【摘要】：猴頭菇營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美,近些年來(lái)對(duì)它的研究大多集中在深加工方面,在菌種鑒定、分類方面的研究較少。以往對(duì)猴頭菇品種的鑒定及分類多數(shù)采用形態(tài)學(xué)分類方法,不能從根本上準(zhǔn)確的對(duì)猴頭菇品種進(jìn)行分類,會(huì)導(dǎo)致分類混雜的現(xiàn)象。有研究表明,運(yùn)用DNA條形碼技術(shù)可以很好的區(qū)分物種,甚至可以發(fā)現(xiàn)新物種,同時(shí)會(huì)大大提高育種效率。本文應(yīng)用分子生物學(xué)方法、選定β-tubulin基因作為條形碼序列的目標(biāo)基因,依據(jù)NCBI中猴頭菇β-tubulin基因序列的全長(zhǎng),設(shè)計(jì)了一對(duì)用于擴(kuò)增目標(biāo)基因的引物:Betu-F1:ATGCGTGAAATCGTCCACC;Betu-R2:GAAGACGGGGGAAAG GAAC。應(yīng)用上述引物對(duì)現(xiàn)有的19個(gè)猴頭菇的品種進(jìn)行PCR鑒定。測(cè)序后的序列結(jié)合BLAST、Clustal、MEGA、BioEdit等軟件分析、比對(duì)得到多態(tài)性位點(diǎn)。分析多態(tài)性位點(diǎn)設(shè)計(jì)出構(gòu)建條形碼序列的特異性引物,經(jīng)驗(yàn)證表明,猴頭菇RT9品種的三個(gè)特有的條形碼成功獲得。DNA條形碼技術(shù)在物種鑒定及分類方面具簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn),但該技術(shù)在菌物界的研究起步較晚,目前為止沒(méi)有確定的目標(biāo)基因,因此,希望本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以為后續(xù)相關(guān)方面的研究提供幫助,同時(shí)也希望從事此類研究的有關(guān)部門及科研人員可以提高對(duì)此技術(shù)的關(guān)注,進(jìn)而推進(jìn)菌物DNA條形碼技術(shù)在相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：牡丹江師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S646
【圖文】：

PGEM-TEasy載體Fig.1-1PGEM-TEasyvector

TA克隆原理

圖 3-2 目的基因切膠回收M：DL-2000 MarkerFig.3-2 Target gene gel recoveryM：DL-2000 Marker

【參考文獻(xiàn)】

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10 顧

本文編號(hào)：2788698