蓮籽蛋白質雙向電泳及穩(wěn)定性分析
發(fā)布時間:2021-06-03 17:52
蓮(Nelumbo nucifera Gaertn.)不僅是重要的水生蔬菜作物之一,而且蓮籽具有極端耐高溫特性,是基礎科學研究的好材料,因此,研究蓮籽具有較大的理論與應用價值。本研究采用四種植物組織蛋白質提取方法(新型TCA/丙酮法、改良tris-cl法、傳統(tǒng)TCA/丙酮法、tris-飽和酚法),并結合雙向電泳技術,進行蓮籽蛋白質提取方法的選擇與優(yōu)化。雙向電泳實驗結果表明,蛋白質圖譜與古蓮品種鐵蓮種籽的蛋白質組組成和分布特點一致。經過軟件PDQuest分析說明,新型TCA/丙酮法適合于子葉和胚芽蛋白質雙向電泳,而傳統(tǒng)TCA/丙酮法適合于胚軸蛋白質雙向電泳,這為進一步通過質譜技術研究古蓮籽蛋白質組打下良好基礎。通過對子葉蛋白質樣品進行10分鐘的不同溫度梯度處理,并進行雙向電泳分離蛋白質,然后通過軟件PDQuest分析蛋白質圖譜,結合高效液相色譜-二級質譜(HPLC-MS/MS)技術,并在質譜數據基礎上,運用數據庫UniprotKB檢索方式鑒定蛋白質,最后進行GO(Gene Ontology enrichment)富集分析以及KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes...
【文章來源】:武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:63 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2中國蓮(Sacred?lotus)和美洲黃蓮(American?lotus)(來自國際荷花網)??Fig.?1-2?Sacred?lotus?and?American?lotus?(From?the?international?lotus?website)??
圖2-1鐵蓮籽(a)及其分離子葉、胚軸和胚芽(b)示意圖??Fig.?2-1?Sketch?map?of?Tielian,?seeds(a)?and?separating?cotyledons,hypocotyls?and?plantules(b)??
一l牛血清白蛋白濃度標準曲線Bs^標準液休積(lll)
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基因功能富集分析的研究進展[J]. 王瀟,尹天舒,李柏逸,江熹霖,孫慧,竇亞光,倪琦,田衛(wèi)東. 中國科學:生命科學. 2016(04)
[2]干蓮子及其磨皮粉中蛋白質的組成特性比較[J]. 王發(fā)祥,賀偉,李微,俞健,李向紅,王建輝,劉永樂. 食品科學. 2015(01)
[3]蘋果葉片總蛋白提取及其雙向電泳分析[J]. 張彩霞,李壯,張利義,田義,康國棟,陳瑩,叢佩華. 果樹學報. 2012(03)
[4]水稻胚乳雙向電泳技術體系的優(yōu)化分析[J]. 趙書宇,劉海英,沈鵬,金正勛,張忠臣,張海彬,王露露. 東北農業(yè)大學學報. 2012(04)
[5]用于質譜鑒定蛋白質膠內酶解方法的優(yōu)化[J]. 胡煒,付強,朱平川,楊麗,劉振方,張明. 南方農業(yè)學報. 2011(07)
[6]適合雙向電泳的植物全蛋白提取方法比較[J]. 陳晶瑜,郭寶峰,何付麗,曲春鶴,尹克鑫,楊洪達,趙長山. 中國農學通報. 2010(23)
[7]適于SDS-PAGE分析的蘋果葉片蛋白質提取方法[J]. 曾廣娟,李春敏,張新忠,陳東玫,趙永波,董文軒. 華北農學報. 2009(02)
[8]超聲波-微波協(xié)同鹽提蓮子蛋白[J]. 王亞舉,廖曉珊,曾虹燕,蔡聯輝,章振宇. 生物加工過程. 2009(02)
[9]雙向凝膠電泳技術及其應用[J]. 馮海燕,景志忠,房永祥,莫斯科. 生物技術通報. 2009(01)
[10]蓮種子的極端高溫耐性與抗氧化酶活性的變化[J]. 丁燕芬,程紅焱,宋松泉. 中國科學(C輯:生命科學). 2008(04)
碩士論文
[1]辣椒多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因克隆及功能研究[D]. 王秀菊.山東農業(yè)大學 2011
本文編號:3210973
【文章來源】:武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數】:63 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2中國蓮(Sacred?lotus)和美洲黃蓮(American?lotus)(來自國際荷花網)??Fig.?1-2?Sacred?lotus?and?American?lotus?(From?the?international?lotus?website)??
圖2-1鐵蓮籽(a)及其分離子葉、胚軸和胚芽(b)示意圖??Fig.?2-1?Sketch?map?of?Tielian,?seeds(a)?and?separating?cotyledons,hypocotyls?and?plantules(b)??
一l牛血清白蛋白濃度標準曲線Bs^標準液休積(lll)
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基因功能富集分析的研究進展[J]. 王瀟,尹天舒,李柏逸,江熹霖,孫慧,竇亞光,倪琦,田衛(wèi)東. 中國科學:生命科學. 2016(04)
[2]干蓮子及其磨皮粉中蛋白質的組成特性比較[J]. 王發(fā)祥,賀偉,李微,俞健,李向紅,王建輝,劉永樂. 食品科學. 2015(01)
[3]蘋果葉片總蛋白提取及其雙向電泳分析[J]. 張彩霞,李壯,張利義,田義,康國棟,陳瑩,叢佩華. 果樹學報. 2012(03)
[4]水稻胚乳雙向電泳技術體系的優(yōu)化分析[J]. 趙書宇,劉海英,沈鵬,金正勛,張忠臣,張海彬,王露露. 東北農業(yè)大學學報. 2012(04)
[5]用于質譜鑒定蛋白質膠內酶解方法的優(yōu)化[J]. 胡煒,付強,朱平川,楊麗,劉振方,張明. 南方農業(yè)學報. 2011(07)
[6]適合雙向電泳的植物全蛋白提取方法比較[J]. 陳晶瑜,郭寶峰,何付麗,曲春鶴,尹克鑫,楊洪達,趙長山. 中國農學通報. 2010(23)
[7]適于SDS-PAGE分析的蘋果葉片蛋白質提取方法[J]. 曾廣娟,李春敏,張新忠,陳東玫,趙永波,董文軒. 華北農學報. 2009(02)
[8]超聲波-微波協(xié)同鹽提蓮子蛋白[J]. 王亞舉,廖曉珊,曾虹燕,蔡聯輝,章振宇. 生物加工過程. 2009(02)
[9]雙向凝膠電泳技術及其應用[J]. 馮海燕,景志忠,房永祥,莫斯科. 生物技術通報. 2009(01)
[10]蓮種子的極端高溫耐性與抗氧化酶活性的變化[J]. 丁燕芬,程紅焱,宋松泉. 中國科學(C輯:生命科學). 2008(04)
碩士論文
[1]辣椒多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因克隆及功能研究[D]. 王秀菊.山東農業(yè)大學 2011
本文編號:3210973
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