葡萄風(fēng)信子（Muscari）是風(fēng)信子科葡萄風(fēng)信子屬的單子葉草本球根花卉,花為串鈴狀,花朵較小倒置,花期長,綠葉期也較長,是良好的林下地被與園林花卉,且適于切花和與盆栽觀賞,因此它具有較高的觀賞、生態(tài)、科研價(jià)值。在已知的40多個(gè)種和栽培品種中,花色除了少數(shù)白色突變體以外,都以單一的藍(lán)色為主,因此葡萄風(fēng)信子花色遺傳基礎(chǔ)簡單,這使它成為一種研究單子葉藍(lán)色花形成模式的典型材料。但是葡萄風(fēng)信子傳統(tǒng)的雜交育種人工去雄和授粉困難,而且從播種到實(shí)生苗開花至少需要3年的時(shí)間,這在一定程度上限制了對(duì)植物基因功能驗(yàn)證工作的進(jìn)展,從而阻礙了利用分子生物技術(shù)進(jìn)行花色育種的研究。本試驗(yàn)以葡萄風(fēng)信子 ‘亞美尼亞’和 ‘粉日出’為材料,建立了葡萄風(fēng)信子植株再生體系,確定了葡萄風(fēng)信子愈傷組織對(duì)卡那霉素和潮霉素的耐受力。并采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將T-DNA區(qū)攜帶GUS （β-）葡萄糖苷酸酶)和Hyg（潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶）選擇標(biāo)記基因的pCAMBIA1301載體轉(zhuǎn)化到葡萄風(fēng)信子,對(duì)其轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化,并用最佳條件轉(zhuǎn)化葡萄風(fēng)信子,獲得抗性植株。試驗(yàn)取得的主要結(jié)果如下：1.本研究探討了葡萄風(fēng)信子‘亞美尼亞’和‘粉日出’葉片分化愈傷組織... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 葡萄風(fēng)信子及其組織培養(yǎng)研究
        1.1.1 葡萄風(fēng)信子概述
        1.1.2 葡萄風(fēng)信子器官發(fā)生與植株再生
        1.1.3 葡萄風(fēng)信子體細(xì)胞胚發(fā)生研究進(jìn)展
        1.1.4 葡萄風(fēng)信子基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)的建立
    1.2 單子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.1 單子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化方法及其研究進(jìn)展
        1.2.2. 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的單子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化的影響因素及提高轉(zhuǎn)化率的方法
    1.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葡萄風(fēng)信子遺傳轉(zhuǎn)化的現(xiàn)狀
    1.4 目的和意義
    1.5 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
第二章 葡萄風(fēng)信子愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)建立
    2.1 材料和方法
        2.1.1 植物材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 葡萄風(fēng)信子遺傳轉(zhuǎn)化植株再生體系建立
        2.2.2 葡萄風(fēng)信子愈傷組織對(duì)不同抗生素的敏感性試驗(yàn)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 葡萄風(fēng)信子遺傳轉(zhuǎn)化植株再生體系建立
        2.3.2 葡萄風(fēng)信子愈傷組織對(duì)不同抗生素的敏感性試驗(yàn)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 葡萄風(fēng)信子愈傷組織轉(zhuǎn)化條件優(yōu)化的研究
    3.1 材料和方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 菌株和載體
    3.2 試劑和儀器
        3.2.1 主要試劑
        3.2.2 主要儀器
    3.3 方法
        3.3.1 農(nóng)桿菌菌液制備
        3.3.2 轉(zhuǎn)化及侵染
        3.3.3 葡萄風(fēng)信子轉(zhuǎn)化愈傷組織的GUS組織化學(xué)檢測
    3.4 影響葡萄風(fēng)信子遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素
        3.4.1 菌液濃度對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.4.2 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.4.3 侵染時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.4.4 超聲波預(yù)處理時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
    3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法
    3.6 結(jié)果與分析
        3.6.1 農(nóng)桿菌菌液濃度遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.6.2 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.6.3 侵染時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
        3.6.4 超聲波預(yù)處理時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
    3.7. 討論
    3.8 小結(jié)
第四章 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葡萄風(fēng)信子愈傷組織的轉(zhuǎn)化
    4.1 材料和方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌株和載體
    4.2 試劑和儀器
        4.2.1 主要試劑
        4.2.2 主要儀器
    4.3 方法
        4.3.1 農(nóng)桿菌菌液制備
        4.3.2 轉(zhuǎn)化及侵染
        4.3.3 脫菌和篩選培養(yǎng)
    4.4 轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測
        4.4.1 GUS組織化學(xué)分析
        4.4.2 葡萄風(fēng)信子基因組DNA的提取(CTAB法)
        4.4.3 轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測
    4.5 結(jié)果與分析
        4.5.1 GUS組織化學(xué)染色
        4.5.2 轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測
    4.6 討論
    4.7 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的墨蘭遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 謝利,王芬,曾瑞珍,郭和蓉,周玉亮,張志勝.  生物工程學(xué)報(bào). 2015(04)
[2]葡萄風(fēng)信子體細(xì)胞胚再生體系的建立及抗生素敏感性試驗(yàn)[J]. 楊鳳美,王飛,張雯,酒立君,羅靜,吳楠,吳恒.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(06)
[3]超聲波輔助農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化OT百合‘羅賓娜’的研究[J]. 王嵐,劉雅莉,婁倩,田菲菲.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(06)
[4]提高植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化效率輔助策略研究進(jìn)展[J]. 葉興國,王新敏,王軻,杜麗璞,林志珊,徐惠君.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(15)
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的唐菖蒲遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[J]. 張自由,連青龍,辛海波,鐘雄輝,羅弦,義鳴放.  中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(06)
[6]植物體細(xì)胞胚發(fā)生的研究進(jìn)展[J]. 潘曉,徐春香,陳厚彬.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2009(10)
[7]葡萄風(fēng)信子的研究進(jìn)展[J]. 王遠(yuǎn),羅鳳霞,沈健,魏哲虎,周魏魏.  金陵科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(04)
[8]負(fù)壓處理對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥成熟胚轉(zhuǎn)化效率的影響[J]. 畢瑞明.  生物技術(shù). 2008(01)
[9]葡萄風(fēng)信子基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)的建立[J]. 許勝,王飛,劉雅莉.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(10)
[10]葡萄風(fēng)信子[J]. 蔡曾煜.  中國花卉盆景. 2007(06)

碩士論文
[1]葡萄風(fēng)信子植株再生體系研究[D]. 何旭東.南京林業(yè)大學(xué) 2007
[2]花色基因Delila轉(zhuǎn)化葡萄風(fēng)信子的研究[D]. 許勝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3259117