蘋果的主要繁殖方式是嫁接,矮化密植由于具有成形快、早果性強、單位面積產量高、樹冠小、方便管理、適合機械化作業(yè)等優(yōu)點而逐漸成為蘋果產業(yè)的主流發(fā)展模式。因此,人們對于砧木的選擇也發(fā)生了一系列變化,最先采用的是實生砧木,其根系發(fā)達,固地性和適應性好,但無矮化效果;隨之是矮化中間砧,其具有一定的矮化效果,但中間砧苗木繁育需要兩次嫁接,程序繁瑣;為了簡化育苗程序,將矮化砧木直接再生不定根用作矮化自根砧,其矮化效果較好,但矮化砧木不定根的形成困難,并且其根系淺,根系不發(fā)達,固地性差。因此,它們對風等自然災害的抵抗力較弱。倘若能解決矮化自根砧生根困難的問題,這將會帶來巨大的經濟效益。文獻報道不定根發(fā)生相關加氧酶基因ARRO-1在不定根誘導階段上調表達,推測其與木本植物不定根的形成相關,但ARRO-1蛋白的生化功能未知。因此,研究ARRO-1基因的功能對于揭示木本植物不定根形成的分子機制具有重要的意義。本研究主要獲得了以下結果:（1）通過對ARRO-1和其在擬南芥中的同系物基因DAO1、DAO2的生物信息學分析,發(fā)現ARRO-1、DAO1和DAO2的cDNA序列相似性為78.72%,ARRO-1、DA... 

【文章來源】：西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數】：86 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 蘋果栽培模式的演變
        1.1.1 蘋果的起源、功效與蘋果產業(yè)發(fā)展現狀
        1.1.2 蘋果砧木品種
    1.2 植物不定根形成的分子機制
        1.2.1 生長素與不定根形成
        1.2.2 生長素穩(wěn)態(tài)的調節(jié)影響AR形成
        1.2.3 不定根發(fā)生的基因調控
    1.3 本研究的目的意義
第二章 ARRO-1的系統(tǒng)進化樹和多重氨基酸序列比對分析
    2.1 實驗方法
    2.2 實驗內容
        2.2.1 ARRO-1的系統(tǒng)進化樹分析
        2.2.2 ARRO-1、DAO1和DAO2 的多重氨基酸序列比對分析
    2.3 結果與分析
        2.3.1 ARRO-1的系統(tǒng)進化樹分析
        2.3.2 ARRO-1、DAO1和DAO2 的多重氨基酸序列比對分析
    2.4 討論
第三章 ARRO-1與DAO1 的亞細胞定位
    3.1 實驗材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 菌株和質粒
        3.1.3 主要實驗試劑
        3.1.4 主要實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 蛋白的跨膜結構預測
        3.2.2 載體的構建
        3.2.3 根癌農桿菌GV3101感受態(tài)細胞的制備
        3.2.4質粒DNA轉化根癌農桿菌GV3101
        3.2.5 煙草的瞬時表達
    3.3 結果與分析
        3.3.1 ARRO-1和DAO1 的跨膜結構預測
        3.3.2 35S::GFP-p LM-B001 載體的構建
        3.3.3 GFP連在ARRO-1和DAO1 C端載體的構建
        3.3.4 GFP連在ARRO-1和DAO1 N端載體的構建
        3.3.5 ARRO-1和DAO1 的亞細胞定位
    3.4 討論
第四章 ARRO-1啟動子功能分析
    4.1 實驗材料
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 質粒及菌株
        4.1.3 主要實驗試劑
        4.1.4 主要實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 農桿菌浸花法侵染擬南芥
        4.2.2 1/2MS平板上種子的種植方法
        4.2.3 植物基因組DNA的提取
        4.2.4 轉基因植物的組織化學染色
    4.3 結果與分析
        4.3.1 轉基因植株的獲得
        4.3.2 ARRO-1組織表達特性研究
    4.4 討論
第五章 擬南芥轉基因植株的獲得及分析
    5.1 實驗材料
        5.1.1 植物材料及種植方法
        5.1.2 菌株和質粒
        5.1.3 主要實驗試劑
        5.1.4 主要實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 ARRO-1抗體的制備
        5.2.2 抗體血清的純化
        5.2.3 載體的構建
        5.2.4 農桿菌浸花法侵染擬南芥
        5.2.5 植物基因組DNA的提取
        5.2.6 植物蛋白水平的鑒定
        5.2.7 植物總RNA的提取
        5.2.8 RT-PCR制備c DNA
    5.3 結果與分析
        5.3.1 ARRO-1抗體的制備
        5.3.2 植物雙元表達載體的構建結果
        5.3.3 過表達株系的獲得及分析
        5.3.4 互補株系的獲得及分析
        5.3.5 轉基因植物的表型分析
    5.4 討論
結論
參考文獻
附錄1 英文縮寫與全稱對照
附錄2 主要溶液配方
攻讀碩士學位期間取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]黃土高原丘陵溝壑區(qū)坡面果園的土壤水分特征分析[J]. 王健,吳發(fā)啟,孟秦倩.  西北林學院學報. 2006(05)

博士論文
[1]中國蘋果矮化密植集約栽培模式技術經濟評價研究[D]. 邵礫群.西北農林科技大學 2015

碩士論文
[1]擬南芥bHLH轉錄因子QQ1和QQ2功能的研究[D]. 陳永歡.西北大學 2018
[2]葉綠體PSⅡ中D1前體蛋白C-末端尾巴功能分析[D]. 王軍.西北大學 2017
[3]擬南芥CTP蛋白酶家族功能機制研究[D]. 常偉東.西北大學 2016



本文編號：3207454