發(fā)布時間：2021-03-24 04:50

　　香椿起源于中國,屬于楝科香椿屬高大喬木,其嫩芽具有特殊而誘人的香氣,是我國的傳統(tǒng)高檔蔬菜,有2000多年的食用歷史,深受廣大消費者喜愛。香椿特征性香氣產(chǎn)生的機理一直不清楚,不利于優(yōu)良菜用品種的選育及保風味技術(shù)的開展。最近的研究表明,揮發(fā)性有機硫化物對于香椿特殊香氣的產(chǎn)生有重要影響,其中γ-谷氨酰胺轉(zhuǎn)肽酶（γ-glutamyl-transpeptidase,GGT）處于代謝途徑中的重要位置。本論文以香椿嫩芽為材料,通過硫酸銨分級沉淀及層析分離技術(shù)等,得到電泳純級別的GGT,對其酶學性質(zhì)進行了初步研究,主要結(jié)果和結(jié)論如下:通過硫酸銨分級沉淀、透析脫鹽和Sephadex G-200柱色譜分離純化,從香椿芽凍干粉中分離得到電泳純級別的GGT,純化倍數(shù)為40.67,得率為13.40%;SDS-PAGE分析表明,GGT含有兩個不同的亞基,分子量分別為26kDa和64kDa。GGT的Km為3.623μmol/mL,最大反應(yīng)速度Vmax為2.831μmol/mL·min。酶的催化動力學研究表明,GGT最適宜的反應(yīng)溫度為60℃,最適宜pH7.0,Cu2+和Zn2+對GGT有很強的抑制作用,Fe3+有很強... 

【文章來源】：天津科技大學天津市

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－２對硝基苯胺的標準曲線??２７??

??３結(jié)果１?ｊｉ、ｔ論???Ｆｉｇ．?３－２?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｐ－ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｄｅ??由圖３－２可知，標準物對硝基苯胺濃度與其吸光度表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，其標??準曲線方程為：ｙ＝６．９９３ｘ?＋０．０２６，Ｒ２?＝?０．９９９。??３．２．２三種不同提取方法對ＧＧＴ提取率的影響??表３－２三種不同的提取方法的比較結(jié)果??Ｔａｂｌｅ．?３－２?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｈｒｅｅ?ｍｅｔｈｏｄｓ??提取溫度?提収功率?提取時間?料液比?酶含Ｍ??輔助提取方法??（°Ｃ）?（Ｗ）?（ｍｉｎ）?（ｇ／ｍＬ）?（Ｕ／ｇ）??超盧波提取法?４?２００?２０?１：５０?５．１９±０．０３??機械攪撲提取法?４?２３０?２０?１：５０?３．６０±０．０５??反復(fù)凍融提取法?－１８／４?—?５４０?１：５０?２．１９±０．０２??ｅ?＾???＇Ｉ?禮國??媒－齡麵一??超聲波機喊描伴反？凍纖??輔肋摁取法?補舫提取法?輔Ｍ掇職法??圖３－３三種提取方法下的酶含量變化??Ｆｉｇ．?３－３?Ｃｈａｎｇｅ?ｏｆ?ＧＧＴ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｔｈｒｅｅ?ｍｅｔｈｏｄｓ??由上述實驗結(jié)果（表３－２，圖３－３）可知，目前普遍采用的機械攪拌輔助提取法，??ＧＧＴ的酶含量結(jié)果為３．６０±０．０５Ｕ／ｇ，而采用超聲波輔助提取法得到的ＧＧＴ酶含量高??達５．１９±０．０３Ｕ／ｇ，對比常用的機械攪拌輔助提取法的結(jié)果提高了將近１．５倍，而反復(fù)??凍融輔助提取法工藝得到的ＧＧＴ酶含量為２．１９±０．０２Ｕ／ｇ，低于機

的提取方法，相??比較其他提取方法不僅保持了天然產(chǎn)物的活忭，而且提高了破碎速度，縮短了提収時??間，極大的提高了提取效率。??３．２．３超聲輔助提取法的工藝優(yōu)化??（１）不同緩沖液體積對提�。牵牵悦负康挠绊�??６０?－１??ｚ．ｊ．、??５０－??４０?－?ｒ’?、??ｉ?３０?－??＾?／??運?？??２０－??１０－??ｌ?ｌ?ｌ?ｌ?ｌ?ＩＩ??０?５０?１００?１５０?２００?２５０?３００??緩沖液休枳（ｍｌ）??圖３４緩沖液體積對提取丫－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶含量的影響??Ｆｉｇ．?３－４?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｂｕｆｆｅｒ?ｖｏｌｕｍｅ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＧＧＴ??由圖３－４可知，隨著緩沖液體積的提高，即料液比下降時，提取液中ＧＧＴ的含??量不斷增加，當料液比達到ｌ：２００?（ｇ／ｍＬ）時，ＧＧＴ的含量達到了最辦位（５３．４２±０．５７??Ｕ／ｇ），之后進一步增加緩沖液體積，ＧＧＴ的穴量相對Ｍ高值有所降低。芻樣品量一定??是，溶劑量的增加加大了溶質(zhì)的擴散空間，從而降低了溶質(zhì)顆粒周丨丨＿成分濃度，有??利于溶質(zhì)分子從高濃度到低濃度部位的運動、傳遞和擴散。因此ＧＧＴ的從樣品中溶??２９??

【參考文獻】：
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本文編號：3097090