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滇東鳳仙花屬植物遺傳多樣性及滇水金鳳AGAMOUS基因克隆分析

發(fā)布時間:2020-08-15 11:06
【摘要】:鳳仙花(Impatiens L.)是鳳仙花科鳳仙花屬植物的統(tǒng)稱,多為一年生或多年生草本觀賞花卉,花大色艷且花形奇特,花瓣具有旗瓣、翼瓣、唇瓣之分,可作盆花、切花,也可用于花壇、花境。本研究通過比較系統(tǒng)地收集整理滇東地區(qū)(昭通、曲靖、文山、紅河及昆明該5個州市)鳳仙花屬30個種、2個變種的植物材料,對其地理分布及外部形態(tài)進行了分析,并采用定性分析和定量分析相結(jié)合的方法對這些植物資源進行了評價和分析。在此基礎(chǔ)上采用ISSR、trnL-trnnF、atpB-rbcL、DEF等分子標記技術(shù)對其遺傳多樣性和親緣關(guān)系進行了比較分析,對滇東地區(qū)鳳仙花屬植物的起源、親緣關(guān)系及遺傳多樣性做了探討;并對滇水金鳳AGAMOUS基因進行分離克隆及分析;為其資源保護、可持續(xù)開發(fā)利用以及遺傳育種研究提供了新的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和科學依據(jù),也為城市林業(yè)的發(fā)展提供對城市生態(tài)和經(jīng)濟具有實際或潛在效益的鳳仙花屬植物,以便進一步地研究培育及科學管理。1.通過在研究范圍進行實地調(diào)查,共收集鳳仙花屬植物32種或變種,其主要分布于海拔1300-3500m,多生長在山間路旁、草叢、林下濕地等濕度相對較大的地方;形態(tài)特征因種差異,株高10-90cm不等;花色有黃色、紫色、白色、粉色等;葉片長度3.0~13.2 cm,寬度為1.6~3.9 cm,葉面積為3.88~25.22cm~2;種子的直徑為1.04~2.81mm,千粒重為0.793-6.144gg。旗瓣多圓形,部分中肋突起;翼瓣基裂片有圓形、楔形、鈍三角形等,上裂片帶狀或斧形;唇瓣以漏斗形和囊狀為主;葉緣有圓齒與鋸齒、齒間有無剛毛之分。2.通過對滇東地區(qū)鳳仙花屬植物觀賞價值的研究,初步確定了4個評價層次(目標層、約束層、標準層、最底層)和17個評價指標(花色、花形、花序樣式、花量、花期等),建立了滇東鳳仙花屬植物資源觀賞價值可持續(xù)利用的層次分析(AHP)評價模型,并用該模型對從滇東地區(qū)收集到的鳳仙花屬32個種或變種進行評價。結(jié)果表明蒙自鳳仙花、滇南鳳仙花、那坡鳳仙花等13個種觀賞價值較高,本文結(jié)合特性對這些種或變種的園林用途進行了初步評價。3.采用試劑盒法提取上述源自滇東地區(qū)的32個種或變種的鳳仙花屬植物材料的DNA,采用23條ISSR引物進行PCR擴增,共獲得多態(tài)性譜帶223條,多態(tài)性比率為94.9%。其中多態(tài)性比率(ppb)達到100%的有14條引物,占60.9%;每條引物擴增出9.70條譜帶。結(jié)果表明32個種或變種的遺傳相似系數(shù)(GS)變化范圍在0.540-0.990之間,說明其遺傳多樣性比較豐富。4.利用ISSR、atpB-rbcL、trnL-F、DEF基因片段對32個種或變種進行系統(tǒng)發(fā)育分析,發(fā)現(xiàn)輻射鳳仙花、紅紋鳳仙花總狀鳳仙花等在4種分子標記的系統(tǒng)樹中都聚為一支,說明其遺傳相似性較高,親緣關(guān)系更近。由ISSR、DEF、atpB-rbcL、trnL-trnF的聚類分析可以看出這些種或變種的花部形態(tài)特征,即花型大小、旗瓣形狀、翼瓣形狀、唇瓣形狀等性狀可作為該屬分類的重要特征,尤其翼瓣形狀特征在滇東鳳仙花屬植物的分類中表現(xiàn)更為突出。研究表明:四種標記方法中利用ISSR和DEF基因開展滇東鳳仙花屬植物遺傳多樣性研究能更好地與花部形態(tài)特征為該屬植物種間劃分的關(guān)鍵性狀保持一致。5.根據(jù)Genbank中已報道11個物種AGAMOUS基因核苷酸序列設(shè)計合成一對簡并引物,并且通過RT-PCR方法,分別克隆以獲得滇水金鳳AGAMOUS基因全長。運用相關(guān)軟件對其基因序列進行比對和分析,由此發(fā)現(xiàn)克隆所得基因與Genbank中報道的AGAMOUS基因具有較高的相似性。對所克隆得到的AGAMOUS基因進行氨基酸序列的結(jié)構(gòu)分析,發(fā)現(xiàn)該序列具有非常保守的MADS-box區(qū)和K區(qū),并且對新克隆的滇水金鳳AGAMOUS基因以及Genbank中報道的其他科屬物種的AGAMOUS基因進行同源性比對和系統(tǒng)進化分析,發(fā)現(xiàn)克隆得到的AGAMOUS基因與鳳仙花的AGAMOUS基因之間同源性較高,親緣關(guān)系也最為接近。
【學位授予單位】:西南林業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S681.1
【圖文】:

鳳仙花屬植物,種名,變種,形態(tài)


2 鳳仙花屬植物資源調(diào)查與分析數(shù)的 46.875%,紅色系有 8 種占總數(shù)的 25%,白色系有色系有 2 種占總數(shù)的 6.25%;同時發(fā)現(xiàn)該屬植物花部常鳳仙花解剖形態(tài)觀察,發(fā)現(xiàn)鳳仙花屬植物存在 2 萼及 4 中僅發(fā)現(xiàn) 1 種 4 萼鳳仙花;旗瓣形狀分別以圓形、近似,少數(shù)多裂或不裂,基部裂片分別呈橢圓形、近卵圓形片分別呈斧形、寬斧形、狹斧形、近橢圓形和半月形等斜囊狀、漏斗形、狹漏斗形和舟狀等(詳見圖 2-1、圖 2

示意圖,花部,鳳仙花,示意圖


圖 2-2 鳳仙花花部分離示意圖Fig.2-2 The partition of flower organ of Impatiens L.A. 花的橫切示意圖(引自 Gray-wilson 1980);B. 花的各部分分解圖A.Transection figure of flower(from Gray-wilson 1980); B. Decomposition of each part of flower

花部,鳳仙花屬植物,種名,滇東


圖 2-2 鳳仙花花部分離示意圖Fig.2-2 The partition of flower organ of Impatiens L.A. 花的橫切示意圖(引自 Gray-wilson 1980);B. 花的各部分分解圖ansection figure of flower(from Gray-wilson 1980); B. Decomposition of each part

【參考文獻】

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本文編號:2794024

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