果皮顏色是決定蘋(píng)果市場(chǎng)價(jià)值的重要農(nóng)藝性狀。花青苷是決定蘋(píng)果果實(shí)著色的主要色素,其生理合成途徑受到許多外界因素的影響,如光照,溫度,激素等,尤其是Ultraviolet-B（UV-B）和溫度。UV-B通過(guò)刺激花青苷合成途徑中關(guān)鍵基因的表達(dá)來(lái)促進(jìn)花青苷的合成。低溫提高了蘋(píng)果果實(shí)的光敏感性,進(jìn)而促進(jìn)果實(shí)花青苷的積累,保護(hù)植物不受氧化和低溫傷害。而高溫抑制了花青素的合成和積累,最終抑制花青苷的合成。UV-B和溫度作為信號(hào)分子調(diào)控花青苷合成的研究比較多,在其通路中鑒定了很多關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子,但在果樹(shù)中UV-B作為信號(hào)分子與溫度相互作用調(diào)控花青苷合成的作用機(jī)制尚不清楚。B-box（BBX）蛋白是一類鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子,其結(jié)構(gòu)包含一個(gè)或兩個(gè)B-box結(jié)構(gòu)域。BBX蛋白在植物生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮著重要的作用。近些年來(lái),關(guān)于BBX蛋白的功能研究越來(lái)越深入。尤其是在植物光形態(tài)建成,控制開(kāi)花和響應(yīng)逆境脅迫等方面。BBX轉(zhuǎn)錄因子第Ⅳ亞家族有8個(gè)成員（BBX18-BBX25）,它們?cè)谥参锕庑螒B(tài)建成中的作用機(jī)制已被廣泛研究。其中BBX21和BBX22正調(diào)控光形態(tài)建成,BBX24負(fù)調(diào)控光形態(tài)建成。但是它們?cè)赨V-B... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

花青苷生物合成途徑Fig.2Anthocyaninsbiosynthesispathway

而在-UV-B條件下表達(dá)量最高（圖3-3）。這個(gè)結(jié)果表明UV-B促進(jìn)MdBBX20的 表 達(dá) ， 但 在 果 實(shí) 著 色 初 期 抑 制MdBBX24/25的 表 達(dá) 。 利 用MEGA5.1，將MdBBX20/24的同源基因與擬南芥上的BBX轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行了多序列比較并構(gòu)建了進(jìn)化樹(shù)（圖3-4）。進(jìn)化樹(shù)結(jié)果表明，MdBBX20/24均屬于第Ⅳ亞家族，因此推測(cè)MdBBX20/24在UV-B條件下調(diào)控蘋(píng)果果皮花青苷的合成，接下來(lái)我們對(duì)這兩個(gè)基因進(jìn)行了功能的挖掘和驗(yàn)證。圖3-3 BBX轉(zhuǎn)錄因子差異基因篩選Fig.3-3 Screening of differential genes of BBX transcription factor

共同孵育的洗脫液中檢測(cè)不到GST蛋白（圖3-8）。這進(jìn)一步驗(yàn)證了MdBBX20與MdHY5蛋白互作。圖3-8 Pull down實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證MdBBX20與MdHY5互作Fig.3-8 Interaction between MdBBX20 and MdHY5 validated by Pull down.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3250776