中國水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）,石蒜科水仙屬植物,是多花水仙（Narcissus tazettaL.）的一個變種。由于中國水仙品種較少、花色單一、育種資源匱乏等原因,傳統(tǒng)育種方面進(jìn)展很慢,改良中國水仙依然是廣大研究者對水仙研究的重點(diǎn)之一。本研究主要分為兩個部分:第一部分圍繞’云香水仙’始花期轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析。第二部分主要圍繞’漳州水仙’和’黃花水仙2號’WRKY基因的分子克隆,并通過qRT-PCR分析其在花朵呈現(xiàn)過程中的轉(zhuǎn)錄水平。本研究的開展對中國水仙花色育種及品種改良提供了一定的基因資源和理論基礎(chǔ)。主要的研究成果如下:1.構(gòu)建了’云香水仙’始花期花瓣和副冠轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫本試驗(yàn)以’云香水仙’始花期花朵為材料進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,在花瓣和副冠中分別獲得52,862,192和51,330,652條total clean reads,組裝成60,684 和 53,504 條unigene,后篩選得到8866個差異表達(dá)基因（DEGs）,其中2263個DEGs上調(diào)表達(dá)（399個DEGs僅在副冠中上調(diào)表達(dá)）,6603個DEGs下調(diào)表達(dá)（903個DEGs僅在花瓣中下... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?‘云香水仙’不同時期花色變化Ｙ１：花苞期；Ｙ２：花蕾期；Ｙ３：始花期；Ｙ４：盛花期??

３結(jié)果與分析??３．?１總ＲＮＡ的電泳圖與質(zhì)量檢測??圖２－４為試驗(yàn)所提取的花瓣和副冠總ＲＮＡ，經(jīng)１％的瓊脂糖凝膠電泳后核酸??染料染色后，２８Ｓ和１８Ｓ條帶清晰且２８Ｓ亮度為１８Ｓ的兩倍，表明基本除去酚??類、蛋白質(zhì)和多糖等雜質(zhì)污染。〇Ｄ２６〇／ＯＤ２８〇介于１．８？２．０間，表明，ＲＮＡ的完整??性較好，可以滿足ＲＮＡ－Ｓｅｑ測序的要求。??Ｍｌ?Ｍ?２??ＪＭｉ??ｉ２Ｓｓ??７５〇ｂｐ?｝??５〇〇ｂＰ??，（，〇ｂｐｔ??Ｍ：Ｉ）Ｌ２０Ｗ?ｍａｒｋｅｒ；〗：始花期花鍬（Ｙ３Ｐ?）?ＲＮＡ；?２：始?＃：??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ：?Ｉ：?ＲＸＡ?ｏｆ?Ｙ３Ｐ；?２：?ＲＮＡ?ｏｆＹ３Ｃ．??圖２－２?４云香水仙’總ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇ．２－２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?ｏｆ?Ｙｕｎｘｉａｎｇ?ｖａｒｉｅｔｙ，?Ｎ．?Ｔａｚｅｔｔａ??３．?２產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)和組裝結(jié)果分析??通過Ｉｌ］ＵｍｉｎａＨｉＳｅｑ２０００平臺測序，試驗(yàn)共獲得花瓣和副冠兩個轉(zhuǎn)錄組文庫，??兩個文庫分別產(chǎn)出?５２，８６２，１９２?和?５１，３３０，６５２?條?ｃｌｅａｎｒｅａｄｓ，Ｑ２０ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ?大于??１５??

第二章‘云香水仙’始花期花色轉(zhuǎn)錄組分析??使用這個標(biāo)準(zhǔn)，轉(zhuǎn)錄組總共獲得８，８６６個ＤＥＧｓ，其中２２６３和６６０３個基因分別??上調(diào)和下調(diào)表達(dá)（圖２－３），３９９個ＤＥＧｓ僅在副冠中差異表達(dá)，９０３個ＤＥＧｓ僅??在花瓣中差異表達(dá)。??Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?Ｌｅｖｅｌ?Ｙ３Ｐ?ｖｓ?Ｙ３Ｃ??６????ｒ?ＦＤＲ?＜?０．００１?ＡＮＤ?｜ｌｏｇ２Ｒａｔｉｏ｜?＞?１??５?？?■?ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅｓ??９?ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?？?？？?？？??４?＊?■?Ｎｏｔ?ＤＥＧｓ?．?＇、．??３?？?？?．?？’??ｉ：?ｉ?Ｊｐ＇??２?￣３－????Ｏｌ??°?－４?－?１．?，?Ｌ?，，?，??…＿??＾３?＾２?＂Ｂ?＾?２?＾?Ａ?Ｓ?６??ｌｏｇｌ０（Ｙ３Ｐ?ＦＰＫＭ）??圖２－３?‘云香水仙’花瓣和副冠差異表達(dá)基因分布圖Ｙ３Ｐ：始花期花瓣；Ｙ３Ｃ：始花期副??冠。??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｇｅｎｅｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｙｕｎｘｉａｎｇ?ｖａｒｉｅｔｙ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]基于SAQPCR的轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)鑒定及基于轉(zhuǎn)基因的MrMYB1功能分析[D]. 黃玉吉.浙江大學(xué) 2013

碩士論文
[1]漳州水仙鱗莖盤轉(zhuǎn)錄組分析及類黃酮合成途徑基因的表達(dá)[D]. 羅鵬.福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[2]多花水仙花色相關(guān)基因的克隆與cDNA文庫的構(gòu)建[D]. 魯娜.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
[3]多花水仙類黃酮生物合成相關(guān)酶基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 蔡雪玲.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[4]多花水仙類胡蘿卜素生物合成途徑部分酶基因的克隆與分析[D]. 葉一江.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[5]彩色玉米籽粒中參與花青素合成基因的表達(dá)分析[D]. 亓燕紅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]重組類胡蘿卜素合成相關(guān)酶的純化及紫外線對煙草Ggps基因表達(dá)的影響[D]. 劉敏.山東師范大學(xué) 2007



本文編號：3208255