黃瓜（Cucumis sativus L.2n=2x=14）作為世界十大蔬菜之一,在我國的蔬菜市場中占據(jù)重要位置,有較大的經(jīng)濟(jì)價值。黃瓜葉片為掌狀、在葉腋處具有卷須,并且具有雌雄同株、單性花以及單性結(jié)實等特性。以黃瓜為研究對象有助于了解以上性狀形態(tài)建成過程中的分子和生理機(jī)制,為相關(guān)性狀的研究提供可靠的研究基礎(chǔ)。本研究中,為了進(jìn)一步研究黃瓜器官形態(tài)建成的分子機(jī)制,通過對前期黃瓜EMS突變體庫的篩選獲得了穩(wěn)定遺傳的黃瓜圓葉突變體（rl）,對其進(jìn)行了表型鑒定、遺傳分析、基因定位以及分子機(jī)制研究,主要的研究結(jié)果如下:1)rl突變體表型與野生型相比主要變化包括:葉片由掌狀變?yōu)閳A形,卷須數(shù)量明顯減少,胚珠起始發(fā)生缺陷,雄花花蕊異常,導(dǎo)致rl突變體雌性器官完全不育以及雄性器官的部分不育性。2)利用MutMap⁺技術(shù)進(jìn)行全基因組重測序并將候選基因定位于1號染色體,將其中符合篩選標(biāo)準(zhǔn)的22個SNPs進(jìn)行基因分型檢測,初步確定候選基因為Csa1G537400（CsPID）,等位性檢測結(jié)果進(jìn)一步證明CsPID為調(diào)控黃瓜葉片和花器官形態(tài)的建成的基因。構(gòu)建35S::CsPID過表達(dá)載體轉(zhuǎn)入... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究目的與意義
    1.2 國內(nèi)外研究進(jìn)展
        1.2.1 植物葉片發(fā)育研究進(jìn)展
        1.2.2 植物胚珠發(fā)育研究進(jìn)展
        1.2.3 生長素調(diào)節(jié)植物側(cè)生器官發(fā)育機(jī)制
        1.2.4 PINOID基因研究進(jìn)展
    1.3 本研究的主要內(nèi)容和技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗材料及試劑
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 試驗試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 表型觀察
        2.2.2 候選基因鑒定
        2.2.3 擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.4 轉(zhuǎn)錄組分析
        2.2.5 基因表達(dá)模式分析
        2.2.6 激素檢測
        2.2.7 互作蛋白分析
        2.2.8 亞細(xì)胞定位
        2.2.9 進(jìn)化樹分析以及同源蛋白比對
    2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 表型分析
        3.1.1 rl突變體在營養(yǎng)生長階段有缺陷
        3.1.2 rl突變體雄性部分不育,雌性完全不育
    3.2 CsPID調(diào)控黃瓜rl突變體的形成
        3.2.1 遺傳分析
        3.2.2 全基因組重測序
        3.2.3 基因分型
        3.2.4 等位性檢測
        3.2.5 進(jìn)化樹分析和蛋白序列比對
    3.3 CsPID可部分恢復(fù)擬南芥中的pid-14 突變體表型
    3.4 CsPID在黃瓜中的表達(dá)模式
        3.4.1 qRT-PCR檢測
        3.4.2 原位雜交和亞細(xì)胞定位結(jié)果
    3.5 rl突變體葉片和子房中的IAA水平降低
        3.5.1 IAA含量檢測
        3.5.2 IAA免疫定位
    3.6 轉(zhuǎn)錄組分析揭示了參與黃瓜器官形態(tài)發(fā)生的關(guān)鍵基因
        3.6.1 差異表達(dá)基因（DEG）分析
        3.6.2 GO分析
    3.7 CsPID在蛋白水平上與CsREV互作
4 討論
    4.1 擬南芥PID同源基因CsPID在黃瓜側(cè)生器官形態(tài)發(fā)生和胚珠發(fā)育中起關(guān)鍵作用
    4.2 r1 突變體中的突變位點(diǎn)對于CsPID的亞細(xì)胞定位至關(guān)重要
    4.3 CsPID介導(dǎo)黃瓜中的生長素極性運(yùn)輸
    4.4 CsPID與極性調(diào)節(jié)蛋白CsREV相互作用
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：2932842