克隆了‘津田蕪菁’（Brassica rapa subsp. rapifera‘Tsuda’）通用調節(jié)因子14-3-3基因cDNA序列,命名為Br14-3-3（GenBank登錄號為MK896872）。該基因全長1 113 bp,開放閱讀框全長774 bp,編碼含有257個氨基酸的多肽。熒光定量PCR分析Br14-3-3在‘津田蕪菁’不同組織中及其在溫度、脫水、滲透、ABA和無機鹽等非生物脅迫下幼苗中的表達,結果表明該基因在‘津田蕪菁’的花中表達量最高,幼苗中次之;低溫抑制了Br14-3-3的表達,其他非生物脅迫可誘導該基因表達,暗示Br14-3-3在非生物脅迫應答中發(fā)揮功能。 

【文章來源】：園藝學報. 2020,47(07)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

‘津田蕪菁’Br14-3-3基因核苷酸序列及其推導的氨基酸序列

將Br14-3-3氨基酸序列與甘藍型油菜（XP＿022552879.1）、蘿卜（XP＿018445950.1）、甘藍（XP＿013637375.1）、擬南芥（XP＿020872859.1）、山崳菜（ADO95303.1）、毛果楊（XP＿002307363.1）、辣椒（PHT64945.1）、中國南瓜（XP＿022940234.1）、葡萄（NP＿001267852.1和40495.1）、麝香百合（AAF05737.1）、大豆（AAN03475.1）、蘋果（NP＿001280837.1）、沙梨（AHB33318.1）、鐵皮石斛（XP＿020699256.1）、蓖麻（XP＿002513956.1）、玉米（NP＿001131998.1）中同源蛋白的氨基酸序列利用MEGA5.0軟件，依照鄰位相接法（Neighbor-joining）構建系統(tǒng)進化樹（圖2）。結果表明，所有的雙子葉植物14-3-3蛋白聚為一支，兩個單子葉植物鐵皮石斛和玉米則聚為另一支。在所有雙子葉植物中十字花科甘藍型油菜、蘿卜、蕪菁、甘藍、擬南芥、山萮菜聚為一支，其中Br14-3-3與甘藍型油菜的同源蛋白親緣關系最近（圖2）。2.2 Br14-3-3的組織差異性表達

2.3溫度和脫水脅迫下Br14-3-3的表達如圖4所示：將‘津田蕪菁’幼苗進行4℃和37℃處理，Br14-3-3的表達趨勢不同：4℃條件下4 h內表達量持續(xù)下降，約為初始表達量的70%,8 h后略微回升；37℃條件下4 h內表達量持續(xù)增加，4 h時約為初始表達量的1.6倍，之后大幅度降低，8 h時幾乎和初始表達量相同（圖4,A），說明Br14-3-3基因參與溫度脅迫應答。室溫脫水處理的‘津田蕪菁’幼苗中，Br14-3-3的表達量在1 h內幾乎不變，2 h時顯著增加，4 h后降低（圖4,B），說明脫水處理能誘導Br14-3-3表達量上調。

【參考文獻】：
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