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柑橘葉表細菌種群結(jié)構(gòu)與潰瘍病的關(guān)聯(lián)研究

發(fā)布時間:2021-06-29 18:37
  柑橘潰瘍病是一種世界性的植物檢疫病害,發(fā)病后在葉、枝和果上形成火山口狀病斑,影響果實外觀,嚴(yán)重時造成落葉落果,影響果樹長勢、柑橘產(chǎn)量和品質(zhì),造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。柑橘潰瘍病的發(fā)生除了與品種抗性、田間管理和防治措施等因素密切相關(guān)外,還與葉際微生物種群結(jié)構(gòu)及其多樣性有一定的關(guān)系。而柑橘潰瘍病病葉與未發(fā)病葉片葉表細菌種群結(jié)構(gòu)的差異,以及葉際微生物與潰瘍病菌種群數(shù)量變化之間的相關(guān)分析一直鮮見報道。因此,本文以患潰瘍病的冰糖橙植株為研究對象,采用基于16s rDNA的V3-V4可變區(qū)的Miseq測序技術(shù)和熒光定量PCR(qPCR),比較分析發(fā)病與未發(fā)病冰糖橙葉表細菌種群結(jié)構(gòu)、數(shù)量以及葉際細菌與柑橘潰瘍病菌種群數(shù)量及發(fā)病情況的關(guān)系;分析討論潰瘍病潰瘍病菌發(fā)病對冰糖橙葉際細菌種群結(jié)構(gòu)和組成的影響以及發(fā)生過程中可能的協(xié)同或拮抗菌群。具體研究結(jié)果如下:(1)病葉葉表細菌Miseq高通量測序的數(shù)據(jù)量多于未發(fā)病葉片樣品。通過Miseq平臺測序和后續(xù)生物信息學(xué)分析,總共從20個樣品中獲得了390,929條Tags,平均每個樣品19,546.45條tags。其中未發(fā)病葉片葉表總序列有187,012條tags,平均... 

【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 葉際微生物
        1.1.1 葉際微生物群落組成
        1.1.2 葉際微生物的特點
        1.1.3 葉際微生物與外界的互作
        1.1.4 影響葉際微生物種群多樣性的因素
    1.2 柑橘潰瘍病
    1.3 基于免培養(yǎng)法的微生物多樣性研究進展
    1.4 本論文的研究目的與意義
2 冰糖橙葉表細菌多樣性分析
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 本研究采用的試劑盒及常用試劑
        2.1.3 儀器設(shè)備
    2.2 試驗方法
        2.2.1 葉表微生物宏基因組DNA的提取
        2.2.2 葉表微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
        2.2.3 建立文庫與測序
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 葉表面微生物宏基因組DNA質(zhì)量檢測
        2.3.2 葉表細菌的Miseq測序與分析
    2.4 討論
        2.4.1 高通量測序及數(shù)據(jù)處理
        2.4.2 葉表細菌物種及其豐度分析
3 柑橘潰瘍病菌種群豐度與發(fā)病的關(guān)聯(lián)分析
    3.1 試驗材料
        3.1.1 樣品來源
        3.1.2 儀器設(shè)備
    3.2 試驗方法
        3.2.1 柑橘潰瘍病的分離和鑒定
        3.2.2 潰瘍病發(fā)病情指數(shù)調(diào)查
        3.2.3 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
        3.2.4 一些葉表細菌群落與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 菌種分離和保存
        3.3.2 潰瘍病的鑒定
        3.3.3 潰瘍病發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果
        3.3.4 柑橘潰瘍病菌種群豐度的相對定量分析
        3.3.5 一些優(yōu)勢屬與Xanthomonas種群豐度的關(guān)聯(lián)分析
    3.4 討論
4 全文總結(jié)
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點
    4.3 展望
參考文獻
致謝
作者簡歷


【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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本文編號:3256948

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