克隆了‘津田蕪菁’（Brassica rapa subsp. rapifera‘Tsuda’）通用調(diào)節(jié)因子14-3-3基因cDNA序列,命名為Br14-3-3（GenBank登錄號(hào)為MK896872）。該基因全長(zhǎng)1 113 bp,開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng)774 bp,編碼含有257個(gè)氨基酸的多肽。熒光定量PCR分析Br14-3-3在‘津田蕪菁’不同組織中及其在溫度、脫水、滲透、ABA和無(wú)機(jī)鹽等非生物脅迫下幼苗中的表達(dá),結(jié)果表明該基因在‘津田蕪菁’的花中表達(dá)量最高,幼苗中次之;低溫抑制了Br14-3-3的表達(dá),其他非生物脅迫可誘導(dǎo)該基因表達(dá),暗示Br14-3-3在非生物脅迫應(yīng)答中發(fā)揮功能。 

【文章來(lái)源】：園藝學(xué)報(bào). 2020,47(07)北大核心CSCD

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‘津田蕪菁’Br14-3-3基因核苷酸序列及其推導(dǎo)的氨基酸序列

將Br14-3-3氨基酸序列與甘藍(lán)型油菜（XP＿022552879.1）、蘿卜（XP＿018445950.1）、甘藍(lán)（XP＿013637375.1）、擬南芥（XP＿020872859.1）、山崳菜（ADO95303.1）、毛果楊（XP＿002307363.1）、辣椒（PHT64945.1）、中國(guó)南瓜（XP＿022940234.1）、葡萄（NP＿001267852.1和40495.1）、麝香百合（AAF05737.1）、大豆（AAN03475.1）、蘋果（NP＿001280837.1）、沙梨（AHB33318.1）、鐵皮石斛（XP＿020699256.1）、蓖麻（XP＿002513956.1）、玉米（NP＿001131998.1）中同源蛋白的氨基酸序列利用MEGA5.0軟件，依照鄰位相接法（Neighbor-joining）構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)（圖2）。結(jié)果表明，所有的雙子葉植物14-3-3蛋白聚為一支，兩個(gè)單子葉植物鐵皮石斛和玉米則聚為另一支。在所有雙子葉植物中十字花科甘藍(lán)型油菜、蘿卜、蕪菁、甘藍(lán)、擬南芥、山萮菜聚為一支，其中Br14-3-3與甘藍(lán)型油菜的同源蛋白親緣關(guān)系最近（圖2）。2.2 Br14-3-3的組織差異性表達(dá)

2.3溫度和脫水脅迫下Br14-3-3的表達(dá)如圖4所示：將‘津田蕪菁’幼苗進(jìn)行4℃和37℃處理，Br14-3-3的表達(dá)趨勢(shì)不同：4℃條件下4 h內(nèi)表達(dá)量持續(xù)下降，約為初始表達(dá)量的70%,8 h后略微回升；37℃條件下4 h內(nèi)表達(dá)量持續(xù)增加，4 h時(shí)約為初始表達(dá)量的1.6倍，之后大幅度降低，8 h時(shí)幾乎和初始表達(dá)量相同（圖4,A），說(shuō)明Br14-3-3基因參與溫度脅迫應(yīng)答。室溫脫水處理的‘津田蕪菁’幼苗中，Br14-3-3的表達(dá)量在1 h內(nèi)幾乎不變，2 h時(shí)顯著增加，4 h后降低（圖4,B），說(shuō)明脫水處理能誘導(dǎo)Br14-3-3表達(dá)量上調(diào)。

【參考文獻(xiàn)】：
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