番茄灰霉侵染后番茄根內(nèi)放線菌的差異研究及Dactylosporangium solaniradic的鑒定
發(fā)布時間:2021-04-27 09:08
植物在整個生長過程中常常會將許多營養(yǎng)物質(zhì)分配至根部,因此吸引了大量微生物的聚集。這些微生物對植物的健康存在著很大影響,與宿主植物協(xié)同進(jìn)化,并且建立了具有選擇性互生的復(fù)雜和諧的微生態(tài)關(guān)系,其菌落結(jié)構(gòu)與豐度的變化是植物是否健康的明顯征兆。內(nèi)生放線菌作為植物微生態(tài)系統(tǒng)中的天然組成部分,可通過自身的一些代謝產(chǎn)物或者借助相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用對植物生長產(chǎn)生影響。所以,研究番茄的不同生理狀態(tài)與其內(nèi)生放線菌的多樣性和豐度的關(guān)系以及用內(nèi)生放線菌防治番茄灰霉病具有重要的現(xiàn)實意義。本研究樣品選用相同番茄品種的灰霉菌侵染株和與其相鄰的健康株的根部,采用植物表面消毒法、研磨法、稀釋涂布平板法和分離純化培養(yǎng)法,通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)分類初步分析它們根內(nèi)可培養(yǎng)放線菌的多樣性;采用平板對峙培養(yǎng)法分離、篩選對番茄灰霉病菌有抑制活性的內(nèi)生放線菌,通過平板生長抑制法研究包括番茄灰霉病菌在內(nèi)的11種病原真菌拮抗內(nèi)生放線菌的廣譜活性;對分離自病株番茄根部的菌株NEAU-FJL2進(jìn)行多相分類學(xué)鑒定。主要結(jié)論如下:(1)本研究通過對相同番茄品種的灰霉菌侵染株和與其相鄰的健康株的根內(nèi)放線菌的研究得到結(jié)論為:健康株根內(nèi)的放線菌群落單一而...
【文章來源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 番茄灰霉病的危害
1.2 番茄灰霉病的綜合防治
1.2.1 農(nóng)業(yè)防治
1.2.2 化學(xué)防治
1.2.3 生物防治
1.3 植物內(nèi)生放線菌在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用
1.3.1 在植物病害防治中的應(yīng)用
1.3.2 在蟲害防治中的應(yīng)用
1.3.3 在其它有害生物中的防治應(yīng)用
1.3.4 其它生物活性
1.4 病蟲害侵襲植物與植物根招募微生物
1.4.1 病原菌侵染植物與根招募微生物
1.4.2 蟲害侵襲植物與根招募微生物
1.5 研究的目的意義及內(nèi)容
1.5.1 目的和意義
1.5.2 研究的內(nèi)容
1.6 課題來源
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 番茄樣品
2.1.2 供試靶標(biāo)菌
2.1.3 PCR引物
2.2 主要試劑與儀器
2.2.1 試劑
2.2.2 儀器
2.3 主要培養(yǎng)基和配制方法
2.3.1 分離培養(yǎng)基
2.3.2 純化培養(yǎng)基
2.3.3 液體培養(yǎng)基
2.3.4 發(fā)酵培養(yǎng)基
2.3.5 生測培養(yǎng)基
2.3.6 生理生化測試培養(yǎng)基
2.3.7 形態(tài)觀察培養(yǎng)基
2.4 方法
2.4.1 采樣及處理
2.4.2 番茄根部內(nèi)生放線菌的分離與純化
2.4.3 菌種保藏及命名
2.5 番茄內(nèi)生放線菌多樣性初探
2.5.1 形態(tài)學(xué)分類
2.5.2 分子生物學(xué)分類
2.6 放線菌的抑菌活性測試
2.6.1 拮抗菌皿內(nèi)初篩
2.6.2 灰霉菌侵染的病株與健康株活性菌數(shù)量比較
2.6.3 發(fā)酵產(chǎn)物抑菌作用
2.7 菌株NEAU-FJL2多相分類鑒定
2.7.1 形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察
2.7.2 生理生化特性測試
2.7.3 化學(xué)分類鑒定
2.7.4 分子水平鑒定
3 結(jié)果與分析
3.1 番茄內(nèi)生放線菌多樣性的初探結(jié)果
3.1.1 放線菌在不同樣品上的分布情況
3.1.2 放線菌相對豐度分析
3.2 抑菌活性檢測
3.2.1 拮抗菌皿內(nèi)初篩結(jié)果
3.2.2 灰霉菌侵染的病株與健康株活性菌數(shù)量比較
3.2.3 發(fā)酵產(chǎn)物活性
3.3 菌株NEAU-FJL2的鑒定結(jié)果
3.3.1 16S rRNA序列分析及比對結(jié)果
3.3.2 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建分析
3.3.3 形態(tài)觀察
3.3.4 培養(yǎng)特征
3.3.5 生理生化特性
3.3.6 化學(xué)分類特征
3.3.7 (G+C) mol%結(jié)果
3.3.8 DNA同源性分析結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
5.1 本研究主要結(jié)論
5.2 本研究的主要創(chuàng)新點
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]6種殺菌劑對設(shè)施番茄灰霉病的防治效果[J]. 賈利元,田偉,劉新社. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(09)
[2]青藏高原土壤放線菌的分離及其對番茄灰霉病菌的抑制活性[J]. 張國強(qiáng),張寧,韓立榮,王永宏,馮俊濤,張興. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(06)
[3]1000億活芽孢/克枯草芽孢桿菌可濕性粉劑防治番茄灰霉病藥效試驗[J]. 劉曉剛,閆東林,蘇聰莉,陸小成. 上海蔬菜. 2012(03)
[4]番茄灰霉病菌拮抗放線菌的篩選、鑒定及其活性評價[J]. 徐大勇,李志棟,李峰,徐頂泉,吳旺麗. 中國生物防治學(xué)報. 2012(02)
[5]微生物菌種保藏方法概述[J]. 梁寧利. 農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊). 2012(04)
[6]5種木霉對番茄灰霉病拮抗作用的測定[J]. 胡啟國. 吉林農(nóng)業(yè). 2012(04)
[7]保護(hù)地番茄主要病害綜合防治技術(shù)初探[J]. 董金榮,王玉樓,吉同鑾,孔兵. 安徽農(nóng)學(xué)通報(下半月刊). 2011(16)
[8]防治灰霉病藥劑的開發(fā)進(jìn)展[J]. 韓君,范懷峰,王海娜,劉峰. 農(nóng)藥研究與應(yīng)用. 2011(03)
[9]啶酰菌胺和咯菌腈對番茄灰霉病菌不同菌株的毒力(初報)[J]. 趙建江,韓秀英,張小風(fēng),馬志強(qiáng),王文橋,陳治芳,李賽飛. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(08)
[10]啶菌噁唑?qū)Ψ鸦颐共【囊志饔醚芯縖J]. 陳鳳平,韓平,張真真,劉君麗,劉西莉. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2010(01)
博士論文
[1]大豆根部內(nèi)生放線菌的篩選、鑒定及其活性代謝產(chǎn)物研究[D]. 劉重喜.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]幾種農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的分離及新種鑒定[D]. 趙軍偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的篩選及新屬鑒定[D]. 賈飛宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]紅樹植物內(nèi)生放線菌的分離與小單孢菌科新種鑒定[D]. 李蕾.海南大學(xué) 2013
[4]番茄灰霉病拮抗菌株的選育、基因改造及其發(fā)酵液大棚試驗研究[D]. 韓文霞.西北大學(xué) 2010
本文編號:3163190
【文章來源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
英文摘要
1 前言
1.1 番茄灰霉病的危害
1.2 番茄灰霉病的綜合防治
1.2.1 農(nóng)業(yè)防治
1.2.2 化學(xué)防治
1.2.3 生物防治
1.3 植物內(nèi)生放線菌在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用
1.3.1 在植物病害防治中的應(yīng)用
1.3.2 在蟲害防治中的應(yīng)用
1.3.3 在其它有害生物中的防治應(yīng)用
1.3.4 其它生物活性
1.4 病蟲害侵襲植物與植物根招募微生物
1.4.1 病原菌侵染植物與根招募微生物
1.4.2 蟲害侵襲植物與根招募微生物
1.5 研究的目的意義及內(nèi)容
1.5.1 目的和意義
1.5.2 研究的內(nèi)容
1.6 課題來源
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 番茄樣品
2.1.2 供試靶標(biāo)菌
2.1.3 PCR引物
2.2 主要試劑與儀器
2.2.1 試劑
2.2.2 儀器
2.3 主要培養(yǎng)基和配制方法
2.3.1 分離培養(yǎng)基
2.3.2 純化培養(yǎng)基
2.3.3 液體培養(yǎng)基
2.3.4 發(fā)酵培養(yǎng)基
2.3.5 生測培養(yǎng)基
2.3.6 生理生化測試培養(yǎng)基
2.3.7 形態(tài)觀察培養(yǎng)基
2.4 方法
2.4.1 采樣及處理
2.4.2 番茄根部內(nèi)生放線菌的分離與純化
2.4.3 菌種保藏及命名
2.5 番茄內(nèi)生放線菌多樣性初探
2.5.1 形態(tài)學(xué)分類
2.5.2 分子生物學(xué)分類
2.6 放線菌的抑菌活性測試
2.6.1 拮抗菌皿內(nèi)初篩
2.6.2 灰霉菌侵染的病株與健康株活性菌數(shù)量比較
2.6.3 發(fā)酵產(chǎn)物抑菌作用
2.7 菌株NEAU-FJL2多相分類鑒定
2.7.1 形態(tài)和培養(yǎng)特征觀察
2.7.2 生理生化特性測試
2.7.3 化學(xué)分類鑒定
2.7.4 分子水平鑒定
3 結(jié)果與分析
3.1 番茄內(nèi)生放線菌多樣性的初探結(jié)果
3.1.1 放線菌在不同樣品上的分布情況
3.1.2 放線菌相對豐度分析
3.2 抑菌活性檢測
3.2.1 拮抗菌皿內(nèi)初篩結(jié)果
3.2.2 灰霉菌侵染的病株與健康株活性菌數(shù)量比較
3.2.3 發(fā)酵產(chǎn)物活性
3.3 菌株NEAU-FJL2的鑒定結(jié)果
3.3.1 16S rRNA序列分析及比對結(jié)果
3.3.2 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建分析
3.3.3 形態(tài)觀察
3.3.4 培養(yǎng)特征
3.3.5 生理生化特性
3.3.6 化學(xué)分類特征
3.3.7 (G+C) mol%結(jié)果
3.3.8 DNA同源性分析結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
5.1 本研究主要結(jié)論
5.2 本研究的主要創(chuàng)新點
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]6種殺菌劑對設(shè)施番茄灰霉病的防治效果[J]. 賈利元,田偉,劉新社. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(09)
[2]青藏高原土壤放線菌的分離及其對番茄灰霉病菌的抑制活性[J]. 張國強(qiáng),張寧,韓立榮,王永宏,馮俊濤,張興. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(06)
[3]1000億活芽孢/克枯草芽孢桿菌可濕性粉劑防治番茄灰霉病藥效試驗[J]. 劉曉剛,閆東林,蘇聰莉,陸小成. 上海蔬菜. 2012(03)
[4]番茄灰霉病菌拮抗放線菌的篩選、鑒定及其活性評價[J]. 徐大勇,李志棟,李峰,徐頂泉,吳旺麗. 中國生物防治學(xué)報. 2012(02)
[5]微生物菌種保藏方法概述[J]. 梁寧利. 農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊). 2012(04)
[6]5種木霉對番茄灰霉病拮抗作用的測定[J]. 胡啟國. 吉林農(nóng)業(yè). 2012(04)
[7]保護(hù)地番茄主要病害綜合防治技術(shù)初探[J]. 董金榮,王玉樓,吉同鑾,孔兵. 安徽農(nóng)學(xué)通報(下半月刊). 2011(16)
[8]防治灰霉病藥劑的開發(fā)進(jìn)展[J]. 韓君,范懷峰,王海娜,劉峰. 農(nóng)藥研究與應(yīng)用. 2011(03)
[9]啶酰菌胺和咯菌腈對番茄灰霉病菌不同菌株的毒力(初報)[J]. 趙建江,韓秀英,張小風(fēng),馬志強(qiáng),王文橋,陳治芳,李賽飛. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(08)
[10]啶菌噁唑?qū)Ψ鸦颐共【囊志饔醚芯縖J]. 陳鳳平,韓平,張真真,劉君麗,劉西莉. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2010(01)
博士論文
[1]大豆根部內(nèi)生放線菌的篩選、鑒定及其活性代謝產(chǎn)物研究[D]. 劉重喜.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]幾種農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的分離及新種鑒定[D]. 趙軍偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的篩選及新屬鑒定[D]. 賈飛宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]紅樹植物內(nèi)生放線菌的分離與小單孢菌科新種鑒定[D]. 李蕾.海南大學(xué) 2013
[4]番茄灰霉病拮抗菌株的選育、基因改造及其發(fā)酵液大棚試驗研究[D]. 韓文霞.西北大學(xué) 2010
本文編號:3163190
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