西葫蘆屬于葫蘆科南瓜屬西葫蘆種,營養(yǎng)豐富,具有重要的藥用價值和經(jīng)濟價值,適應性強,栽培面積大,深受人們喜愛。對西葫蘆種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究,有利于種質(zhì)資源的搜集、整理、鑒定、開發(fā)利用和保存。形態(tài)標記從表觀性狀反映種質(zhì)間的差異,分子標記從DNA水平反映種質(zhì)間的差異。ISSR分子標記技術具有操作簡單、高分辨率、高重復性、多態(tài)性豐富和安全性高的優(yōu)點,已被廣泛用于品種鑒定和多樣性分析等方面的研究。本研究用形態(tài)學標記和ISSR標記對44份西葫蘆的遺傳多樣性進行了研究,主要結果如下:1.分別對30份親本和14份品種的13個形態(tài)指標進行了分析。結果表明,西葫蘆13個形態(tài)指標具有豐富的遺傳多樣性。30份親本變異系數(shù)最大的株幅(56.36%),最小的是老瓜橫徑(17.14%);Shannon多樣信息指數(shù)以葉面積最大(1.96),生長習性的最小(0.61)。14份品種變異系數(shù)最大的是生長習性(34.59%),最小的是瓜形指數(shù)(15.06%);Shannon多樣信息指數(shù)最大的是葉柄長度(1.65),最小的是老瓜橫徑(0.41)。2.形態(tài)學性狀聚類結果表明,在相似系數(shù)為0.20處,將30份親本材料分為3類。第一類包括30和33這兩個長長棒形父本材料;第二類包括10份長棒形父本材料;第三類將瓜形為高圓、短筒、圓筒和長筒的18份母本材料聚為一類。在相似系數(shù)為0.23處,將14份品種材料分為3類。34號扁圓形品種單獨聚為一類,第二類包括6份矮生材料,第三類包括7份半矮生材料。由此可見瓜形和蔓性是西葫蘆種質(zhì)資源的重要形態(tài)指標。3.從50條引物中篩選出18條引物用于ISSR標記分析,擴增出203條帶,其中多態(tài)性條帶153條,多態(tài)比率為74.9%,平均每條引物11.3條帶,8.4個為多態(tài)性條帶。Na、Ne、H、I 的平均值分別為 2、1.6117、0.3493、0.5182。4.ISSR標記的聚類結果顯示,不同品種的母本和父本都分別聚類到不同的類群中,在相似系數(shù)為0.55處,將30份親本材料分為2個類群。第一類為2個長長棒形的父本材料,第二類的28份材料在相似系數(shù)0.67處分為3個母本亞類和1個父本亞類,第一亞類包括4份圓筒形母本材料,第二亞類包括4份長筒形母本材料,第三亞類包括11份長棒形父本材料,第四亞類包括9份高圓到短筒形的母本材料。在相似系數(shù)為0.62處,將14份品種分為4類。第一類包括6份矮生的露地栽培材料,第二類包括3份半矮生春秋保護地栽培材料,第三類包括4份半矮生越冬茬材料,扁圓形的34號品種單獨聚為一類。5.形態(tài)學與ISSR標記聚類結果基本一致。從親本材料聚類結果看,2個長長棒父本材料與其他親本材料親緣關系較遠都首先聚為一類,其余親本分別聚到母本群和父本群中,不同的是ISSR標記聚類把母本進一步分為3個亞類;從品種聚類結果看,都是扁圓形34號品種單獨聚為一類,矮生品種聚為一類,半矮生品種聚為一類,不同的是ISSR標記聚類進一步把半矮生品種分為兩類。品種的形態(tài)標記和ISSR標記的相關系數(shù)為0.4228,高于親本材料的相關系數(shù)0.2012,二者的一致性較低。6.ISSR標記聚類結果表明,親本間相似系數(shù)較高為0.55-1,其中14和5、12和15以及9、3和18、23和26都分別為同一個親本材料,可見我國目前西葫蘆育種所用的材料遺傳背景較窄,在今后育種中應廣泛收集資源。
【學位單位】：山西農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2017
【中圖分類】：S642.6
【部分圖文】：

ＤＮＡ的質(zhì)量是ＩＳＳＲ標記最基本的要求，本試驗用ＣＴＡＢ法提�。模危粒�??核酸蛋白儀對提取的西葫蘆ＤＮＡ進行了檢測，結果顯示所提的ＤＮＡＯＤ２６Ｑ／ＯＤ２８〇??在１．９０左右，純度較高，部分結果如下表３－２所示。從圖３－１電泳結果來看，所??提的ＤＮＡ主帶清晰，排列整齊，能夠滿足ＩＳＳＲ分析的要求。??表３－２部分ＤＮＡ檢測結果??Ｔａｂｌｅ?３－２?ＤＮＡ?ｔｅｓｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｐａｒｔｉａｌ?Ｃ．ｐｅｐｏ??編號?濃度（ｎｇ／ｕＬ）?ＯＤ２６０／ＯＤ２８０?編號?濃度（ｎｇ／ｕＬ）?ＯＤ２６０／ＯＤ２８０??Ｎｕｍｂｅｒ?Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?Ｎｕｍｂｅｒ?Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??１?１４３８．２?１．８５?１１?１１２９．８?１．９１??２?１５７５．８?１．８７?１２?２４３１．８?１．８６??３?１６５７．２?１．９０?１３?２１１５．３?１．９５??４?１５２０．０?１．８４?１４?１９２３．７?１．９０??５?１１９８．３?１．８７?１５?２２２４．０?１．９７??６?１８９２．５?１．９２?１６?１３８１，５?１．９３??７?６７２．１?１．９０?１７?７１２．０?１．９７??８?１６４６．４?１．９４?１８?１７２８．３?１．９４??９?１８２４．２?１．８９?１９?１５７６．８?１．８５???１０?１２５６．７?Ｌ９７?２０?２０４５．６?

圖３－１?１０個西葫蘆材料基因組ＤＮＡ檢測結果??Ｆｉｇ．３－１?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｃ．ｐｅｐｏ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??３．２．１．２ＩＳＳＲ反應體系??ＩＳＳＲ－ＰＣＲ反應體系為２０?｜ｉｉＬ，具體如下表：????試齊丨Ｊ?ｒｅａｇｅｎｔ?使用量ｕｓａｇｅ???ＤＮＡ?（５０ｎｇ／（ｊ．Ｌ）?１?（Ｊ．Ｌ??引物（ｌＯｐｍｏｌ／Ｌ）?３?［ｉＬ??Ｍａｓｔｅｒ?Ｍｉｘ?１０?）Ｊ．Ｌ???ｄｄＨ２Ｑ?６ｊ〇Ｌ???３．２．１．３引物篩選及退火溫度的確定??根據(jù)哥倫比亞大學公布的引物序列以及盧亞楠、司旻星、鐘開勤等人［７７，８３，９５１??研究中所用的ＩＳＳＲ引物共設計了?５０條引物，不同引物擴增出的條帶亮度、帶型、??數(shù)量、多態(tài)性帶數(shù)存在差異，從這５０條引物中篩選出了?１８條擴增條帶清晰、多??態(tài)性好的引物。??表３－３篩選出的１８條ＩＳＳＲ引物??Ｔａｂｌｅ?３－３?Ｔｈｅ?ｓｅｌｅｃｔｅｄ?１８?ｐｒｉｍｅｒｓ??引物
【參考文獻】

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本文編號：2864264