懸鉤子屬（Rubus L.）是薔薇科（Rosaceae）中的一個(gè)大屬,全世界已知750-1000種,其分布范圍廣泛。中國是懸鉤子屬植物的重要分布中心之一,現(xiàn)有懸鉤子屬植物201種98變種,其中特有種138種,包含于8組24個(gè)亞組,其野生樹莓資源極其豐富,很多種質(zhì)具有較大育種潛力。但長期以來樹莓所屬的懸鉤子屬分類和系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系還存在較大分歧,該屬植物種類多,變異大,且通過無融合生殖、雜交等產(chǎn)生大量多倍體,致使類群錯(cuò)綜復(fù)雜,很多種的分類和系統(tǒng)位置都存在異議,影響了對(duì)優(yōu)良野生樹莓種質(zhì)的育種利用。因此,本研究用懸鉤子屬107份材料試材,利用葉綠體DNA的非編碼區(qū)基因間隔區(qū)rpl20-rps12序列進(jìn)行測序分析,并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,探討中國懸鉤子屬植物的系統(tǒng)發(fā)育問題。主要的研究結(jié)果如下：1中國懸鉤子屬植物葉綠體基因rpl20-rps12序列特征。中國懸鉤子屬植物葉綠體基因rpl20-rps12序列為長度為772 bp。所測得的基因序列（外類群除外）組成C、 T、A、G平均含量分別為19.5%、36.1%、29.5%、14.9%,其A+T、C+G含量平均值分別為66.0%、34.0%,A+T含量明顯... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

部分樹碑樣品DNA電泳檢洲結(jié)果

采用改良的ＣＴＡＢ法提取懸鉤子屬植物基因組ＤＮＡ，電泳檢測如圖１所示。經(jīng)??核酸蛋白儀測定，基因組ＤＮＡ濃度約為５００？８００?ｎｇ？沖１，純度為〇ｍ６０／２８０＝ｌ．８￣２．０，??滿足ＤＮＡ序列擴(kuò)增要求。??圖１部分樹霉樣品ＤＮＡ電泳檢測結(jié)果??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ｓｏｍｅ?Ｒｕｂｕｓ?ｔａｘａ??３．２?７７？／２０－／７？５ｉ２序列擴(kuò)增及測序??本實(shí)驗(yàn)參照Ｈａｍ化ｏｍｔ８４堪用ｒｐ口０－ｒｐｓｌ２引物對(duì)所有試驗(yàn)材料的的２０－ＷＳ１２區(qū)域??進(jìn)行ＰＣ民擴(kuò)增。本實(shí)驗(yàn)的ＰＣＲ體系采用引物、ｄｃｆｆｌｂＯ、Ｍｉｘ和ＤＮＡ模板混合組成，??其中？０１管單管體系為２５曲由ｄｄＨ２〇８．５＾ｉｌ、Ｍｉｘｌ２．５｜ｉｋ正反引物伴］４１１１６［？１叫、??Ｐｒｉｍｅｒ民１叫）、模板ＤＮＡ２叫組成。得到如圖２所示的擴(kuò)增結(jié)果，圖中表現(xiàn)為條帶清??晰，無非特異性擴(kuò)增現(xiàn)象，則擴(kuò)增結(jié)果滿足測序要求。??

Ｃ＋Ｇ含量，表明如２０－ＷＳ１２序列的堿基組成有明顯的Ａ＋Ｔ含量偏向性，??ＤＡＭＢＥ分析表明，ｒｆＯＯ－巧ｓｌ２序列的轉(zhuǎn)換與顛換偏向比與Ｆ８４遺傳距離大致呈??線性關(guān)系（圖３），說明該序列在懸鉤子屬植物中變異未飽和，可用于系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)??建�；冢粒桑眠x擇的Ｗ／２０－ＷＳ１２最優(yōu)進(jìn)化模型為ＧＴＲ＋ｈＧ?（表２），這些參數(shù)估計(jì)??結(jié)果將直接用于ＭＬ和ＢＩ樹的模型參數(shù)設(shè)置。??〇’〇３２?Ｘ?Ｓ?轉(zhuǎn)換ｔｒａｎｓＵｉｏｎｓ．Ｔｓ??Ａ?■＇?巧巧Ｔｖ??０．０２７?－?ｍｍｍ?錢控（時(shí)換ｔｒ細(xì)ｓｉＵ〇ｎｓ＞Ｔｓ）?盧（知戶？??！。．＂６－??—??０．?０００＾＾－—：——．——ｉ——ｉ——．??０，００００?０．００％?０．０１?洗?０．０２９４?０．的９３?０．０４９１?０．０５朗??Ｆ８４?ｄｉｓｔａｎｃｅ??圖３?Ｗｌ２０－ｒ／ｗｌ２序列飽和性檢測結(jié)果??Ｆｉｇ．?３?Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ?ｓａ化ｒａｔｉｏｎ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?巧口０－／７７《１２??２０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[4]懸鉤子屬植物遺傳多樣性及其特異資源的篩選[D]. 王小蓉.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]四川30個(gè)茶樹栽培品種葉綠體基因組PCR-RFLP分析[D]. 李歡.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]懸鉤子屬6個(gè)野生種（變種）及10個(gè)栽培品種的細(xì)胞學(xué)研究[D]. 付華清.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]RAPD對(duì)樹莓栽培品種及插田泡（Rubus coreanus）類型的遺傳差異分析[D]. 李玲.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[4]峨眉山懸鉤子屬植物群落特征及資源利用評(píng)價(jià)[D]. 向麗.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[5]分子系統(tǒng)學(xué)分析平臺(tái)的建立和應(yīng)用[D]. 張?jiān)?中國科學(xué)院研究生院（植物研究所） 2004



本文編號(hào)：3284151