柑橘葉表細菌種群結(jié)構(gòu)與潰瘍病的關(guān)聯(lián)研究
發(fā)布時間:2021-06-29 18:37
柑橘潰瘍病是一種世界性的植物檢疫病害,發(fā)病后在葉、枝和果上形成火山口狀病斑,影響果實外觀,嚴(yán)重時造成落葉落果,影響果樹長勢、柑橘產(chǎn)量和品質(zhì),造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。柑橘潰瘍病的發(fā)生除了與品種抗性、田間管理和防治措施等因素密切相關(guān)外,還與葉際微生物種群結(jié)構(gòu)及其多樣性有一定的關(guān)系。而柑橘潰瘍病病葉與未發(fā)病葉片葉表細菌種群結(jié)構(gòu)的差異,以及葉際微生物與潰瘍病菌種群數(shù)量變化之間的相關(guān)分析一直鮮見報道。因此,本文以患潰瘍病的冰糖橙植株為研究對象,采用基于16s rDNA的V3-V4可變區(qū)的Miseq測序技術(shù)和熒光定量PCR(qPCR),比較分析發(fā)病與未發(fā)病冰糖橙葉表細菌種群結(jié)構(gòu)、數(shù)量以及葉際細菌與柑橘潰瘍病菌種群數(shù)量及發(fā)病情況的關(guān)系;分析討論潰瘍病潰瘍病菌發(fā)病對冰糖橙葉際細菌種群結(jié)構(gòu)和組成的影響以及發(fā)生過程中可能的協(xié)同或拮抗菌群。具體研究結(jié)果如下:(1)病葉葉表細菌Miseq高通量測序的數(shù)據(jù)量多于未發(fā)病葉片樣品。通過Miseq平臺測序和后續(xù)生物信息學(xué)分析,總共從20個樣品中獲得了390,929條Tags,平均每個樣品19,546.45條tags。其中未發(fā)病葉片葉表總序列有187,012條tags,平均...
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
1.1 葉際微生物
1.1.1 葉際微生物群落組成
1.1.2 葉際微生物的特點
1.1.3 葉際微生物與外界的互作
1.1.4 影響葉際微生物種群多樣性的因素
1.2 柑橘潰瘍病
1.3 基于免培養(yǎng)法的微生物多樣性研究進展
1.4 本論文的研究目的與意義
2 冰糖橙葉表細菌多樣性分析
2.1 試驗材料
2.1.1 供試材料
2.1.2 本研究采用的試劑盒及常用試劑
2.1.3 儀器設(shè)備
2.2 試驗方法
2.2.1 葉表微生物宏基因組DNA的提取
2.2.2 葉表微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
2.2.3 建立文庫與測序
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 葉表面微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
2.3.2 葉表細菌的Miseq測序與分析
2.4 討論
2.4.1 高通量測序及數(shù)據(jù)處理
2.4.2 葉表細菌物種及其豐度分析
3 柑橘潰瘍病菌種群豐度與發(fā)病的關(guān)聯(lián)分析
3.1 試驗材料
3.1.1 樣品來源
3.1.2 儀器設(shè)備
3.2 試驗方法
3.2.1 柑橘潰瘍病的分離和鑒定
3.2.2 潰瘍病發(fā)病情指數(shù)調(diào)查
3.2.3 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
3.2.4 一些葉表細菌群落與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 菌種分離和保存
3.3.2 潰瘍病的鑒定
3.3.3 潰瘍病發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果
3.3.4 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
3.3.5 一些優(yōu)勢屬與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
3.4 討論
4 全文總結(jié)
4.1 主要結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點
4.3 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]三七疫霉病拮抗根際土壤細菌的篩選及初步鑒定[J]. 楊麗芬,楊建,高玲玲,郭建偉,洪亮,程加省,孔瓊,田學(xué)軍. 紅河學(xué)院學(xué)報. 2016(02)
[2]應(yīng)用Illumina MiSeq高通量測序技術(shù)分析玉米內(nèi)生細菌多樣性[J]. 陳澤斌,李冰,王定康,余磊,徐勝光,任禛,靳松,戴麗君. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
[3]5種表面活性劑對銅制劑防治冰糖橙潰瘍病效果的影響[J]. 李建揮,張浩琪,李娜,舒廣平,谷元洪,鄧子牛. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(05)
[4]高通量測序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才. 中國生物工程雜志. 2012(01)
[5]益生菌對腸道菌群的影響——以Lactobacillus casei Zhang研究為例[J]. 張家超,郭壯,孫志宏,陳衛(wèi),張和平. 中國食品學(xué)報. 2011(09)
[6]利用雙重PCR技術(shù)檢測柑橘潰瘍病菌[J]. 陳小帆,莫瑾,左靜,王象賢,王光鋒,彭梓,鐘文英,朱金國. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(03)
[7]熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用研究進展[J]. 郭楊,陳世界,郭萬柱,李璟. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2009(02)
[8]鞘氨醇單胞菌:降解芳香化合物的新型微生物資源[J]. 茍敏,曲媛媛,楊樺,周集體,李昂,關(guān)曉燕,艾芳芳. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2008(02)
[9]熒光定量PCR技術(shù)在環(huán)境微生物檢測中的應(yīng)用[J]. 左麗麗,劉永軍. 西安航空技術(shù)高等?茖W(xué)校學(xué)報. 2008(01)
[10]柑橘潰瘍病拮抗菌的分離篩選及其田間防效[J]. 張洪波,巢進,王躍強,王山,謝新文,肖啟明. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2007(05)
碩士論文
[1]中國四個地區(qū)人母乳中微生物多樣性研究[D]. 黃衛(wèi)強.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]高通量測序等分子生物學(xué)技術(shù)研究填埋場生物反應(yīng)器脫氮微生物群落變化[D]. 王潔.華東師范大學(xué) 2014
本文編號:3256948
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
1.1 葉際微生物
1.1.1 葉際微生物群落組成
1.1.2 葉際微生物的特點
1.1.3 葉際微生物與外界的互作
1.1.4 影響葉際微生物種群多樣性的因素
1.2 柑橘潰瘍病
1.3 基于免培養(yǎng)法的微生物多樣性研究進展
1.4 本論文的研究目的與意義
2 冰糖橙葉表細菌多樣性分析
2.1 試驗材料
2.1.1 供試材料
2.1.2 本研究采用的試劑盒及常用試劑
2.1.3 儀器設(shè)備
2.2 試驗方法
2.2.1 葉表微生物宏基因組DNA的提取
2.2.2 葉表微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
2.2.3 建立文庫與測序
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 葉表面微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
2.3.2 葉表細菌的Miseq測序與分析
2.4 討論
2.4.1 高通量測序及數(shù)據(jù)處理
2.4.2 葉表細菌物種及其豐度分析
3 柑橘潰瘍病菌種群豐度與發(fā)病的關(guān)聯(lián)分析
3.1 試驗材料
3.1.1 樣品來源
3.1.2 儀器設(shè)備
3.2 試驗方法
3.2.1 柑橘潰瘍病的分離和鑒定
3.2.2 潰瘍病發(fā)病情指數(shù)調(diào)查
3.2.3 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
3.2.4 一些葉表細菌群落與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 菌種分離和保存
3.3.2 潰瘍病的鑒定
3.3.3 潰瘍病發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果
3.3.4 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
3.3.5 一些優(yōu)勢屬與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
3.4 討論
4 全文總結(jié)
4.1 主要結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點
4.3 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]三七疫霉病拮抗根際土壤細菌的篩選及初步鑒定[J]. 楊麗芬,楊建,高玲玲,郭建偉,洪亮,程加省,孔瓊,田學(xué)軍. 紅河學(xué)院學(xué)報. 2016(02)
[2]應(yīng)用Illumina MiSeq高通量測序技術(shù)分析玉米內(nèi)生細菌多樣性[J]. 陳澤斌,李冰,王定康,余磊,徐勝光,任禛,靳松,戴麗君. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
[3]5種表面活性劑對銅制劑防治冰糖橙潰瘍病效果的影響[J]. 李建揮,張浩琪,李娜,舒廣平,谷元洪,鄧子牛. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(05)
[4]高通量測序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才. 中國生物工程雜志. 2012(01)
[5]益生菌對腸道菌群的影響——以Lactobacillus casei Zhang研究為例[J]. 張家超,郭壯,孫志宏,陳衛(wèi),張和平. 中國食品學(xué)報. 2011(09)
[6]利用雙重PCR技術(shù)檢測柑橘潰瘍病菌[J]. 陳小帆,莫瑾,左靜,王象賢,王光鋒,彭梓,鐘文英,朱金國. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2010(03)
[7]熒光定量PCR技術(shù)及其應(yīng)用研究進展[J]. 郭楊,陳世界,郭萬柱,李璟. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2009(02)
[8]鞘氨醇單胞菌:降解芳香化合物的新型微生物資源[J]. 茍敏,曲媛媛,楊樺,周集體,李昂,關(guān)曉燕,艾芳芳. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報. 2008(02)
[9]熒光定量PCR技術(shù)在環(huán)境微生物檢測中的應(yīng)用[J]. 左麗麗,劉永軍. 西安航空技術(shù)高等?茖W(xué)校學(xué)報. 2008(01)
[10]柑橘潰瘍病拮抗菌的分離篩選及其田間防效[J]. 張洪波,巢進,王躍強,王山,謝新文,肖啟明. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2007(05)
碩士論文
[1]中國四個地區(qū)人母乳中微生物多樣性研究[D]. 黃衛(wèi)強.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]高通量測序等分子生物學(xué)技術(shù)研究填埋場生物反應(yīng)器脫氮微生物群落變化[D]. 王潔.華東師范大學(xué) 2014
本文編號:3256948
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