外源水楊酸和氯化鈣對(duì)番茄抗旱性及差異基因表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-07-25 22:39
番茄的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,十分豐富。對(duì)于全世界而言,也是最重要的果蔬作物之一,在我國(guó)蔬菜產(chǎn)業(yè)中,也是地位超群。然而差不多所有的栽培番茄的品種,在全生育期,尤其是發(fā)芽期和幼苗期,都對(duì)干旱產(chǎn)生了不同程度的敏感。是以,在干旱脅迫時(shí),研究番茄的形態(tài)結(jié)構(gòu),測(cè)定其生理、生化指標(biāo),從分子的角度上分析其作用機(jī)理都是十分必要的。為解決干旱對(duì)番茄栽培生產(chǎn)等造成的影響,提供了重要的理論基礎(chǔ)和現(xiàn)實(shí)依據(jù)。但是目前關(guān)于番茄耐旱性的研究,基本都停留在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理生化指標(biāo)的分析上,對(duì)于分子層面上的,關(guān)于番茄抗旱的研究仍是比較少。本研究利用水楊酸、氯化鈣調(diào)節(jié)植物對(duì)于干旱脅迫的響應(yīng),通過(guò)外施水楊酸、氯化鈣,研究觀察番茄幼苗的表型結(jié)構(gòu),測(cè)定分析生理生化的指標(biāo),對(duì)干旱脅迫下的番茄幼苗進(jìn)行最適抗旱濃度的篩選。同時(shí)利用cDNA-AFLP技術(shù)研究干旱脅迫下最佳濃度的水楊酸、氯化鈣誘導(dǎo)番茄幼苗發(fā)育過(guò)程中的差異表達(dá)基因,并在此基礎(chǔ)上對(duì)差異片段進(jìn)行分離、測(cè)序分析,以期從分子水平闡明外源水楊酸和氯化鈣在加強(qiáng)番茄抗旱應(yīng)答過(guò)程中的作用,為深入了解番茄抗旱的應(yīng)答機(jī)制奠定基礎(chǔ),為番茄高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)栽培提供科學(xué)理論依據(jù),主要研究結(jié)果有:(1)采用適當(dāng)濃度的SA...
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 試驗(yàn)研究的目的與意義
1.2 國(guó)內(nèi)外番茄抗旱的研究進(jìn)展
1.2.1 干旱對(duì)植物的影響
1.2.2 植物抗旱的適應(yīng)機(jī)制
1.2.3 水楊酸抗旱的研究進(jìn)展
1.2.4 氯化鈣抗旱的研究進(jìn)展
1.2.5 cDNA-AFLP技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用
1.3 技術(shù)路線
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料的準(zhǔn)備
2.1.2 主要儀器
2.1.3 試驗(yàn)試劑
2.1.4 分子試驗(yàn)所需引物
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 試驗(yàn)材料的處理
2.2.2 生理指標(biāo)的測(cè)定
2.2.3 生理指標(biāo)數(shù)據(jù)處理并篩選最佳濃度及關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)
2.2.4 番茄葉片總RNA的提取及鑒定
2.2.5 cDNA雙鏈的合成
2.2.6 cDNA的酶切與接頭連接
2.2.7 cDNA-AFLP預(yù)擴(kuò)增
2.2.8 cDNA-AFLP選擇性擴(kuò)增
2.2.9 聚丙烯酰氨凝膠電泳
2.2.10 差異條帶的回收
2.2.11 差異條帶的克隆
2.2.12 差異表達(dá)序列的生物信息學(xué)分析
2.2.13 差異表達(dá)序列的熒光定量PCR驗(yàn)證
3 結(jié)果與分析
3.1 生理指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果分析
3.1.1 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗相對(duì)含水量的影響
3.1.2 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量影響
3.1.3 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗葉綠素的影響
3.1.4 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗Pro和可溶性蛋白含量的影響
3.1.5 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗保護(hù)酶活性的影響
3.2 總RNA的提取
3.3 雙鏈cDNA的合成
3.4 預(yù)擴(kuò)增結(jié)果檢測(cè)
3.5 選擇性擴(kuò)增結(jié)果
3.6 聚丙烯酰胺凝膠差異片段的選擇
3.7 測(cè)序結(jié)果的比對(duì)
3.8 差異表達(dá)序列的熒光定量結(jié)果
4 討論
4.1 水分脅迫下水楊酸和氯化鈣對(duì)番茄幼苗抗旱性的影響
4.2 干旱時(shí)間點(diǎn)的確定
4.3 水分脅迫下水楊酸和氯化鈣對(duì)番茄幼苗抗旱差異表達(dá)基因的cDNA-AFLP分析
4.3.1 cDNA-AFLP的相關(guān)問(wèn)題
4.3.2 差異條帶的基因功能分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水楊酸對(duì)黃瓜幼苗生理的影響[J]. 王曉黎,崔世茂,郝敬虹,張志剛,尚慶茂. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(01)
[2]水楊酸浸種對(duì)高羊茅在干旱脅迫下萌發(fā)的影響[J]. 趙春旭,劉芳芳,趙韋,劉欣,柴琦,劉照輝. 草業(yè)科學(xué). 2011(11)
[3]植物細(xì)胞中鈣離子作用的研究進(jìn)展[J]. 張哲,宋水山,邊子睿,徐操. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(24)
[4]外源水楊酸對(duì)水分脅迫下小麥幼苗的影響[J]. 高小寬. 考試周刊. 2011(59)
[5]水分脅迫下水楊酸對(duì)大麥幼苗抗氧化能力的影響[J]. 孫歆,曾富春,胡攀. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(02)
[6]水楊酸在植物體內(nèi)的生理作用研究進(jìn)展[J]. 孟雪嬌,邸昆,丁國(guó)華. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(15)
[7]鈣離子在植物生理調(diào)節(jié)中的作用[J]. 馬琛,乙引,張習(xí)敏,高巍. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(02)
[8]外源水楊酸對(duì)水分脅迫下小麥幼苗根莖生長(zhǎng)的影響[J]. 魏秀儉,王珍. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(01)
[9]干旱脅迫下水楊酸對(duì)紅肉臍橙幼苗生理生化特性的影響[J]. 陸云梅,黃仁華,夏仁學(xué). 綿陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(08)
[10]水楊酸對(duì)休眠期茶樹(shù)光合作用和抗凍性的影響[J]. 楊恕玲,單守明,鞏傳銀,李朝陽(yáng),平吉成,張亞紅,王振平. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2009(15)
碩士論文
[1]水分脅迫下水楊酸對(duì)扁蓿豆生長(zhǎng)、光合生理及飼草產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[D]. 崔秀妹.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]cDNA-AFLP和CAPS技術(shù)分離瓣化型胡蘿卜雄性不育相關(guān)基因[D]. 于春霞.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[3]野生酸棗抗旱性研究[D]. 劉學(xué)師.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003
本文編號(hào):3302914
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 試驗(yàn)研究的目的與意義
1.2 國(guó)內(nèi)外番茄抗旱的研究進(jìn)展
1.2.1 干旱對(duì)植物的影響
1.2.2 植物抗旱的適應(yīng)機(jī)制
1.2.3 水楊酸抗旱的研究進(jìn)展
1.2.4 氯化鈣抗旱的研究進(jìn)展
1.2.5 cDNA-AFLP技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用
1.3 技術(shù)路線
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料的準(zhǔn)備
2.1.2 主要儀器
2.1.3 試驗(yàn)試劑
2.1.4 分子試驗(yàn)所需引物
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 試驗(yàn)材料的處理
2.2.2 生理指標(biāo)的測(cè)定
2.2.3 生理指標(biāo)數(shù)據(jù)處理并篩選最佳濃度及關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)
2.2.4 番茄葉片總RNA的提取及鑒定
2.2.5 cDNA雙鏈的合成
2.2.6 cDNA的酶切與接頭連接
2.2.7 cDNA-AFLP預(yù)擴(kuò)增
2.2.8 cDNA-AFLP選擇性擴(kuò)增
2.2.9 聚丙烯酰氨凝膠電泳
2.2.10 差異條帶的回收
2.2.11 差異條帶的克隆
2.2.12 差異表達(dá)序列的生物信息學(xué)分析
2.2.13 差異表達(dá)序列的熒光定量PCR驗(yàn)證
3 結(jié)果與分析
3.1 生理指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果分析
3.1.1 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗相對(duì)含水量的影響
3.1.2 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量影響
3.1.3 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗葉綠素的影響
3.1.4 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗Pro和可溶性蛋白含量的影響
3.1.5 SA和CaCl_2對(duì)干旱脅迫下番茄幼苗保護(hù)酶活性的影響
3.2 總RNA的提取
3.3 雙鏈cDNA的合成
3.4 預(yù)擴(kuò)增結(jié)果檢測(cè)
3.5 選擇性擴(kuò)增結(jié)果
3.6 聚丙烯酰胺凝膠差異片段的選擇
3.7 測(cè)序結(jié)果的比對(duì)
3.8 差異表達(dá)序列的熒光定量結(jié)果
4 討論
4.1 水分脅迫下水楊酸和氯化鈣對(duì)番茄幼苗抗旱性的影響
4.2 干旱時(shí)間點(diǎn)的確定
4.3 水分脅迫下水楊酸和氯化鈣對(duì)番茄幼苗抗旱差異表達(dá)基因的cDNA-AFLP分析
4.3.1 cDNA-AFLP的相關(guān)問(wèn)題
4.3.2 差異條帶的基因功能分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水楊酸對(duì)黃瓜幼苗生理的影響[J]. 王曉黎,崔世茂,郝敬虹,張志剛,尚慶茂. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(01)
[2]水楊酸浸種對(duì)高羊茅在干旱脅迫下萌發(fā)的影響[J]. 趙春旭,劉芳芳,趙韋,劉欣,柴琦,劉照輝. 草業(yè)科學(xué). 2011(11)
[3]植物細(xì)胞中鈣離子作用的研究進(jìn)展[J]. 張哲,宋水山,邊子睿,徐操. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(24)
[4]外源水楊酸對(duì)水分脅迫下小麥幼苗的影響[J]. 高小寬. 考試周刊. 2011(59)
[5]水分脅迫下水楊酸對(duì)大麥幼苗抗氧化能力的影響[J]. 孫歆,曾富春,胡攀. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(02)
[6]水楊酸在植物體內(nèi)的生理作用研究進(jìn)展[J]. 孟雪嬌,邸昆,丁國(guó)華. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(15)
[7]鈣離子在植物生理調(diào)節(jié)中的作用[J]. 馬琛,乙引,張習(xí)敏,高巍. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(02)
[8]外源水楊酸對(duì)水分脅迫下小麥幼苗根莖生長(zhǎng)的影響[J]. 魏秀儉,王珍. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(01)
[9]干旱脅迫下水楊酸對(duì)紅肉臍橙幼苗生理生化特性的影響[J]. 陸云梅,黃仁華,夏仁學(xué). 綿陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(08)
[10]水楊酸對(duì)休眠期茶樹(shù)光合作用和抗凍性的影響[J]. 楊恕玲,單守明,鞏傳銀,李朝陽(yáng),平吉成,張亞紅,王振平. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2009(15)
碩士論文
[1]水分脅迫下水楊酸對(duì)扁蓿豆生長(zhǎng)、光合生理及飼草產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[D]. 崔秀妹.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]cDNA-AFLP和CAPS技術(shù)分離瓣化型胡蘿卜雄性不育相關(guān)基因[D]. 于春霞.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[3]野生酸棗抗旱性研究[D]. 劉學(xué)師.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003
本文編號(hào):3302914
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