在不同的環(huán)境pH和Ca²⁺濃度培養(yǎng)條件下褐環(huán)粘蓋牛肝菌（Suillus luteus（L.:Fr.）Gray）的生長代謝狀況有很大的差別,該菌的生長適合偏酸性環(huán)境,最適生長pH值較低,在超出其最適pH值的生長條件下會分泌酸性物質來調節(jié)環(huán)境pH,但是環(huán)境pH和Ca²⁺對其生長狀況的影響還不是很清楚。本試驗為了弄清環(huán)境pH和Ca²⁺影響該菌生長的情況,研究了在不同pH值的液體培養(yǎng)條件下,測定了褐環(huán)粘蓋牛肝菌在生長過程中分泌的草酸及蛋白的含量并檢測了菌絲在經過不同pH值的液體培養(yǎng)后總DNA和RNA含量,記錄了將該菌轉接至不同濃度梯度的Ca²⁺培養(yǎng)基上菌落生長的直徑增長變化。經研究后發(fā)現(xiàn),不同的環(huán)境pH培養(yǎng)條件對該菌的生物量及草酸的分泌影響較大,圖像類似于二次型曲線。菌絲培養(yǎng)后液體培養(yǎng)基中草酸含量最高的pH值為8.0,DNA在pH值為5.0⁷.0范圍內含量較高,鮮菌絲中RNA含量在低pH值條件下相對較高。菌落隨著Ca²⁺濃度的遞增其生長趨勢也逐漸變快,菌落直徑在C... 

【文章來源】：內蒙古農業(yè)大學內蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白質標準曲線

分別取培養(yǎng)菌絲后液體培養(yǎng)基各 1mL，再加入 coomassie brilliant blue-G250 溶液5mL，混勻后放置 5min 顯色，測定其在波長為 595nm 下的吸光值。需要注意顯色的時間，顯色 5 分鐘保證 coomassie brilliant blue-G250 與待測液中的蛋白質充分反應，30min 之內測定完所有樣品，因為這段時間內顏色比較穩(wěn)定。液體培養(yǎng)基的草酸含量測定測定草酸的方法參考李天瑞等鐵標準溶液草酸檢驗體系[55]。首先繪制草酸標準曲線，用草酸鈉配制濃度為 2mg/mL 的草酸鈉標準溶液，三氯化鐵配制濃度為 0.5mg/mL的鐵標準溶液，配制含 0.5%的磺基水楊酸溶液，存放時注意避光，然后稱取 3.728g氯化鉀加入 230mL 蒸餾水攪拌均勻，將 pH 值調至 2.0，定容 250mL 做為緩沖液使用。取 5 支 50mL 容量瓶，分別按次序加入鐵標準溶液 2mL、緩沖液 20mL、磺基水楊酸溶液 1.2mL,然后 5 支試管再分別依次加入草酸鈉標準溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.8mL，最后將所有容量瓶定容至 50mL 混勻靜置顯色 30min。用 T6 新世紀紫外可見分光光度計檢測其吸光值，蒸餾水作為參比液，波長設置為 510nm。結果如圖：2.3.4

圖 3 不同 pH 培養(yǎng)條件對菌絲生物量的影響Fig.3 The influence of different pH on mycelium biomass在初始環(huán)境 pH 不同的條件下每天連續(xù)更換新液體培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng) 4d 后，菌絲生物量受 pH 的影響如圖 3。由圖可見 pH 值在 5.0 和 6.0 時形成波峰，pH 5.0 略高于6.0 但是差異相當微小，所以菌絲量為最大，說明褐環(huán)粘蓋牛肝菌在環(huán)境 pH 值范圍在 5.0～6.0 之間生長最為旺盛，其中 pH 5.0 和 6.0 為其最適生長環(huán)境 pH。雖然在該范圍內 pH 值為 5.5 時出現(xiàn)一個微幅的下降，但菌絲量還是遠遠高于這個范圍外的其他 pH 值。在環(huán)境 pH 值為 3.0～4.5 范圍內,圖像斜率幾乎沒有變化，呈緩慢上升趨勢，說明菌絲在該范圍內可以正常生長，并沒有受到嚴重的外環(huán)境脅迫。在培養(yǎng)基 pH 值在 6.0～7.0 時，可以看出線性圖像大幅度下降，斜率由正直接變?yōu)樨�，推斷在�?pH值范圍內，褐環(huán)粘蓋牛肝菌菌絲雖然還有生長但是因為 pH 的升高菌絲量極劇下降。當環(huán)境 pH 值高于 7.0 時，圖像線條基本與坐標軸平行，說明菌絲生物量未產生變化。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]褐環(huán)粘蓋牛肝菌草酸分泌及其代謝途徑的研究[D]. 李國光.內蒙古農業(yè)大學 2012
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本文編號：3363586