MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物中最大轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一,在細(xì)胞周期、生理代謝平衡、脅迫應(yīng)答等生命活動(dòng)中起著重要作用。前期研究結(jié)果表明軟核山楂果實(shí)中CpMYB5基因轉(zhuǎn)錄水平比硬核山楂中轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào),且CpMYB5與蘋(píng)果MdMYB5高度同源。由于山楂難以遺傳轉(zhuǎn)化,所以本研究首先揭示蘋(píng)果MdMYB5基因的功能,從而為今后揭示CpMYB5的功能奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.從‘GL-3’蘋(píng)果葉片cDNA中克隆得到MdMYB5基因編碼區(qū)全長(zhǎng)序列（1092 bp）,生物學(xué)分析發(fā)現(xiàn):蘋(píng)果MdMYB5與山楂及擬南芥的MYB轉(zhuǎn)錄因子親緣關(guān)系較近,屬于R2R3MYB類轉(zhuǎn)錄因子。2.對(duì)MdMYB5基因的啟動(dòng)子序列進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)具有MYB46轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別的特異序列M46RE和SMRE,通過(guò)EMSA及轉(zhuǎn)錄活性分析實(shí)驗(yàn)表明MdMYB46通過(guò)直接綁定MdMYB5啟動(dòng)子對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)錄調(diào)控。3.以植物表達(dá)載體pRI 101 AN為基礎(chǔ),將pKANNIBAL沉默載體中INTRON片段整合到pRI 101 AN載體上,構(gòu)建一種新的植物沉默載體pRNAi-E載體。構(gòu)建MdMYB5基因沉默載體pRNAi-E-MdMYB5,利用農(nóng)桿... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

‘GL-3’蘋(píng)果葉片總RNA電泳圖

3 結(jié)果與分析S 序列設(shè)計(jì)引物 MYB5-F/MYB5-R，以蘋(píng)果PCR 擴(kuò)增，得到一條約 1000 bp 的特異條帶，膠回收 PCR 產(chǎn)物，連接 pMD18-T 載體，CR 鑒定（圖 3），將陽(yáng)性克隆的菌落搖菌送果的MdMYB5基因CDS長(zhǎng)度為1098 bp，與B5 擴(kuò)增成功（圖 4）。

’蘋(píng)果的MdMYB5基因CDS長(zhǎng)度為1098dMYB5 擴(kuò)增成功（圖 4）。圖 2 MdMYB5 擴(kuò)增條帶：泳道 1–2：MdMYB5；泳道 M：DL2000 DNAmarFig.2 The electrophoretogram of MdMYB5Note: Line 1–2: MdMYB5; Line M: DL2000 DNA mark

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3387242