蠟梅科植物開(kāi)花時(shí)間差異較大,其中,蠟梅延遲至冬天才能開(kāi)花,這也使得蠟梅成為一種理想的冬季賞花木本植物,而且被廣泛地運(yùn)用到城鄉(xiāng)園林建設(shè)中,但是,關(guān)于蠟梅在開(kāi)花時(shí)間方面所具備的特殊性卻鮮少見(jiàn)人研究。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)蠟梅花發(fā)育通路基因鑒定的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)在蠟梅中缺少了植物開(kāi)花的負(fù)調(diào)控因子FLC基因,但是存在一個(gè)與FLC調(diào)控密切相關(guān)的FRI基因。因此,本課題將蠟梅Cp FRI基因作為影響其開(kāi)花時(shí)間的候選基因,試圖通過(guò)進(jìn)一步研究Cp FRI基因的功能,初步分析這一基因在蠟梅開(kāi)花過(guò)程中所起到的作用,主要的研究結(jié)果如下:1.基于蠟梅品種H29基因組和轉(zhuǎn)錄組的基因數(shù)據(jù)庫(kù),共篩選出5個(gè)蠟梅FRI類(lèi)似基因,本次研究選擇將這5個(gè)基因作為蠟梅FRI的代表基因,它們構(gòu)成了蠟梅FRIGIDA-LIKE基因家族成員,分別命名為Cp FRI1、Cp FRI2、Cp FRI3、Cp FRI4、Cp FRI5。2.對(duì)FRI基因進(jìn)行進(jìn)化分析,發(fā)現(xiàn)除擬南芥FRIGIDA-LIKE基因亞家族V成員At FRL5以外,其它亞家族成員均與蠟梅FRI基因聚類(lèi)到一起。Cp FRI1和Cp FRI3與擬南芥FRIGIDA-LIKE基因亞家... 

【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
    1.1 研究問(wèn)題的由來(lái)
    1.2 植物的成花調(diào)控途徑
        1.2.1 光周期途徑
        1.2.2 春化途徑
        1.2.3 自主途徑
        1.2.4 赤霉素途徑
        1.2.5 溫度途徑
        1.2.6 年齡途徑
        1.2.7 FRI依賴途徑
    1.3 FRIGIDA-LIKE基因家族成員的研究進(jìn)展
    1.4 蠟梅成花途徑相關(guān)基因的鑒定
    1.5 研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株和載體質(zhì)粒
        2.1.3 主要試劑和儀器
        2.1.4 主要培養(yǎng)基和溶液配置
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)時(shí)定量q RT-PCR
        2.2.2 克隆載體的構(gòu)建
        2.2.3 超表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.4 煙草的遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.5 轉(zhuǎn)基因煙草的檢測(cè)
        2.2.6 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.7 擬南芥種子的篩選
        2.2.8 轉(zhuǎn)基因擬南芥的檢測(cè)
3 結(jié)果與分析
    3.1 蠟梅FRIGIDA-LIKE基因家族成員的篩選
    3.2 CpFRI保守結(jié)構(gòu)域位點(diǎn)的預(yù)測(cè)與進(jìn)化分析
    3.3 CpFRI基因全長(zhǎng)的克隆及序列分析
        3.3.1 基因全長(zhǎng)的克隆
        3.3.2 基因序列的生物信息學(xué)分析
    3.4 CpFRI克隆載體的構(gòu)建
    3.5 CpFRI超表達(dá)載體的構(gòu)建
    3.6 煙草的遺傳轉(zhuǎn)化及功能初探
        3.6.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草轉(zhuǎn)化
        3.6.2 CpFRI轉(zhuǎn)基因煙草的篩選鑒定
        3.6.3 CpFRI轉(zhuǎn)基因煙草的表型分析
    3.7 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化及功能初探
        3.7.1 擬南芥轉(zhuǎn)化及陽(yáng)性植株的篩選鑒定
        3.7.2 CpFRI轉(zhuǎn)基因擬南芥的表型分析
    3.8 CpFRI基因的時(shí)空表達(dá)分析
        3.8.1 CpFRI在蠟梅不同組織部位的表達(dá)情況
        3.8.2 CpFRI在蠟梅不同花發(fā)育階段的表達(dá)情況
4 討論
    4.1 蠟梅FRIGIDA-LIKE基因家族成員序列差異分析
    4.2 蠟梅FRIGIDA-LIKE基因家族成員的功能分析
    4.3 蠟梅FRIGIDA-LIKE基因家族成員表達(dá)模式分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)中存在的不足
5 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]赤霉素調(diào)控植物開(kāi)花及花器官發(fā)育的研究進(jìn)展[J]. 李巧峽,張麗,王玉,黃小霞.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2019(04)
[2]光周期途徑成花關(guān)鍵基因GIGANTEA和CONSTANS的研究進(jìn)展[J]. 帥敏敏,黃有軍.  分子植物育種. 2018(17)
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[6]高等植物成花誘導(dǎo)的分子機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 周琴,張思思,包滿珠,劉國(guó)鋒.  分子植物育種. 2018(11)
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博士論文
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[3]蠟梅種質(zhì)資源遺傳多樣性與核心種質(zhì)構(gòu)建的研究[D]. 趙冰.北京林業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]蠟梅花芽分化及發(fā)育過(guò)程中的轉(zhuǎn)錄組特征分析[D]. 嚴(yán)喬木.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]懸鈴木CO-Like同源基因與成花及休眠調(diào)控的相關(guān)性研究[D]. 孟海紅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]蠟梅科四種植物花芽分化及花發(fā)育的形態(tài)學(xué)比較研究[D]. 李來(lái).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]枳PtFRI基因在成花過(guò)程中的功能分析[D]. 胡思凡.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[5]蠟梅抗寒相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子CpICE1a、CpICE1b和CpDREB1的克隆及功能初探[D]. 張倩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]蠟梅類(lèi)黃酮3’-羥化酶基因（CpF3’H）及其啟動(dòng)子功能初探[D]. 俞美麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[7]大豆開(kāi)花基因CONSTANS-LIKE1和CONSTANS-LIKE13的克隆與功能分析[D]. 韓英英.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[8]大豆FRI同源基因的功能研究[D]. 胡鳳.華中師范大學(xué) 2013
[9]擬南芥FRIGIDA-LIKE蛋白家族成員AtFRL4基因及其上游調(diào)控序列的克隆與轉(zhuǎn)化研究[D]. 張瑜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[10]蠟梅花文化研究[D]. 鄭忠明.南京林業(yè)大學(xué) 2010



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