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魔芋耐熱性鑒定及熱激蛋白HSP基因的克隆與初步分析

發(fā)布時(shí)間:2021-10-25 13:57
  魔芋(Amorphophallus rivieri)喜溫不耐熱,高溫是影響其產(chǎn)量和品質(zhì)的主要非生物脅迫因素之一。在我國(guó)西南主要魔芋種植區(qū)域,特別是川渝芋區(qū),周期性的熱害常有發(fā)生,因此,篩選耐熱種質(zhì)資源、選育耐熱新品種尤為重要。種質(zhì)材料的耐熱性鑒定是魔芋耐熱育種的基礎(chǔ),然而目前我們對(duì)魔芋耐熱的生理機(jī)制、分子機(jī)制及互作調(diào)控機(jī)理的細(xì)節(jié)知之甚少。本研究根據(jù)前人對(duì)魔芋田間農(nóng)藝性狀的觀察結(jié)果,選取耐熱性差異明顯的3個(gè)魔芋種為實(shí)驗(yàn)材料,分別從生理生化和分子生物學(xué)兩方面研究了魔芋耐熱的生理基礎(chǔ)與調(diào)控機(jī)制,以期為進(jìn)一步研究魔芋耐熱因子表達(dá)調(diào)控和功能分析奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)以耐熱性明顯不同的白魔芋(Amorphophallus albus,Aa)、花魔芋(Amorphophallus konjac,Ak)和珠芽魔芋(Amorphophallus bulbifer,Ab)為試材。通過(guò)測(cè)定43℃高溫脅迫下葉片生理生化指標(biāo)含量的變化、觀察葉片微觀組織結(jié)構(gòu)以及統(tǒng)計(jì)熱害指數(shù)的變化,掌握了高溫脅迫下3種魔芋試材主要耐熱指標(biāo)的變化規(guī)律,明確了不同魔芋種耐熱性強(qiáng)弱以及篩選能有效反映魔芋耐熱性差異的指標(biāo),探討了魔芋耐熱的生理機(jī)... 

【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 魔芋概況
    1.2 植物耐熱性鑒定研究進(jìn)展
        1.2.1 形態(tài)特征指標(biāo)
        1.2.2 生理生化指標(biāo)
        1.2.3 熱激蛋白指標(biāo)
第二章 引言
第三章 不同魔芋種質(zhì)的耐熱性鑒定
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.2.1 高溫脅迫對(duì)魔芋葉片生理生化特性的影響
        3.2.2 高溫脅迫對(duì)魔芋微觀組織結(jié)構(gòu)的影響
        3.2.3 高溫脅迫對(duì)魔芋生長(zhǎng)發(fā)育形態(tài)的影響
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 生理生化指標(biāo)測(cè)定
        3.3.2 微觀組織結(jié)構(gòu)觀察
        3.3.3 熱害指數(shù)測(cè)定
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 高溫脅迫對(duì)魔芋生理生化特性的影響
        3.4.2 高溫脅迫對(duì)不同魔芋微觀組織結(jié)構(gòu)的影響
        3.4.3 高溫脅迫對(duì)不同魔芋熱害癥狀的影響
    3.5 討論
第四章 魔芋熱激蛋白HSP基因的克隆與半定量分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 植物材料的處理
        4.2.2 葉片gDNA提取
        4.2.3 葉片總RNA提取
        4.2.4 cDNA第一鏈合成
        4.2.5 引物設(shè)計(jì)
        4.2.6 目的片段PCR擴(kuò)增
        4.2.7 PCR產(chǎn)物回收
        4.2.8 目的片段的連接、轉(zhuǎn)化
        4.2.9 生物信息學(xué)分析
        4.2.10 各基因半定量RT-PCR分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 魔芋葉片gDNA的提取
        4.3.2 魔芋葉片總RNA的提取
        4.3.3 魔芋sHSP基因的克隆與序列分析
        4.3.4 魔芋HSP70基因的克隆與序列分析
        4.3.5 魔芋HSP90基因的克隆與序列分析
        4.3.6 半定量RT-PCR分析魔芋HSP基因表達(dá)特性
    4.4 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
在校期間發(fā)表的論文
在讀期間參加的科研項(xiàng)目


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]菠菜耐熱性的初步研究[D]. 沈丹婷.上海交通大學(xué) 2012
[3]不結(jié)球白菜耐熱性鑒定方法及其耐熱基因片段克隆研究[D]. 胡俏強(qiáng).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]不同耐高溫棉花葉片光合作用特性研究[D]. 賀彭毅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]辣椒耐熱生理生化特性及谷胱甘肽處理效應(yīng)研究[D]. 賈志銀.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[6]百合小熱激蛋白的克隆及初步分析[D]. 潘佳佳.蘭州大學(xué) 2010
[7]小麥耐熱性鑒定及熱激蛋白基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 陳小霞.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[8]菜豆耐熱生理生化特性及外源物質(zhì)處理效應(yīng)研究[D]. 呼彧.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[9]雙氫茉莉酸丙酯(PDJ)對(duì)不同品種小麥的抗逆性及化感抗草特性的誘導(dǎo)調(diào)控[D]. 支金虎.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007
[10]蘿卜耐熱性鑒定與熱激蛋白基因克隆[D]. 吳斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào):3457543

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