發(fā)布時(shí)間：2021-08-26 04:54

　　在不同的環(huán)境pH和Ca²⁺濃度培養(yǎng)條件下褐環(huán)粘蓋牛肝菌（Suillus luteus（L.:Fr.）Gray）的生長(zhǎng)代謝狀況有很大的差別,該菌的生長(zhǎng)適合偏酸性環(huán)境,最適生長(zhǎng)pH值較低,在超出其最適pH值的生長(zhǎng)條件下會(huì)分泌酸性物質(zhì)來調(diào)節(jié)環(huán)境pH,但是環(huán)境pH和Ca²⁺對(duì)其生長(zhǎng)狀況的影響還不是很清楚。本試驗(yàn)為了弄清環(huán)境pH和Ca²⁺影響該菌生長(zhǎng)的情況,研究了在不同pH值的液體培養(yǎng)條件下,測(cè)定了褐環(huán)粘蓋牛肝菌在生長(zhǎng)過程中分泌的草酸及蛋白的含量并檢測(cè)了菌絲在經(jīng)過不同pH值的液體培養(yǎng)后總DNA和RNA含量,記錄了將該菌轉(zhuǎn)接至不同濃度梯度的Ca²⁺培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)的直徑增長(zhǎng)變化。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn),不同的環(huán)境pH培養(yǎng)條件對(duì)該菌的生物量及草酸的分泌影響較大,圖像類似于二次型曲線。菌絲培養(yǎng)后液體培養(yǎng)基中草酸含量最高的pH值為8.0,DNA在pH值為5.0⁷.0范圍內(nèi)含量較高,鮮菌絲中RNA含量在低pH值條件下相對(duì)較高。菌落隨著Ca²⁺濃度的遞增其生長(zhǎng)趨勢(shì)也逐漸變快,菌落直徑在C... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別取培養(yǎng)菌絲后液體培養(yǎng)基各 1mL，再加入 coomassie brilliant blue-G250 溶液5mL，混勻后放置 5min 顯色，測(cè)定其在波長(zhǎng)為 595nm 下的吸光值。需要注意顯色的時(shí)間，顯色 5 分鐘保證 coomassie brilliant blue-G250 與待測(cè)液中的蛋白質(zhì)充分反應(yīng)，30min 之內(nèi)測(cè)定完所有樣品，因?yàn)檫@段時(shí)間內(nèi)顏色比較穩(wěn)定。液體培養(yǎng)基的草酸含量測(cè)定測(cè)定草酸的方法參考李天瑞等鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液草酸檢驗(yàn)體系[55]。首先繪制草酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，用草酸鈉配制濃度為 2mg/mL 的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，三氯化鐵配制濃度為 0.5mg/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制含 0.5%的磺基水楊酸溶液，存放時(shí)注意避光，然后稱取 3.728g氯化鉀加入 230mL 蒸餾水?dāng)嚢杈鶆�，�?pH 值調(diào)至 2.0，定容 250mL 做為緩沖液使用。取 5 支 50mL 容量瓶，分別按次序加入鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 2mL、緩沖液 20mL、磺基水楊酸溶液 1.2mL,然后 5 支試管再分別依次加入草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.8mL，最后將所有容量瓶定容至 50mL 混勻靜置顯色 30min。用 T6 新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì)檢測(cè)其吸光值，蒸餾水作為參比液，波長(zhǎng)設(shè)置為 510nm。結(jié)果如圖：2.3.4

圖 3 不同 pH 培養(yǎng)條件對(duì)菌絲生物量的影響Fig.3 The influence of different pH on mycelium biomass在初始環(huán)境 pH 不同的條件下每天連續(xù)更換新液體培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng) 4d 后，菌絲生物量受 pH 的影響如圖 3。由圖可見 pH 值在 5.0 和 6.0 時(shí)形成波峰，pH 5.0 略高于6.0 但是差異相當(dāng)微小，所以菌絲量為最大，說明褐環(huán)粘蓋牛肝菌在環(huán)境 pH 值范圍在 5.0～6.0 之間生長(zhǎng)最為旺盛，其中 pH 5.0 和 6.0 為其最適生長(zhǎng)環(huán)境 pH。雖然在該范圍內(nèi) pH 值為 5.5 時(shí)出現(xiàn)一個(gè)微幅的下降，但菌絲量還是遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于這個(gè)范圍外的其他 pH 值。在環(huán)境 pH 值為 3.0～4.5 范圍內(nèi),圖像斜率幾乎沒有變化，呈緩慢上升趨勢(shì)，說明菌絲在該范圍內(nèi)可以正常生長(zhǎng)，并沒有受到嚴(yán)重的外環(huán)境脅迫。在培養(yǎng)基 pH 值在 6.0～7.0 時(shí)，可以看出線性圖像大幅度下降，斜率由正直接變?yōu)樨?fù)，推斷在該 pH值范圍內(nèi)，褐環(huán)粘蓋牛肝菌菌絲雖然還有生長(zhǎng)但是因?yàn)?pH 的升高菌絲量極劇下降。當(dāng)環(huán)境 pH 值高于 7.0 時(shí)，圖像線條基本與坐標(biāo)軸平行，說明菌絲生物量未產(chǎn)生變化。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3363586