RNA沉默在植物抗病毒防御中扮演一個重要的作用。為了抵抗寄主防御,植物病毒編碼病毒RNA沉默抑制子錨定RNA沉默途徑中的不同效應(yīng)分子。草莓鑲脈病毒（SVBV）P6基因編碼一個涉及病毒RNA轉(zhuǎn)運、寄主癥狀確定、抑制RNA沉默和內(nèi)含體形成的多功能蛋白。本研究利用16c本氏煙共浸潤系統(tǒng)確定了SVBV編碼的P6蛋白是唯一的沉默抑制子。P6蛋白可抑制單鏈GFP（S-PTGS）誘發(fā)的沉默,而不能抑制雙鏈GFP（IR-PTGS）誘發(fā)的沉默。缺失突變分析證明,P6蛋白核定位信號（NLS）影響沉默效應(yīng)。此外,進(jìn)一步研究說明P6蛋白既不能回復(fù)TRV介導(dǎo)的內(nèi)源基因PDS的系統(tǒng)沉默,也不能抑制TRV介導(dǎo)的內(nèi)源基因PDS/Su的系統(tǒng)沉默。1.P6蛋白是SVBV編碼的唯一的沉默抑制子為了證明SVBV編碼的蛋白參與了RNA沉默抑制,我們利用基于轉(zhuǎn)GFP基因的16c本氏煙的瞬時沉默抑制體系,表明僅P6能抑制GFP誘發(fā)的局部沉默。紫外燈下觀察共浸潤6天后的浸潤區(qū),發(fā)現(xiàn)有明顯的綠色熒光,Northern blot和Western blot分析發(fā)現(xiàn),P6和GFP共浸潤16c本氏煙6天后,GFP相應(yīng)的m RNA和蛋白的積累量... 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SVBV基因組結(jié)構(gòu)

圖 1-2 擬南芥的抗病毒RNA沉默機制Fig. 1-2 Mechanism of antiviral silencing in Arabidopsis2.2 sRNA 介導(dǎo)的抗病毒免疫viRNAs來源于（+）ssRNAs病毒，由長的dsRNAs復(fù)制中間體加工生成（圖

圖 1-4 植物抗病毒沉默和病毒編碼沉默抑制子抑制作用的模型Fig. 1-4 Current model of antiviral RNAsilencing in plants and its suppressionby virus-encoded silencing suppressors


本文編號：3274637