560?B8X19?226?IV??AT3G02380?B8X3?—?347?I?AT4G39070?B8X20???2??fV??AT262?790?BBX4?-??8?BHHR-?294?I?AT1G7S540?B8X21????331?IV??AT5G24930?BBXS?一 ̄?'Cl?MW?406?I?AT1G78600?BSX22???3i9?jy??AT5657660?B8X6?-3SS?I?AT4610240?BSX23???162?IV??AT3G07650?BBX7?372?B?AT1G0604D?BSX24?■?24S?IV??ATS64S250?B似?8??Otf?375?R?AT2G31380?B8X25??癌?238?fV??AT4G1S250?BBX9?丨……i?n?.1?—?330?E!?AT1G602S0?肪X26?251?V??AT3G21880?BBX10?r ̄ ̄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]光皮樺BBX類(lèi)基因BlCOL13的克隆與表達(dá)分析[J]. 竇錦青,程龍軍,徐鳳華,張俊紅,童再康. 園藝學(xué)報(bào). 2015(07)
[2]植物開(kāi)花調(diào)控途徑[J]. 劉永平,楊靜,楊明峰. 生物工程學(xué)報(bào). 2015(11)
[3]亞精胺參與菊花花芽分化的調(diào)控研究[J]. 郭俊娥,李田,孫憲芝,孫霞,鄭成淑. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]低毒高效的植物石蠟切片方法[J]. 李鳳英,馬姜明,梁士楚,唐紹清,薛躍規(guī). 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[5]菊花毛刺的形態(tài)及顯微結(jié)構(gòu)[J]. 張婷,房偉民,蔣甲福,陳素梅,管志勇,廖園,陳發(fā)棣. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(01)
[6]水稻幼嫩根尖常規(guī)石蠟切片制作技術(shù)改良[J]. 張新梅,董曉英,沈仁芳. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(12)
[7]菊花花發(fā)育基因CmCO和CmFT的克隆與表達(dá)分析[J]. 田素波,林桂玉,鄭成淑,孫霞,任洪艷,溫立柱. 園藝學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]杏花芽石蠟切片方法的改良[J]. 帥煥麗,楊途熙,魏安智,王佳,李曉,張瑩. 果樹(shù)學(xué)報(bào). 2011(03)
[9]粳稻穎果石蠟切片中染色時(shí)間的摸索及其解剖結(jié)構(gòu)的觀察[J]. 于曉剛,張文忠,韓亞?wèn)|,李婧,徐海,趙明輝,高東昌,徐正進(jìn),陳溫福. 作物雜志. 2010(05)
[10]植物Dof轉(zhuǎn)錄因子[J]. 楊靜,沈世華. 植物生理學(xué)通訊. 2010(03)
碩士論文
[1]不同品種薹用大蒜花芽分化過(guò)程的形態(tài)解剖及部分生理生化特性研究[D]. 郭菊葉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3469445
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