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滇東鳳仙花屬植物遺傳多樣性及滇水金鳳AGAMOUS基因克隆分析

發(fā)布時間:2020-08-15 11:06
【摘要】:鳳仙花(Impatiens L.)是鳳仙花科鳳仙花屬植物的統(tǒng)稱,多為一年生或多年生草本觀賞花卉,花大色艷且花形奇特,花瓣具有旗瓣、翼瓣、唇瓣之分,可作盆花、切花,也可用于花壇、花境。本研究通過比較系統(tǒng)地收集整理滇東地區(qū)(昭通、曲靖、文山、紅河及昆明該5個州市)鳳仙花屬30個種、2個變種的植物材料,對其地理分布及外部形態(tài)進行了分析,并采用定性分析和定量分析相結合的方法對這些植物資源進行了評價和分析。在此基礎上采用ISSR、trnL-trnnF、atpB-rbcL、DEF等分子標記技術對其遺傳多樣性和親緣關系進行了比較分析,對滇東地區(qū)鳳仙花屬植物的起源、親緣關系及遺傳多樣性做了探討;并對滇水金鳳AGAMOUS基因進行分離克隆及分析;為其資源保護、可持續(xù)開發(fā)利用以及遺傳育種研究提供了新的基礎數據和科學依據,也為城市林業(yè)的發(fā)展提供對城市生態(tài)和經濟具有實際或潛在效益的鳳仙花屬植物,以便進一步地研究培育及科學管理。1.通過在研究范圍進行實地調查,共收集鳳仙花屬植物32種或變種,其主要分布于海拔1300-3500m,多生長在山間路旁、草叢、林下濕地等濕度相對較大的地方;形態(tài)特征因種差異,株高10-90cm不等;花色有黃色、紫色、白色、粉色等;葉片長度3.0~13.2 cm,寬度為1.6~3.9 cm,葉面積為3.88~25.22cm~2;種子的直徑為1.04~2.81mm,千粒重為0.793-6.144gg。旗瓣多圓形,部分中肋突起;翼瓣基裂片有圓形、楔形、鈍三角形等,上裂片帶狀或斧形;唇瓣以漏斗形和囊狀為主;葉緣有圓齒與鋸齒、齒間有無剛毛之分。2.通過對滇東地區(qū)鳳仙花屬植物觀賞價值的研究,初步確定了4個評價層次(目標層、約束層、標準層、最底層)和17個評價指標(花色、花形、花序樣式、花量、花期等),建立了滇東鳳仙花屬植物資源觀賞價值可持續(xù)利用的層次分析(AHP)評價模型,并用該模型對從滇東地區(qū)收集到的鳳仙花屬32個種或變種進行評價。結果表明蒙自鳳仙花、滇南鳳仙花、那坡鳳仙花等13個種觀賞價值較高,本文結合特性對這些種或變種的園林用途進行了初步評價。3.采用試劑盒法提取上述源自滇東地區(qū)的32個種或變種的鳳仙花屬植物材料的DNA,采用23條ISSR引物進行PCR擴增,共獲得多態(tài)性譜帶223條,多態(tài)性比率為94.9%。其中多態(tài)性比率(ppb)達到100%的有14條引物,占60.9%;每條引物擴增出9.70條譜帶。結果表明32個種或變種的遺傳相似系數(GS)變化范圍在0.540-0.990之間,說明其遺傳多樣性比較豐富。4.利用ISSR、atpB-rbcL、trnL-F、DEF基因片段對32個種或變種進行系統(tǒng)發(fā)育分析,發(fā)現輻射鳳仙花、紅紋鳳仙花總狀鳳仙花等在4種分子標記的系統(tǒng)樹中都聚為一支,說明其遺傳相似性較高,親緣關系更近。由ISSR、DEF、atpB-rbcL、trnL-trnF的聚類分析可以看出這些種或變種的花部形態(tài)特征,即花型大小、旗瓣形狀、翼瓣形狀、唇瓣形狀等性狀可作為該屬分類的重要特征,尤其翼瓣形狀特征在滇東鳳仙花屬植物的分類中表現更為突出。研究表明:四種標記方法中利用ISSR和DEF基因開展滇東鳳仙花屬植物遺傳多樣性研究能更好地與花部形態(tài)特征為該屬植物種間劃分的關鍵性狀保持一致。5.根據Genbank中已報道11個物種AGAMOUS基因核苷酸序列設計合成一對簡并引物,并且通過RT-PCR方法,分別克隆以獲得滇水金鳳AGAMOUS基因全長。運用相關軟件對其基因序列進行比對和分析,由此發(fā)現克隆所得基因與Genbank中報道的AGAMOUS基因具有較高的相似性。對所克隆得到的AGAMOUS基因進行氨基酸序列的結構分析,發(fā)現該序列具有非常保守的MADS-box區(qū)和K區(qū),并且對新克隆的滇水金鳳AGAMOUS基因以及Genbank中報道的其他科屬物種的AGAMOUS基因進行同源性比對和系統(tǒng)進化分析,發(fā)現克隆得到的AGAMOUS基因與鳳仙花的AGAMOUS基因之間同源性較高,親緣關系也最為接近。
【學位授予單位】:西南林業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S681.1
【圖文】:

鳳仙花屬植物,種名,變種,形態(tài)


2 鳳仙花屬植物資源調查與分析數的 46.875%,紅色系有 8 種占總數的 25%,白色系有色系有 2 種占總數的 6.25%;同時發(fā)現該屬植物花部常鳳仙花解剖形態(tài)觀察,發(fā)現鳳仙花屬植物存在 2 萼及 4 中僅發(fā)現 1 種 4 萼鳳仙花;旗瓣形狀分別以圓形、近似,少數多裂或不裂,基部裂片分別呈橢圓形、近卵圓形片分別呈斧形、寬斧形、狹斧形、近橢圓形和半月形等斜囊狀、漏斗形、狹漏斗形和舟狀等(詳見圖 2-1、圖 2

示意圖,花部,鳳仙花,示意圖


圖 2-2 鳳仙花花部分離示意圖Fig.2-2 The partition of flower organ of Impatiens L.A. 花的橫切示意圖(引自 Gray-wilson 1980);B. 花的各部分分解圖A.Transection figure of flower(from Gray-wilson 1980); B. Decomposition of each part of flower

花部,鳳仙花屬植物,種名,滇東


圖 2-2 鳳仙花花部分離示意圖Fig.2-2 The partition of flower organ of Impatiens L.A. 花的橫切示意圖(引自 Gray-wilson 1980);B. 花的各部分分解圖ansection figure of flower(from Gray-wilson 1980); B. Decomposition of each part

【參考文獻】

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本文編號:2794024

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