鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆防御反應(yīng)中的作用
發(fā)布時(shí)間:2021-08-05 01:06
蟲害誘導(dǎo)的植物防御反應(yīng)是昆蟲—寄主植物互作機(jī)理的重要內(nèi)容,且隨著植物抗性機(jī)制的逐步揭示,越來(lái)越多的科研工作者們已試圖從植物自身的抗性機(jī)制出發(fā)來(lái)尋求新的防治蟲害的思路。纓翅目害蟲西花薊馬作為全球最重要的農(nóng)業(yè)害蟲之一,其取食產(chǎn)卵傷害及傳毒特性已給全世界的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大損失。本研究以西花薊馬—菜豆作為研究體系,外施鈣素(CaCl2)及Ca2+抑制劑[EGTA(乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸)和LaCl3(氯化鑭)]為重要研究方法,分別從生化水平(植物內(nèi)源激素含量及酶活力測(cè)定)和分子水平上(植物防御基因表達(dá)量)研究了西花薊馬取食對(duì)菜豆植株茉莉酸信號(hào)途徑和水楊酸信號(hào)途徑關(guān)鍵信號(hào)分子(茉莉酸JA和水楊酸SA)含量,關(guān)鍵防御酶(脂氧合酶LOX、丙二烯氧化酶合成酶AOS、苯丙氨酸解氨酶PAL及β-1,3葡聚糖酶)活力及防御基因(脂氧合酶基因LOX,丙二烯氧化酶合成酶基因AOS,苯丙氨酸解氨酶基因PAL,β-1,3葡聚糖酶基因PR-2)轉(zhuǎn)錄水平的變化。確定了菜豆體內(nèi)的茉莉酸信號(hào)途徑和水楊酸信號(hào)途徑對(duì)西花薊馬取食脅迫的響應(yīng)機(jī)制以及Ca<...
【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言
1.1 西花薊馬簡(jiǎn)介
1.2 植物的誘導(dǎo)抗性
1.3 Ca~(2+)在植物誘導(dǎo)防御反應(yīng)中的第二信使功能
1.4 菜豆誘導(dǎo)防御機(jī)制研究進(jìn)展
1.5 研究目的和意義
第二章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆防御酶活性中的作用
2.1 材料與方法
2.1.1 供試?yán)ハx
2.1.2 供試植物
2.1.3 試驗(yàn)處理和組合
2.1.4 主要儀器及試劑
2.1.5 防御酶活性的測(cè)定
2.1.5.1 LOX活性的測(cè)定
2.1.5.2 AOS活性的測(cè)定
2.1.5.3 PAL活性的測(cè)定
2.1.5.4 PR-2 活性的測(cè)定
2.1.6 數(shù)據(jù)分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 菜豆葉片LOX酶活性的變化
2.2.2 菜豆葉片AOS酶活性的變化
2.2.3 菜豆葉片PAL酶活性的變化
2.2.4 菜豆葉片PR-2 酶活性的變化
2.3 結(jié)論與討論
第三章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆防御基因表達(dá)中的作用
3.1 材料與方法
3.1.1 供試?yán)ハx
3.1.2 供試植物
3.1.3 試驗(yàn)處理和組合
3.1.4 主要儀器及試劑
3.1.5 基因表達(dá)量的測(cè)定
3.1.5.1 葉片總RNA提取
3.1.5.2 總RNA純度的檢測(cè)
3.1.5.3 反轉(zhuǎn)錄第一鏈c DNA
3.1.5.4 引物的設(shè)計(jì)
3.1.5.5 RT-q PCR檢測(cè)
3.1.5.6 數(shù)據(jù)處理方法
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 菜豆葉片總RNA電泳圖
3.2.2 防御基因的熒光定量PCR擴(kuò)增分析
3.2.3 各基因的 RT-q PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物分析
3.2.4 防御基因表達(dá)量分析
3.2.4.1 防御基因LOX表達(dá)量分析
3.2.4.2 防御基因AOS表達(dá)量分析
3.2.4.3 防御基因PAL表達(dá)量分析
3.2.4.4 防御基因PR-2 表達(dá)量分析
3.3 結(jié)論與討論
3.3.1 薊馬取食對(duì)菜豆防御基因的誘導(dǎo)作用
3.3.2 鈣離子的胞內(nèi)流動(dòng)促使防御基因的表達(dá)
第四章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆內(nèi)源茉莉酸和水楊酸含量變化中的作用
4.1 材料與方法
4.1.1 供試?yán)ハx
4.1.2 供試植物
4.1.3 試驗(yàn)處理和組合
4.1.4 主要儀器及試劑
4.1.5 植物內(nèi)源SA和JA含量的測(cè)定
4.1.5.1 菜豆葉片內(nèi)源SA和JA的提取
4.1.5.2 茉莉酸甲酯( Me JA) 和水楊酸甲酯( Me SA)標(biāo)準(zhǔn)品的配置
4.1.5.3 SA和JA標(biāo)準(zhǔn)品的甲酯化
4.1.5.4 SA和JA回收率實(shí)驗(yàn)
4.1.5.5 GC條件
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 JA和SA的定性分析
4.2.2 MeJA和MeSA的標(biāo)準(zhǔn)曲線
4.2.3 JA和SA的回收率
4.2.4 菜豆葉片內(nèi)源JA和SA含量變化分析
4.2.4.1 菜豆葉片內(nèi)源JA含量分析
4.2.4.2 菜豆葉片內(nèi)源SA含量分析
4.3 結(jié)論與討論
4.3.1 薊馬取食誘導(dǎo)菜豆內(nèi)源激素JA和SA的合成
4.3.2 鈣離子促使菜豆內(nèi)源激素JA和SA的合成
4.3.3 JA和SA在植物細(xì)胞內(nèi)的合成途徑及其信號(hào)傳遞機(jī)制
第五章 全文總結(jié)
5.1 結(jié)論
5.2 討論
5.3 本文創(chuàng)新點(diǎn)
5.4 本文不足之處及今后研究方向
文獻(xiàn)綜述
1、植物的防御體系
2、環(huán)境脅迫下植物細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度的變化
3、Ca~(2+)在植物產(chǎn)生誘導(dǎo)防御抗性過程中的第二信使功能
3.1 Ca~(2+)信號(hào)與非生物脅迫
3.2 Ca~(2+)信號(hào)與病原微生物脅迫
3.3 Ca~(2+)信號(hào)與植食動(dòng)物脅迫
3.4 Ca~(2+)在植物防御信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的作用機(jī)制
展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
圖版
本文編號(hào):3322758
【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:76 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言
1.1 西花薊馬簡(jiǎn)介
1.2 植物的誘導(dǎo)抗性
1.3 Ca~(2+)在植物誘導(dǎo)防御反應(yīng)中的第二信使功能
1.4 菜豆誘導(dǎo)防御機(jī)制研究進(jìn)展
1.5 研究目的和意義
第二章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆防御酶活性中的作用
2.1 材料與方法
2.1.1 供試?yán)ハx
2.1.2 供試植物
2.1.3 試驗(yàn)處理和組合
2.1.4 主要儀器及試劑
2.1.5 防御酶活性的測(cè)定
2.1.5.1 LOX活性的測(cè)定
2.1.5.2 AOS活性的測(cè)定
2.1.5.3 PAL活性的測(cè)定
2.1.5.4 PR-2 活性的測(cè)定
2.1.6 數(shù)據(jù)分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 菜豆葉片LOX酶活性的變化
2.2.2 菜豆葉片AOS酶活性的變化
2.2.3 菜豆葉片PAL酶活性的變化
2.2.4 菜豆葉片PR-2 酶活性的變化
2.3 結(jié)論與討論
第三章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆防御基因表達(dá)中的作用
3.1 材料與方法
3.1.1 供試?yán)ハx
3.1.2 供試植物
3.1.3 試驗(yàn)處理和組合
3.1.4 主要儀器及試劑
3.1.5 基因表達(dá)量的測(cè)定
3.1.5.1 葉片總RNA提取
3.1.5.2 總RNA純度的檢測(cè)
3.1.5.3 反轉(zhuǎn)錄第一鏈c DNA
3.1.5.4 引物的設(shè)計(jì)
3.1.5.5 RT-q PCR檢測(cè)
3.1.5.6 數(shù)據(jù)處理方法
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 菜豆葉片總RNA電泳圖
3.2.2 防御基因的熒光定量PCR擴(kuò)增分析
3.2.3 各基因的 RT-q PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物分析
3.2.4 防御基因表達(dá)量分析
3.2.4.1 防御基因LOX表達(dá)量分析
3.2.4.2 防御基因AOS表達(dá)量分析
3.2.4.3 防御基因PAL表達(dá)量分析
3.2.4.4 防御基因PR-2 表達(dá)量分析
3.3 結(jié)論與討論
3.3.1 薊馬取食對(duì)菜豆防御基因的誘導(dǎo)作用
3.3.2 鈣離子的胞內(nèi)流動(dòng)促使防御基因的表達(dá)
第四章 鈣素在西花薊馬取食誘導(dǎo)菜豆內(nèi)源茉莉酸和水楊酸含量變化中的作用
4.1 材料與方法
4.1.1 供試?yán)ハx
4.1.2 供試植物
4.1.3 試驗(yàn)處理和組合
4.1.4 主要儀器及試劑
4.1.5 植物內(nèi)源SA和JA含量的測(cè)定
4.1.5.1 菜豆葉片內(nèi)源SA和JA的提取
4.1.5.2 茉莉酸甲酯( Me JA) 和水楊酸甲酯( Me SA)標(biāo)準(zhǔn)品的配置
4.1.5.3 SA和JA標(biāo)準(zhǔn)品的甲酯化
4.1.5.4 SA和JA回收率實(shí)驗(yàn)
4.1.5.5 GC條件
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 JA和SA的定性分析
4.2.2 MeJA和MeSA的標(biāo)準(zhǔn)曲線
4.2.3 JA和SA的回收率
4.2.4 菜豆葉片內(nèi)源JA和SA含量變化分析
4.2.4.1 菜豆葉片內(nèi)源JA含量分析
4.2.4.2 菜豆葉片內(nèi)源SA含量分析
4.3 結(jié)論與討論
4.3.1 薊馬取食誘導(dǎo)菜豆內(nèi)源激素JA和SA的合成
4.3.2 鈣離子促使菜豆內(nèi)源激素JA和SA的合成
4.3.3 JA和SA在植物細(xì)胞內(nèi)的合成途徑及其信號(hào)傳遞機(jī)制
第五章 全文總結(jié)
5.1 結(jié)論
5.2 討論
5.3 本文創(chuàng)新點(diǎn)
5.4 本文不足之處及今后研究方向
文獻(xiàn)綜述
1、植物的防御體系
2、環(huán)境脅迫下植物細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度的變化
3、Ca~(2+)在植物產(chǎn)生誘導(dǎo)防御抗性過程中的第二信使功能
3.1 Ca~(2+)信號(hào)與非生物脅迫
3.2 Ca~(2+)信號(hào)與病原微生物脅迫
3.3 Ca~(2+)信號(hào)與植食動(dòng)物脅迫
3.4 Ca~(2+)在植物防御信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的作用機(jī)制
展望
致謝
參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào):3322758
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