番茄在世界各地區(qū)均有種植,作為果蔬植物深受人們的喜愛(ài)。但近幾年隨著番茄栽培面積逐漸擴(kuò)大,病毒病也在不斷蔓延,成為產(chǎn)量及質(zhì)量的重要限制因素。為了明確山東省、山西晉中、內(nèi)蒙古呼市等大部分番茄栽培區(qū)侵染番茄的病毒種類、病毒復(fù)合侵染情況以及主次關(guān)系,本研究利用PCR法對(duì)采自山東省、山西晉中、內(nèi)蒙古呼市等9個(gè)地區(qū)的425份番茄樣品進(jìn)行15種病毒的檢測(cè)與鑒定,并對(duì)ToMV全基因組序列進(jìn)行克隆以及測(cè)序,從而將所獲得的23條全基因組序列與Genbank數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)的ToMV序列進(jìn)行一致性比對(duì)以及對(duì)移動(dòng)蛋白、外殼蛋白、全基因組序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析。研究結(jié)果如下:（1）利用15種特異引物采用PCR法檢測(cè)425份番茄樣品,共檢測(cè)出7種病毒,分別為:ToMV（Tomato mosaic virus）、ToCV（Tomato chlorosis virus）、TMV（Tobacco mosaic virus）、CMV（Cucumber mosaic virus）、PVY（Potato virus Y）、TYLCVNβ（Tomato yellow leaf curl vietnam betasatellite）、TY... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
符號(hào)說(shuō)明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 番茄病毒病病原種類及危害簡(jiǎn)介
        1.1.1 番茄黃化曲葉病毒的分類及病原特征
        1.1.2 番茄褪綠病毒的分類及病原特征
        1.1.3 番茄花葉病毒的分類及病原特征
    1.2 番茄病毒病的防治措施
    1.3 番茄病毒病的檢測(cè)技術(shù)研究概況
        1.3.1 生物學(xué)檢測(cè)法
        1.3.2 血清學(xué)檢測(cè)法
        1.3.3 分子生物學(xué)檢測(cè)法
    1.4 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 病毒樣品的采集
        2.1.2 菌株和載體
        2.1.3 生化及分子生物學(xué)試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)所需儀器
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)試劑的配制方法
    2.2 感病植株病毒病中DNA、RNA病毒的檢測(cè)與鑒定
        2.2.1 植物基因組DNA的提取
        2.2.2 病毒基因組RNA的提取
        2.2.3 引物的設(shè)計(jì)及合成
        2.2.4 反轉(zhuǎn)錄cDNA的合成
        2.2.5 PCR擴(kuò)增
        2.2.6 PCR產(chǎn)物的克隆和測(cè)序
        2.2.7 序列分析
    2.3 番茄雙生病毒的檢測(cè)與鑒定
        2.3.1 樣品DNA提取
        2.3.2 引物合成
        2.3.3 雙生病毒的RCR擴(kuò)增
        2.3.4 PCR產(chǎn)物的克隆及測(cè)序
        2.3.5 序列分析
    2.4 番茄花葉病毒全基因組PCR的擴(kuò)增
        2.4.1 感病植株RNA的提取
        2.4.2 引物的設(shè)計(jì)及合成
        2.4.3 反轉(zhuǎn)錄cDNA的合成
        2.4.4 ToMV全基因組PCR的擴(kuò)增
        2.4.5 PCR產(chǎn)物的克隆及測(cè)序
        2.4.6 序列分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 北方三省區(qū)番茄感病樣品DNA病毒病原的檢測(cè)結(jié)果
        3.1.1 北方三省區(qū)侵染番茄的DNA病毒種類檢測(cè)情況
        3.1.2 北方三省區(qū)番茄DNA病毒病檢出率
        3.1.3 北方三省區(qū)番茄TYLCV病毒病分布情況
    3.2 北方三省區(qū)番茄感病樣品RNA病毒病原的檢測(cè)結(jié)果
        3.2.1 北方三省區(qū)番茄RNA病毒病檢出率
        3.2.2 北方三省區(qū)番茄病毒病分布情況
    3.3 北方三省區(qū)番茄病毒病復(fù)合侵染情況
    3.4 番茄花葉病毒分離物的全基因組擴(kuò)增及序列分析
        3.4.1 北方三省部分地區(qū)番茄花葉病毒分離物全基因組序列擴(kuò)增
        3.4.2 ToMV全基因組結(jié)構(gòu)分析
        3.4.3 ToMV與Tobamovirus屬病毒部分分離物的一致性比較
    3.5 番茄GS100分離物與Tobamovirus屬部分分離物進(jìn)行一致性比較分析
    3.6 ToMV全基因組序列突變分析
4 ToMV分離物的核苷酸系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析
    4.1 ToMV分離物的CP和MP蛋白核苷酸系統(tǒng)進(jìn)化分析
    4.2 ToMV全基因組的核苷酸系統(tǒng)進(jìn)化分析
5 ToMV分離物的氨基酸系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析
    5.1 ToMV分離物的CP和MP蛋白氨基酸系統(tǒng)進(jìn)化分析
    5.2 ToMV分離物的全基因組氨基酸系統(tǒng)進(jìn)化分析
6 結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]山東煙臺(tái)地區(qū)發(fā)生番茄斑萎病毒病危害[J]. 李潔,遲勝起,楊勤民,丁天波,褚棟.  植物保護(hù). 2017(01)
[2]番茄褪綠病毒的研究進(jìn)展[J]. 金鳳媚,薛俊,宋建,王姝,張?jiān)?  天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(01)
[3]油菜花葉病毒山西地黃分離物的全基因組序列測(cè)定與分析[J]. 王德富,張西梅,楊鋒,牛顏冰.  植物病理學(xué)報(bào). 2016(05)
[4]番茄褪綠病毒RT-PCR檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)化及河南分離物的鑒定[J]. 馮佳,孫曉輝,高利利,劉靈芝,喬寧,劉永光,竺曉平.  植物保護(hù). 2016(04)
[5]李寶聚博士診病手記(九十三) 番茄斑萎病毒病在寧夏的發(fā)現(xiàn)與防治[J]. 曹金強(qiáng),謝學(xué)文,柴阿麗,李寶聚.  中國(guó)蔬菜. 2016(04)
[6]番茄黃化曲葉病毒的鑒定與群體進(jìn)化分析[J]. 周瑩,尚巧霞,羅晨,喬廣行,劉梅,張瑋,燕繼曄.  植物保護(hù). 2016(01)
[7]天津地區(qū)番茄褪綠病毒的分子檢測(cè)和鑒定[J]. 高利利,孫國(guó)珍,王勇,高葦,張春祥,張安勝,竺曉平.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2015(03)
[8]天津地區(qū)番茄病毒病發(fā)生情況調(diào)查及其毒源ELISA檢測(cè)[J]. 王勇,高葦,張春祥.  天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(12)
[9]侵染番茄的番茄褪綠病毒山東泰安分離物的分子鑒定和序列分析[J]. 趙黎明,李剛,劉永杰,劉永光,孫國(guó)珍,竺曉平.  植物保護(hù). 2014(05)
[10]警惕番茄褪綠病毒在我國(guó)的傳播和危害[J]. 周濤,楊普云,趙汝娜,師迎春,原鍇,范在豐.  植物保護(hù). 2014(05)

碩士論文
[1]侵染我國(guó)煙草的野生番茄花葉病毒分離株（WTMV-XC-1）的鑒定[D]. 孫航軍.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2015
[2]園藝植物幾種病毒病的分子檢測(cè)與鑒定[D]. 李剛.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]番茄花葉病毒外殼蛋白與煙草IP-L蛋白的互作分析[D]. 李婷婷.西南大學(xué) 2013
[4]番茄花葉病毒外殼蛋白與煙草鐵氧還蛋白Ⅰ及IP-L蛋白的互作分析[D]. 武改霞.西南大學(xué) 2012
[5]進(jìn)境臺(tái)灣十字花科蔬菜有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析及番茄斑萎病毒快速檢測(cè)方法研究[D]. 林授鍇.福建農(nóng)林大學(xué) 2008



本文編號(hào)：2960435