發(fā)布時(shí)間：2020-12-15 20:21

　　梅花（Prunus mume Sieb.et Zucc.）屬薔薇科李屬植物,是中國的傳統(tǒng)名花,具有很高的觀賞價(jià)值和豐富的文化內(nèi)涵。相對于李屬其他植物,在長江流域及其以南地區(qū),梅花開花最早,能夠在早春盛開。花期不僅是影響梅花觀賞性狀的重要因素之一,也是重要的栽培性狀。成花轉(zhuǎn)變作為植物開花的第一步,是植物從營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)變的重要轉(zhuǎn)折點(diǎn)。前人研究表明,擬南芥成花調(diào)控途徑中SOC1、SVP、LFY等開花整合子基因在植物成花轉(zhuǎn)變過程中具有重要的調(diào)控作用,目前已經(jīng)從很多植物中分離出了這些基因,并對其進(jìn)行了深入研究,而目前對梅花成花相關(guān)基因的研究很少,有關(guān)梅花成花轉(zhuǎn)變的分子調(diào)控機(jī)理尚不清楚。鑒于此,本研究首先采用RT-PCR的方法從梅花品種’長蕊綠萼’中克隆了 7個(gè)成花相關(guān)基因;利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法對它們的表達(dá)模式進(jìn)行了分析,采用酵母雙雜交技術(shù)研究了這些基因的蛋白互作模式;結(jié)合它們在擬南芥中過表達(dá)產(chǎn)生的表型變化,對這些基因的功能進(jìn)行了全面而系統(tǒng)的闡釋。主要結(jié)果如下:1.采用RT-PCR的方法從梅花’長蕊綠萼’葉片中克隆了 7個(gè)控制梅花成花階段轉(zhuǎn)變的基因,其中3個(gè)SOC1同源基因,2個(gè)S... 

【文章來源】：北京林業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１擬南芥主要開花途徑（ＢｌｔａｉｅｌｅｔａＬ，２０１４）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｔｉｍｅ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?（Ｂｌｉｉ?

２０１２），將同源性高的３個(gè)序列作為候選基因。根據(jù)ＣＤＳ序列分別設(shè)計(jì)引物，以梅花??‘長蕊綠萼’葉片ｃＤＮＡ為模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法進(jìn)行擴(kuò)增，克隆得到了這３個(gè)基??因，分別命名為尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（圖２－２）。３個(gè)基因的長度略??有差異，但都在６５０?ｂｐ左右，與梅花基因組中的數(shù)據(jù)一致。根據(jù)梅花基因組數(shù)據(jù)，??將ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３個(gè)基因分別定位在梅花第５和第７條染色??體上（圖２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??圖２－１梅花葉片總ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳圖??１－４所示為提取ＲＮＡ的４次重復(fù)??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??圖２－２梅花奶Ｃ７基因擴(kuò)增ＰＣＲ產(chǎn)物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??

２０１２），將同源性高的３個(gè)序列作為候選基因。根據(jù)ＣＤＳ序列分別設(shè)計(jì)引物，以梅花??‘長蕊綠萼’葉片ｃＤＮＡ為模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法進(jìn)行擴(kuò)增，克隆得到了這３個(gè)基??因，分別命名為尸ｗ及９Ｃ／－７、Ｐｗ汾９Ｃ／－２和（圖２－２）。３個(gè)基因的長度略??有差異，但都在６５０?ｂｐ左右，與梅花基因組中的數(shù)據(jù)一致。根據(jù)梅花基因組數(shù)據(jù)，??將ＰｗＳＯｍ?ＰｗＳ（９Ｃ／－２和ＰＷＳＯＣ７－３?３個(gè)基因分別定位在梅花第５和第７條染色??體上（圖２－３）。??１２?３?４??■Ｂｍ??圖２－１梅花葉片總ＲＮＡ瓊脂糖凝膠電泳圖??１－４所示為提取ＲＮＡ的４次重復(fù)??Ｆｉｇ．?２－１?Ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｌｅａｆ?ｏｆ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??１?－４?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?ｆｏｕｒ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ??—??ＢＢ??圖２－２梅花奶Ｃ７基因擴(kuò)增ＰＣＲ產(chǎn)物??Ｆｉｇ．?２－２?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?．ＳＹＸＶｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ｐ．?ｍｕｍｅ??Ｍ，?ＤＬ２０００；?ＳＯＣ１－Ｉ，?ＰｍＳＯＣｌ－１；?ＳＯＣ１－２，?ＰｍＳＯＣｌ－２：?ＳＯＣ１－３，?ＰｍＳＯＣｌ－３??〇?ｃｈｒ１?ｃｈｒ２?ｃｈｒ３?ｃｈｒ４?ｃｈｒ５?ｃｈｒ６?ｃｈｒ７?ｃｈｒ８??５Ｍｂ?ｐ＾ａｍ２＾??ＰｍＯＡＭ５ｆ?ＰｍＳＯＣ１－３－??ＰｍＤＡＭ６？??＿２＿?＿＿??ＰｍＳＶＰＩ－?ＰｍＳ〇Ｃ１＇１￣??１７?３０＾?１７?３?，??ＰｍＳＯＣ１－２－?２］?１??２４?４７＾?２４?７?Ｋ??２７?７＾?２６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雷竹和擬南芥SOC1多聚體差異性分析[J]. 施泉,陳曉沛,林新春,徐永漢,徐英武.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]水曲柳SOC1基因表達(dá)載體的構(gòu)建及生物信息學(xué)分析[J]. 付德山,朱珠,崔麗婷,詹亞光,齊鳳慧.  西南林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(06)
[3]茶樹LEAFY基因的克隆和表達(dá)分析[J]. 韓興杰,徐玲玲,廖亮,李同建,鄧輝勝,樊啟水.  園藝學(xué)報(bào). 2015(08)
[4]芒果MSOC1基因的克隆與表達(dá)分析[J]. 魏軍亞,唐杰,劉國銀,劉德兵,陳業(yè)淵.  西北植物學(xué)報(bào). 2015(06)
[5]中國水仙中SVP類似基因NSVP2可促進(jìn)擬南芥的花序分枝[J]. 李小方,李瑞,張雪平,楊雪,邱艷,張偉,孫越,王洋.  植物生理學(xué)報(bào). 2014(12)
[6]牡丹開花調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子基因PrSOC1的克隆與表達(dá)分析[J]. 劉傳嬌,王順利,薛璟祺,朱富勇,任秀霞,李名揚(yáng),張秀新.  園藝學(xué)報(bào). 2014(11)
[7]葡萄SVP類MADS-box基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 楊堃,張朝紅,李樹秀,張旭彤,王躍進(jìn).  西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(04)
[8]草莓LFY同源基因的克隆及其表達(dá)分析[J]. 劉月學(xué),鄒冬梅,李賀,張志宏,馬躍,代紅艷.  園藝學(xué)報(bào). 2012(05)
[9]白樺BpSOC1基因的克隆及時(shí)序表達(dá)分析[J]. 劉菲菲,李慧玉,王姍,劉桂豐.  東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(04)
[10]棗樹ZjLFY基因cDNA片段的克隆與表達(dá)分析[J]. 孟玉平,曹秋芬,孫海峰.  果樹學(xué)報(bào). 2010(05)

碩士論文
[1]梅花花器官cDNA文庫的構(gòu)建及其PmAP3、PmPI、PmAG基因的克隆[D]. 駱江偉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：2918852