梅花（Prunus mume Sieb.et Zucc.）屬于薔薇科（Rosaceae）李屬（Prunus）的落葉小喬木,在園林應(yīng)用中具有十分重要的觀賞價值。梅花喜溫暖濕潤的氣候條件,在我國華北以及東北、西北的大部分地區(qū)很難安全露地越冬。通過遺傳轉(zhuǎn)化的方法能夠快速獲得符合人們意愿的新種質(zhì),而遺傳轉(zhuǎn)化的前提條件是完善再生體系。本研究主要以’雪梅’和’粉皮宮粉’雜交獲得的梅花成熟胚子葉為材料,探索適合成熟胚子葉再生的最適基本培養(yǎng)基、激素組合、激素濃度以及培養(yǎng)條件,在前人研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高梅花子葉再生率;同時以梅花未成熟胚子葉和成熟胚子葉為受體,將PmMYBs基因轉(zhuǎn)入梅花,獲得了梅花轉(zhuǎn)化植株。主要的研究成果如下:（1）成熟胚子葉再生體系的優(yōu)化根據(jù)前人對李屬植物子葉再生的研究狀況,探索誘導(dǎo)梅花成熟胚子葉再生的最適培養(yǎng)基。經(jīng)過比較激素TDZ、BA和IBA以及它們之間的交互作用,篩選出適合梅花成熟胚子葉再生的培養(yǎng)激素種類以及濃度組合,結(jié)果表明:以1/2 MS為基本培養(yǎng)基,在添加0.5 mg/L的BA、1.0 mg/L的TDZ和1.0 mg/L的IBA的培養(yǎng)基上可誘導(dǎo)子葉再生,添加500mg/L... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１成熟胚子葉不定芽發(fā)生部位??Ａ：培養(yǎng)３ｄ后，子葉近胚芽端膨大；Ｂ：培養(yǎng)１４ｄ后，從子葉近胚芽端形成不定芽

待成熟胚子葉發(fā)芽至〇．５ｃｍ左右，放在伸長培養(yǎng)基中培養(yǎng)３０ｄ的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，??在?１／２?ＭＳ＋ＢＡ?０．５?ｍｇ／Ｌ＋ＴＤＺ?１．０?ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ?１．０?ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ?５００?ｍｇ／Ｌ?中，開始再生苗??長勢較好，葉片翠綠，莖段正常增殖伸長，并沒有葉片黃化現(xiàn)象（圖２）。繼續(xù)在原??培養(yǎng)基中培養(yǎng)２０ｄ，葉片邊緣開始出現(xiàn)黃化，少部分再生苗出現(xiàn)莖尖枯萎現(xiàn)象，轉(zhuǎn)??移到培養(yǎng)基?ＱＬ＋ＢＡ?０．１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ?０．１?ｍｇ／Ｌ?生長較在?１／２?ＭＳ＋ＢＡ?０．５?ｍｇ／Ｌ＋ＴＤＺ１．０??ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ?１．０?ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ?５００?ｍｇ／Ｌ培養(yǎng)基中長勢有所改善

至丨Ｊ?９０．００％以上。將子葉轉(zhuǎn)到培養(yǎng)基?１／２?ＭＳ＋ＢＡ?２．０?ｍｇ／Ｌ＋ＴＤＺ?０．２?ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ?０．５??ｍｇ／Ｌ＋Ｃｅｆ３００ｍｇ／Ｌ＋Ｋｍ２０ｉｎｇ／Ｌ，經(jīng)過Ｋｍ篩選，７ｄ后，有部分子葉的誘導(dǎo)芽變?yōu)??白色，抗性芽在含有Ｋｍ的培養(yǎng)基上生長正常，葉片展開，顏色嫩綠（圖３），篩選??３０ｄ后，在所獲得的不定芽中８５．００％的芽已被篩死，統(tǒng)計所得到的抗性芽只有７６??株，抗性芽誘導(dǎo)率為０．７６％。??圖３從梅花未成熟胚子葉中誘導(dǎo)抗性芽??Ａ：經(jīng)過７ｄ的篩選，部分芽變?yōu)榘咨�；Ｂ：�?jīng)過３０ｄ的篩選，抗性芽在含有Ｋｍ的培養(yǎng)基上正常生長，葉片展??開。??Ｆｉｇ．３?Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｓｉｓｔａｎｔ?ｂｕｄｓ?ｆｒｏｍ?ｉｍｍａｔｕｒｅ?ｅｍｂｒｙｏ?ｃｏｔｙｌｅｄｏｎｓ??Ａ：?Ｐａｒｔｌｙ?ｂｕｄｓ?ｔｕｒｎｓ?ｗｈｉｔｅ?ａｆｔｅｒ?７ｄ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ?ｍｅｄｉｕｍ；?Ｂ：?ｒｅｓｉｓｔａｎｔ?ｂｕｄｓ?ｇｒｏｗｉｎｇ?ｎｏｒｍａｌｌｙ?ａｆｔｅｒ?３０ｄ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ??ｉｎ?ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ?ｍｅｄｉｕｍ?ａｎｄ?ｌｅａｖｅｓ?ｅｘｐｌａｎｄ．??３０??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3319185