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黃瓜枯萎病拮抗微生物的篩選及發(fā)酵

發(fā)布時間:2021-05-31 23:58
  黃瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌黃瓜;停‵usarium oxysporum f.sp.cucumerinum Owen)病原真菌侵染黃瓜根際所致,是導(dǎo)致黃瓜嚴(yán)重減產(chǎn)的土傳病害之一。目前我國主要采用化學(xué)農(nóng)藥進行防治,但隨著對環(huán)境污染和食品安全的日益重視,安全有效的生物防治成為植株病害的主要途徑。本課題篩選了對黃瓜枯萎病具有拮抗作用菌株,并對拮抗效果良好的菌株進行發(fā)酵工藝的研究。其主要試驗結(jié)果如下:從土壤、各類微生物菌劑和生物肥中,經(jīng)過初篩和復(fù)篩篩選出了10株對尖孢鐮刀菌具有較好拮抗作用的微生物菌株,其中菌株D1(多粘芽孢桿菌)和菌株B3抑菌效果較好,抑菌圈直徑≥30.00 mm。協(xié)同拮抗試驗發(fā)現(xiàn),10株拮抗菌中多數(shù)具有協(xié)同拮抗效應(yīng),其中效果最好的是D1+B3,抑菌圈直徑達(dá)到42.52 mm。菌株B3鑒定為解淀粉芽孢桿菌。多粘芽孢桿菌D1、解淀粉芽孢桿菌B3均產(chǎn)生纖維素酶,其纖維素酶活≥70 U/mL,這有利于其在土壤中定殖。以梨渣為主要原料,多粘芽孢桿菌D1的固態(tài)發(fā)酵工藝研究。新鮮梨渣殘?zhí)呛枯^多,適合固態(tài)培養(yǎng)多粘芽孢桿菌。當(dāng)梨渣與麩皮混合比例在10:4時,多粘芽孢桿菌D1生長良好。添加豆... 

【文章來源】:河北科技大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

黃瓜枯萎病拮抗微生物的篩選及發(fā)酵


顯微鏡下的尖孢鐮刀菌孢子

流程圖,拮抗菌株,流程,鹽水


17圖 2-1 拮抗菌株篩選流程學(xué)花園的 3 種土樣和生物有鹽水中,搖床 200 r/min 震蕩稀釋;菌劑 LFP、LEM 和 L于 9.0 mL 生理鹽水中進行梯 和多粘芽孢菌劑 6 種樣品為理鹽水中進行梯度稀釋。-3、10-4、10-5、10-6的稀釋菌懸重復(fù)三個平板,倒置放入恒基 28℃下培養(yǎng) 48 h。待菌落的菌落進行劃線分離、搖瓶

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,葡萄糖


的觀測的方法進行染色,滴加 3~5 滴孔雀綠染液于已固定的涂片上染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸干,必要時可繼續(xù)添加時開始計算約 4~5 min,洗去染液。用番紅水溶液復(fù)染 1 mi后,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色。的生長測定從斜面培養(yǎng)基中挑取適量菌株的種子培養(yǎng)基中,30℃培養(yǎng) 1種在無菌的發(fā)酵用培養(yǎng)基,接種量 5%,200 r/min 搖床震蕩,進行 3 組平行試驗,每隔 2 h 取一次樣,在 600 nm 下測其吸素酶活測定素酶活的測定 用羧甲基纖維素鈉鹽(CMC)做底物,經(jīng)纖維原糖,3,5-二硝基水楊酸(DNS)可以作為氧化劑,和水解的還硝基氧化還原成氨基,溶液形成了橙色,還原糖的量與橙色比例。因而可采用比色法求得發(fā)酵液中還原糖的多少,并根維素酶活的大小。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]多粘類芽孢桿菌S960菌株發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 林茂茲,金美芳,鄒虹.  福建師大福清分校學(xué)報. 2015(05)
[2]多粘類芽胞桿菌DN-1防治水稻紋枯病初步研究[J]. 胡飛,李昌春,周子燕,胡本進,徐麗娜,鄭進國.  中國生物防治學(xué)報. 2015(04)
[3]多粘芽孢桿菌發(fā)酵放大工藝研究[J]. 周榮華,崔怡寧,饒犇,廖先清,楊自文.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(11)
[4]解淀粉芽孢桿菌SC1150的抑菌活性及其液體發(fā)酵條件的優(yōu)化[J]. 陳敏,郭旭文,李春遠(yuǎn),張暉,宋圓圓,曾任森.  生態(tài)科學(xué). 2015(03)
[5]一株凈水枯草芽孢桿菌的固態(tài)發(fā)酵工藝研究[J]. 李寶成,李延鋒,華懷峰,果然,滿麗萍.  中國農(nóng)業(yè)信息. 2015(05)
[6]不同品種梨汁貯藏過程中美拉德反應(yīng)特性[J]. 袁江,李甲明,張紹鈴,曹玉芬,田路明,吳俊.  果樹學(xué)報. 2014(05)
[7]尖孢鐮刀菌致病機理和化感作用研究進展[J]. 高曉敏,王琚鋼,馬立國,云興福.  微生物學(xué)通報. 2014(10)
[8]內(nèi)生解淀粉芽孢桿菌X-278發(fā)酵條件的優(yōu)化[J]. 魏嬌洋,馮龍,李亞寧,劉大群,赤國彤.  北方園藝. 2014(05)
[9]內(nèi)生解淀粉芽孢桿菌TF28液體發(fā)酵條件研究[J]. 張淑梅,王玉霞,孟利強,曹旭,趙曉宇,李晶,王傲雪,李景富.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2013(11)
[10]解淀粉芽孢桿菌HF-01發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 洪鵬,安國棟,胡美英,耿鵬,桑松.  中國生物防治學(xué)報. 2013(04)

碩士論文
[1]解淀粉芽孢桿菌15-1-1發(fā)酵條件優(yōu)化及對辣椒根腐病防治效果初探[D]. 張雷.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]復(fù)合微生物防治黃瓜枯萎病作用機理初步研究[D]. 麻耀華.河北師范大學(xué) 2012
[3]黃瓜枯萎病病原拮抗菌的篩選鑒定及其生防效果研究[D]. 張璐.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[4]枯草芽孢桿菌B908發(fā)酵工藝優(yōu)化研究[D]. 張麗霞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3209232

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